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產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品是2×Mix預(yù)混合試劑,能夠?qū)崿F(xiàn)在單個(gè)反應(yīng)孔中進(jìn)行多重?zé)晒舛?/span>PCR。本產(chǎn)品含有基因改造的熱啟動(dòng)Taq酶,極大地提高了擴(kuò)增靈敏度和特異性,本產(chǎn)品對(duì)多重反應(yīng)緩沖體系進(jìn)行了深度優(yōu)化,能夠提高反應(yīng)的擴(kuò)增效率,促進(jìn)低濃度模板的有效擴(kuò)增。本產(chǎn)品可用于基因分型和基因多重定量分析。
產(chǎn)品組分
組分編號(hào) |
組分名稱 |
產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 |
|||
11208ES03 (1 mL) |
11208ES06 (5 × 1mL) |
11208ES08 (5 mL) |
11208ES60 (20×5 mL) |
||
11208-A |
2×Hieff Unicon® TaqMan Multiplex qPCR Master Mix |
1 mL |
5 × 1 mL |
5 mL |
20 × 5 mL |
11208-B |
50×Low Rox |
40 μL |
200 μL |
200 μL |
20 × 200 μL |
11208-C |
50×High Rox |
40 μL |
200 μL |
200 μL |
20 × 200 μL |
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20°C儲(chǔ)存,有效期18個(gè)月。
反應(yīng)體系
組分 |
體積(μL) |
終濃度 |
Hieff Unicon® TaqMan Multiplex qPCR Master Mix |
10 |
1× |
Primer mix |
x |
0.1-1 μM |
TaqMan Probe mix |
y |
50-300 nM |
50×Low or High Rox |
0.4 |
1× |
模板DNA/cDNA |
1-100 ng |
- |
ddH2O |
up to 20 |
- |
【注】
a. 上表中模板量和引物濃度以及探針濃度均為推薦量,可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)情況進(jìn)行調(diào)整,選擇最適投入量和濃度
b. 一般情況下,每條引物濃度為 0.2 μM 即可得到較好的擴(kuò)增效果,引物濃度可在 0.1-1 μM 的范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)節(jié);
c. 反應(yīng)體系可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行等比例調(diào)節(jié),模板體積不超過總體積的 1/10。
適用機(jī)型
Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR.
參考擴(kuò)增程序
循環(huán)步驟 |
溫度 |
時(shí)間 |
循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 |
95°C |
5 min |
1 |
變性 |
95°C |
5 sec |
40 |
退火/延伸 |
60°C |
30 sec |
【注】
a. 某些情況下,可通過調(diào)節(jié)退火延伸時(shí)間提高多重 qPCR 反應(yīng)的性能;
b. 反應(yīng)結(jié)束后可通過瓊脂糖凝膠電泳確認(rèn)產(chǎn)物的特異性;
注意事項(xiàng)
1. 請(qǐng)于使用前確保產(chǎn)品完全解凍并徹底混勻,短暫離心收集至管底后置于冰上備用。
2. 為避免樣品間交叉污染和氣溶膠污染,推薦在超凈臺(tái)中進(jìn)行反應(yīng)體系的配制。
3. 使用過程中避免產(chǎn)品的反復(fù)凍融。
4. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
HB220808