在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，也經(jīng)常會(huì)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行凍存操作。細(xì)胞凍存通常是指將細(xì)胞放在低溫環(huán)境，減少細(xì)胞代謝，以便長(zhǎng)期儲(chǔ)存的一種技術(shù)。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。

如果在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中出現(xiàn)以下幾種情況可以考慮進(jìn)行細(xì)胞凍存：①需要保存一定量的細(xì)胞，防止現(xiàn)培養(yǎng)細(xì)胞污染或其他意外情況而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用；②幾乎所有細(xì)胞在培養(yǎng)傳代的過程中發(fā)生一定程度的變異，為了保持細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果的前后一致，可將傳代較少的細(xì)胞凍存，待到需要使用時(shí)再解凍培養(yǎng)再使用；③需要寄贈(zèng)、購(gòu)買、運(yùn)送和交換細(xì)胞的時(shí)候，將細(xì)胞凍存起來再進(jìn)行這些操作比較方便；④需要進(jìn)行細(xì)胞建庫，長(zhǎng)時(shí)間大量的保存細(xì)胞，這里需要更加注意凍存細(xì)胞的代次。

細(xì)胞冷凍損傷有兩種假說：冰晶損傷和溶液損傷假說。冰晶損傷認(rèn)為，溫度下降，細(xì)胞內(nèi)外的水分結(jié)冰形成冰晶會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞膜和細(xì)胞器損傷導(dǎo)致細(xì)胞死亡，溶液損傷認(rèn)為溫度下降，細(xì)胞外部水分結(jié)冰，從而細(xì)胞質(zhì)會(huì)暴露在高溶質(zhì)的的溶液中而收到損傷，而復(fù)溫時(shí)大量水分會(huì)復(fù)溫時(shí)，大量水分滲入細(xì)胞內(nèi)會(huì)造成細(xì)胞死亡。

針對(duì)這兩種假說，細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的基本原則是慢凍速融?，F(xiàn)在市面上的細(xì)胞凍存液多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，加上緩慢冷凍可以使細(xì)胞內(nèi)的水分身處細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，進(jìn)而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。而復(fù)蘇細(xì)胞采取快速融化的方法也是為了保證細(xì)胞外的結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)就可以融化。避免由于融化過慢導(dǎo)致的溶液損傷。

Yeasen目前有兩種細(xì)胞凍存液，分別是CellStore Freezing 哺乳動(dòng)物細(xì)胞凍存液和Insect Cell Store Freezing 昆蟲細(xì)胞凍存液。這兩種細(xì)胞凍存液都是獨(dú)特的細(xì)胞保護(hù)配方，在凍存過程中細(xì)胞可直接放入-70℃冰箱，無需程序降溫盒或從4℃到-20℃到-70℃冰箱的繁瑣程序降溫。復(fù)蘇方法同常規(guī)細(xì)胞凍存液，并且對(duì)于DMSO不敏感的細(xì)胞，復(fù)蘇時(shí)無需去除細(xì)胞凍存液。

其中，CellStore Freezing 哺乳動(dòng)物細(xì)胞凍存液一種具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)、獨(dú)特配方的哺乳動(dòng)物細(xì)胞凍存液，它還具有以下優(yōu)點(diǎn)：

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