產(chǎn)品描述

淋巴細(xì)胞分離液(Lymphocyte Separation Medium, LSM)是一種濾膜除菌的即用型分離液，用于體外分離人外周血淋巴細(xì)胞，也可以從其他組織中分離淋巴細(xì)胞，包括臍帶血和骨髓細(xì)胞等。

每100 mL包含6.2 g聚蔗糖和9.4 g泛影酸鈉。20℃下密度是1.0770-1.0800 g/mL。

 

工作原理

用去纖維蛋白或肝素處理人血，以1:1的比例用生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋，在分離溶液中分層，低速離心30 min。離心過(guò)程中，由于差速遷移最終形成不同的細(xì)胞層。

紅細(xì)胞和多形核粒細(xì)胞，它們通過(guò)梯度遷移至管底。由于其密度不同，淋巴細(xì)胞和其他單個(gè)核細(xì)胞（單核細(xì)胞和血小板）分布在血漿和LSM兩層之間。淋巴細(xì)胞可以通過(guò)吸取分界層溶液回收，最后進(jìn)一步清洗去除血小板，LSM和血漿。

 

運(yùn)輸與保存方法

室溫運(yùn)輸、保存(15-30 °C)，有效期2年。

 

注意事項(xiàng)

【產(chǎn)品近期（24年底到25年初）會(huì)進(jìn)行包裝升級(jí)更換，產(chǎn)品工藝不變，如收到新舊包裝，都屬正?！?/span>

1）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作；

2）稀釋去纖維蛋白血液或肝素化血液用的生理鹽水為無(wú)菌液體；

3）為保持淋巴細(xì)胞的活性，應(yīng)該采血后盡快進(jìn)行分離。分離細(xì)胞層實(shí)際上是單個(gè)核細(xì)胞層，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。

4）本產(chǎn)品僅作科研用途！

 

操作方法

（用于去纖維蛋白或抗凝血?jiǎng)┨幚磉^(guò)的人體血液；對(duì)于其他物種或者其他組織的血液，需要對(duì)此程序做出一定的改進(jìn)）

1. 輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合。 

2. 無(wú)菌條件轉(zhuǎn)移3 mL LSM到15 mL離心管中。 

3. 用2 mL生理鹽水混合2 mL去纖維蛋白血液或肝素化血液。 

4. 小心將稀釋血液加入含有3 mL LSM（室溫）的15 mL離心管中，在血液和LSM中形成一個(gè)明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中。

5. 室溫下400×g離心15-30 min，離心可以沉淀紅細(xì)胞和多形核白細(xì)胞，同時(shí)可以在LSM上形成一層單核淋巴細(xì)胞，如下圖所示（分層情況從上到下依次為血漿層-單個(gè)核細(xì)胞層-LSM層-RBC顆粒）。 

6. 吸出淋巴細(xì)胞層上方2-3 mm的血漿。 

7. 吸取淋巴細(xì)胞層以及它下面一半的LSM層，并轉(zhuǎn)移到另外一個(gè)離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至離心管內(nèi)的淋巴細(xì)胞層中，室溫(18-25°C)離心10min，離心速度設(shè)定在既不損傷細(xì)胞又能沉淀細(xì)胞的范圍，例如160-260×g（清洗去除LSM，并降低血小板的百分比）。 

8. 再用平衡鹽緩沖液清洗細(xì)胞，最后取適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基（實(shí)驗(yàn)者所用）重懸細(xì)胞。

 

 

 

HB211208