產(chǎn)品說明書
FAQ
COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
產(chǎn)品簡介
鏈霉親和素(streptavidin)是一種來源于阿維丁鏈霉菌由四個(gè)相同亞基組成的生物素結(jié)合蛋白質(zhì)，每個(gè)亞基均有一個(gè)與生物素有高親和力的結(jié)合位點(diǎn)。生物學(xué)上常將鏈霉親和素包被在磁珠上，借助鏈霉親和素-生物素高親和力結(jié)合特性，結(jié)合生物素化蛋白、多肽、及非蛋白質(zhì)（如各種DNA、RNA分子）等分子，進(jìn)而從混合體系中快速分離生物素化成分，進(jìn)行如親和純化，細(xì)胞分離，DNA探針分析和mRNA分離等多方面應(yīng)用。
翌圣streptavidin（SAV）MagBeads是將鏈霉親和素(streptavidin)通過化學(xué)方法固定在聚合物磁性微球上，應(yīng)用生物素與鏈霉親和素之間的相互作用來實(shí)現(xiàn)固定化生物素或生物化的蛋白、抗體等物質(zhì)的目的。
翌圣為您提供蛋白純化實(shí)驗(yàn)整體解決方案，相關(guān)產(chǎn)品選購請參考：蛋白純化系列產(chǎn)品-選購指南
產(chǎn)品信息
|
貨號 |
47503ES03 / 47503ES08 |
|
規(guī)格 |
1 mL /5×1 mL |
產(chǎn)品性質(zhì)
|
基質(zhì)（Matrix spherical） |
聚合物磁性微球 |
|
配體（Ligand） |
鏈霉親和素 |
|
結(jié)合能力（Binding Capacity） |
＞20 µg biotinylated IgG /mg磁珠 |
|
粒徑（Particle size） |
1 µm |
|
磁珠濃度（Concentration） |
10 mg/mL |
|
儲存緩沖液（Storage Buffer） |
PBS, 0.01% Tween-20, 0.02% NaN3 |
儲存條件
2~8℃保存，有效期2年。
使用說明
一、磁珠準(zhǔn)備
- 將Streptavidin (SAV) MagBeads顛倒或漩渦混合均勻。
- 取100 μL Streptavidin (SAV) MagBeads加入新的離心管中。放置在磁分離器上，待溶液變澄清后，用移液器吸棄保護(hù)液。
- 將離心管從磁分離器上取下來，加入500 μL清洗緩沖液，混勻，放置在磁分離器上，收集磁珠，用移液器吸棄保護(hù)液。重復(fù)洗2次。
推薦清洗緩沖液：
核酸樣品：TES緩沖液， 抗體/蛋白樣品：PBS緩沖液, pH7.4
二、生物素化分子固定
- 需要準(zhǔn)備的試劑
生物素化樣品平衡/洗雜液：
核酸樣品：TES緩沖液， 抗體/蛋白樣品：PBS緩沖液, pH7.4
2.操作流程
a. 加入100 μL平衡液（2.1）將磁珠懸浮。
b. 加入適量生物素化樣品溶液，充分混勻。
c. 室溫孵育1h以上（具體時(shí)間根據(jù)結(jié)合效果調(diào)整），可以振蕩或漩渦混合均勻。
d. 將離心管置于磁分離器上，待磁珠全部吸附后，吸棄上清液。如有需要可留做進(jìn)一步檢測。
e. 加入1 mL洗雜液（2.1）混合均勻，置于磁分離器上，待磁珠全部吸附后，吸棄上清液。重復(fù)洗雜至少3次。
f. 用下游實(shí)驗(yàn)用的溶液，將固定好生物素化分子的磁珠重新懸浮至合適濃度，以備后續(xù)使用。下面以固定抗體后純化抗原為例
三、抗原的純化
- 試劑準(zhǔn)備
生物素化抗體
平衡液/洗雜液：PBS緩沖液, pH7.4
洗脫液：0.1 M Glycine-HCl, pH 2.5-2.8
中和液：1M Tris-HCl, pH 8.5
- 純化流程
- 取100 μL的磁珠（步驟2中已經(jīng)固定好生物素抗體的磁珠）加入離心管，置于磁分離器上，待磁珠全部吸附后，吸棄上清液。
- 加入1mL平衡液（3.1）混合均勻，置于磁分離器上，待磁珠全部吸附后，吸棄上清液。重復(fù)洗雜至少3次。
- 向上一步準(zhǔn)備好的磁珠中，加入抗原樣品輕輕的混合均勻，體積不足200 μL用抗原溶液補(bǔ)足。室溫孵育30 min以上或者4℃過夜，確保磁珠充分懸浮以免影響吸附效果。
- 加入1mL洗雜液（3.1）混合均勻，置于磁分離器上，待磁珠全部吸附后，吸棄上清液。重復(fù)洗雜至少3次。
- 加入300-500 μL洗脫液（3.1）混合均勻，室溫孵育5 min。
- 將離心管置于磁分離器上，待磁珠全部吸附后，吸取含抗原樣品的上清液。如有需要可留做進(jìn)一步檢測。
- 加入洗脫體積十分之一的中和液中和。100 μL洗脫液中加入10 μL中和液中和。
- 如有需要可重復(fù)步驟e-g兩次，增加洗脫效率。
注意事項(xiàng)
- 免疫磁珠易沉降聚集，因此產(chǎn)品使用前要劇烈振蕩或超聲處理。
- 本產(chǎn)品僅作科研用途。
- 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20231108
