-------讓RNase無所遁形，使RNA完好無缺

RNase無處不在

在樣品材料準(zhǔn)備時(shí)，或RNA純化時(shí)，亦或?qū)嶒?yàn)的反應(yīng)體系配制的過程中，均有可能引入RNase的污染。RNase可謂是無孔不入，無處不在。RNase的來源主要包括實(shí)驗(yàn)人員的皮膚或唾沫等、槍頭等在內(nèi)的實(shí)驗(yàn)耗材及配制反應(yīng)體系的各組分等。

關(guān)于RNase

RNase（Ribonuclease，核糖核酸酶）是一類能夠催化RNA降解為小分子RNA的核酸酶，分為核糖核酸內(nèi)切酶和核糖核酸外切酶。前者主要包括RNase A、RNase H等，后者主要包括RNase R等。

RNase——特別是RNase A家族的成員——是一些微小緊湊的蛋白，它們含有一些半胱氨酸殘基能夠形成許多分子內(nèi)二硫鍵。因此在冷卻至室溫后，在無變性劑存在的條件下，變性的RNase會(huì)重新恢復(fù)其天然結(jié)構(gòu)及部分功能。因此，RNase在反復(fù)凍融，甚至高壓滅菌后仍會(huì)保留相當(dāng)?shù)幕钚浴?/span>

RNase可降解RNA，即使痕量的RNase也會(huì)降低RNA的完整度。RNase是一類極度穩(wěn)定、不易失活的RNA“天敵”。

關(guān)于RNase Inhibitor

在細(xì)胞內(nèi)，為避免RNase對(duì)RNA的降解，RNA通常會(huì)被5’端“加帽”、3’端“加A”或者形成RNA-蛋白復(fù)合體。而在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)時(shí)，避免RNase污染的主要手段就是使用RNase Inhibitor。

RNase Inhibitor是人的胎盤中存在的一種特異性RNase抑制劑，能夠特異地與RNase以非共價(jià)鍵結(jié)合形成復(fù)合體從而使RNase失活。

Murine RNase Inhibitor

與人源RNase inhibitor相比，Murine RNase Inhibitor不含人源蛋白中的兩個(gè)對(duì)氧化非常敏感的半胱氨酸，因而具有更高的抗氧化活性，且更加適合于對(duì)高DTT敏感性的實(shí)驗(yàn)(如qPCR)。翌圣生物在成熟的蛋白表達(dá)和純化平臺(tái)基礎(chǔ)上，借助大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)，并通過離子交換和親和層析而純化獲得純度達(dá)95%的重組鼠源RNase抑制劑。

產(chǎn)品特點(diǎn)

廣譜的RNase抑制活性：可抑制包括RNase A、RNase B、RNase C等在內(nèi)的RNase。

兼容廣泛的反應(yīng)條件：在pH 5.0至9.0條件下和25℃至55℃的溫度下都具有活性（60℃時(shí)仍保留部分活性）。

熱穩(wěn)定性的RNase抑制劑：適用于熱穩(wěn)定型逆轉(zhuǎn)錄酶（55℃-60℃）。

兼容廣泛的下游實(shí)驗(yàn)：對(duì)SP6、T7或T3 RNA聚合酶，AMV、M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq DNA聚合酶酶活性無影響。

批間穩(wěn)定性：成熟的蛋白表達(dá)和純化平臺(tái)，可大規(guī)模生產(chǎn)，保證批次間產(chǎn)品的穩(wěn)定性。

質(zhì)量控制

核酸外切酶殘留檢測(cè)：200U本品和0.6μg λ-Hind III在74℃下反應(yīng)1小時(shí)，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。

核酸內(nèi)切酶殘留檢測(cè)：200U本品和0.6μg Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反應(yīng)1小時(shí)，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。

大腸桿菌殘留DNA殘留檢測(cè)：50μL體系中，加入200U本品，以ddH2O為模板，擴(kuò)增E.coli 16s rDNA基因。35個(gè)循環(huán)后進(jìn)行1%瓊脂糖凝膠電泳，EB染色，無擴(kuò)增條帶。

純度測(cè)試：經(jīng)SDS-PAGE檢測(cè)，純度達(dá)95%以上。

產(chǎn)品應(yīng)用

1. RT-PCR 逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。

2. qRT-PCR 實(shí)時(shí)熒光定量PCR保護(hù)RNA。

3. in vitro transcription/translation 體外轉(zhuǎn)錄和翻譯系統(tǒng)中保護(hù)RNA。

4. 用于RNase保護(hù)實(shí)驗(yàn)。

5. 輔助制備無Rnase 的抗體等。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

                                               

圖1. RNase inhibitor抑制RNase A活性，保護(hù)RNA完整性。

1μL RNA inhibitor可有效抑制5ng RNase。1μg HEK細(xì)胞總RNA電泳結(jié)果。

FAQ

1. Murine RNase inhibitor是否會(huì)影響RT-PCR和qRT-PCR實(shí)驗(yàn)？

答：不會(huì)影響。經(jīng)質(zhì)量測(cè)試，每批次Murine RNase inbitior均不含有基因組污染，可適用于RT-PCR和qRT-PCR實(shí)驗(yàn)。

2. 在使用Murine RNase inhibitor配制反應(yīng)體系時(shí)，有什么注意事項(xiàng)？

答：配制體系時(shí)，在其他可能引入RNase污染來源的組分加入前，RNase inhibitor可首先加入。

訂購信息

產(chǎn)品貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	價(jià)格（元）
10603ES05	Murine RNase inhibitor (40U/μL) 鼠源RNase抑制劑	2KU	216.00
10603ES10	Murine RNase inhibitor (40U/μL) 鼠源RNase抑制劑	10KU	916.00
10603ES20	Murine RNase inhibitor (40U/μL) 鼠源RNase抑制劑	20KU	1695.00
10603ES60	Murine RNase inhibitor (40U/μL) 鼠源RNase抑制劑	100KU	11865.00

HB170531