Mouse IL-18 ELISA Kit 小鼠IL-18 ELISA試劑盒
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已發(fā)表文獻(xiàn)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
白細(xì)胞介素-18（IL-18），也稱為IL-1F4，是一種屬于IL-1超家族的促炎細(xì)胞因子，由巨噬細(xì)胞和其他細(xì)胞產(chǎn)生。成熟的人IL-18與小鼠和大鼠IL-18具有大約63%的氨基酸序列同一性。IL-18的激活是由感染或組織損傷誘導(dǎo)的，并導(dǎo)致慢性炎癥的疾病病理學(xué)。在IL-12或IL-15存在的情況下，IL-18通過誘導(dǎo)IFN-γ的產(chǎn)生以及CD8+T細(xì)胞和NK細(xì)胞的溶解活性來(lái)增強(qiáng)抗病毒Th1免疫應(yīng)答。在不存在IL-12或IL-15的情況下，IL-18促進(jìn)CD4+T細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞產(chǎn)生Th2細(xì)胞因子IL-4和IL-13。IL-18還促進(jìn)髓系樹突狀細(xì)胞成熟并觸發(fā)中性粒細(xì)胞呼吸爆發(fā)。在癌癥中，IL-18表現(xiàn)出多種活性，包括增強(qiáng)抗腫瘤免疫、抑制或促進(jìn)血管生成、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移。
翌圣Mouse IL-18 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒，用于定量測(cè)定血清、血漿中的小鼠白介素18(Mouse IL-18)。特異性抗小鼠白介素18抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本，經(jīng)過孵育，樣本中存在的小鼠白介素18與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測(cè)抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中小鼠白介素18的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng)570 - 630 nm)測(cè)定吸光度值。
產(chǎn)品信息
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貨號(hào) |
98011ES48 / 98011ES96 |
|
規(guī)格 |
48 T / 96 T |
|
檢測(cè)范圍 |
31.25-2000 pg/mL |
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檢測(cè)方法 |
雙抗夾心法 |
|
檢測(cè)物種 |
小鼠 |
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檢測(cè)時(shí)長(zhǎng) |
4.5小時(shí) |
|
靈敏度 |
17.44 pg/mL |
|
稀釋線性 |
82 - 121% |
|
回收率 |
93 - 124% |
|
板內(nèi)差 |
3.6% |
|
板間差 |
5.2% |
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
- 標(biāo)曲數(shù)據(jù)
|
濃度（pg/mL） |
顯色值 |
平均值 |
校準(zhǔn)值 |
|
|
2000 |
2.719 |
2.785 |
2.752 |
2.207 |
|
1000 |
1.794 |
1.769 |
1.782 |
1.296 |
|
500 |
1.097 |
1.017 |
1.057 |
0.683 |
|
250 |
0.611 |
0.570 |
0.590 |
0.346 |
|
125 |
0.342 |
0.309 |
0.325 |
0.183 |
|
62.5 |
0.197 |
0.180 |
0.189 |
0.108 |
|
31.25 |
0.125 |
0.113 |
0.119 |
0.074 |
|
0 |
0.040 |
0.039 |
0.040 |
/ |
數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，生成的標(biāo)曲用于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
- 靈敏度檢測(cè)
IL-18的最低檢測(cè)限為17.44 pg/mL，通過使用重復(fù)檢測(cè)20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。
- 精密度檢測(cè)
酶標(biāo)板內(nèi)精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測(cè)定8次，評(píng)估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。
酶標(biāo)板間精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測(cè)24次，評(píng)估酶標(biāo)板間的精密度。
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項(xiàng)目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
|
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
8 |
8 |
8 |
24 |
24 |
24 |
|
|
平均值 |
1287.1 |
282.8 |
98.3 |
1273.2 |
283.6 |
102.4 |
|
標(biāo)準(zhǔn)差 |
43.8 |
11.1 |
3.4 |
75.4 |
11.7 |
5.6 |
|
變異系數(shù)（%） |
3.4 |
3.9 |
3.5 |
5.9 |
4.1 |
5.5 |
- 回收率檢測(cè)
通過不同水平的IL-18添加于樣本中來(lái)測(cè)定回收率，其回收率如下:
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樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
|
血清 |
117.5 |
100.3-124.3 |
|
血漿 |
106.1 |
93.3-113.8 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
111.8 |
100.8-121.6 |
- 稀釋線性檢測(cè)
|
血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
97.5 |
91.1-103.9 |
|
1:04 |
99.9 |
94.9-108.5 |
|
1:08 |
104.1 |
99.1-108.3 |
|
1:16 |
99.3 |
93.6-106.3 |
|
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
101.5 |
85.2-112.2 |
|
1:04 |
94.5 |
89.5-103.7 |
|
1:08 |
109.6 |
98.4-120.3 |
|
1:16 |
105.8 |
92.3-116.3 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
93.0 |
81.7-102.8 |
|
1:04 |
97.4 |
93.1-101.5 |
|
1:08 |
114.0 |
104.5-120.7 |
|
1:16 |
110.1 |
95.2-120.0 |
- 樣本值
應(yīng)用本試劑盒，檢測(cè)若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
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樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值（pg/mL） |
樣本值（pg/mL） |
|
血清 |
10 |
71.6 |
n.d.-142.1 |
|
血漿 |
8 |
87.1 |
n.d.-179.8 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測(cè)范圍內(nèi)得31.25 pg/mL
- 測(cè)定特異性
本試劑盒識(shí)別天然和重組小鼠白介素18。下述因子進(jìn)行了特異性的評(píng)估，沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
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Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
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GM-CSF |
IL-6 |
IFN-γ |
|
IFN-γ |
IL-10 |
IL-1α |
|
IL-1α |
IL-12 |
IL-1β |
|
IL-1β |
IL-17A |
IL-4 |
|
IL-2 |
IL-18 |
IL-6 |
|
IL-3 |
IL-23 |
IL-10 |
|
IL-4 |
TNF-α |
IL-17A |
|
IL-5 |
|
TNF-α |
檢測(cè)簡(jiǎn)圖
疑問解答
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問題 |
造成原因 |
解決方法 |
|
標(biāo)曲不好 |
移液量不準(zhǔn)確 |
檢查移液器，按時(shí)校準(zhǔn)，仔細(xì)操作，充分混勻時(shí)蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
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稀釋方法不恰當(dāng) |
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顯色值偏低 |
孵育時(shí)間太短 |
給予足夠的孵育時(shí)間，樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。 |
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移液量不足或稀釋不當(dāng) |
校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作 |
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CV偏高 |
酶標(biāo)板清洗不當(dāng) |
使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機(jī)，檢查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
準(zhǔn)備新鮮洗液 |
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靈敏度較低 |
試劑盒儲(chǔ)存不當(dāng) |
按照產(chǎn)品組分表進(jìn)行保存。 |
