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      首頁 / qPCR系列 / 產(chǎn)品應(yīng)用詳情
       
      分子生物學(xué)用緩沖液
       
       
      


      緩沖溶液（英文：buffer solution）是一種能在加入少量酸或堿和水時(shí)大大減低pH變動(dòng)的溶液。
      
 
      


      在生化研究工作中，常常需要使用緩沖溶液來維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿度。研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到研究工作的成效。如果“提取酶”實(shí)驗(yàn)體系的pH值變動(dòng)或大幅度變動(dòng)，酶活性就會(huì)下降甚至完全喪失。所以配制緩沖溶液是一個(gè)不可或缺的關(guān)鍵步驟。
      
 
      


      緩沖溶液是無機(jī)化學(xué)及分析化學(xué)中的重要概念，緩沖溶液的pH值在一定的范圍內(nèi)不因稀釋或外加少量的酸或堿而發(fā)生顯著的變化，緩沖溶液依據(jù)共軛酸堿對(duì)及其物質(zhì)的量不同而具有不同的pH值和緩沖容量。分析測(cè)試中，在絡(luò)合滴定和分光光度法等許多反應(yīng)里都要求溶液的pH值保持在一個(gè)范圍內(nèi)，以保證指示劑的變色和顯色劑的顯色等，這些條件都是通過加入一定量的緩沖溶液達(dá)到的，所以緩沖溶液是分析測(cè)試中經(jīng)常需要的一種試劑。 采用電位滴定法測(cè)定外加酸或堿對(duì)不同配比同一種緩沖溶液的滴定曲線，不僅有助于理解緩溶液及緩沖容量的概念而且對(duì)分析測(cè)試中正確選緩沖溶液的配制方法及用量具有指導(dǎo)意義。
      
 
      


      采用電位滴定法測(cè)定緩沖溶液的滴定曲線，選擇 了常見的NH。-NH C1緩沖溶液，分別按照不同的配 比得到4種緩沖溶液，實(shí)驗(yàn)測(cè)定了強(qiáng)酸、強(qiáng)堿對(duì)緩沖 溶液的滴定曲線，滴定結(jié)果直觀清晰，對(duì)理解緩沖容 量的概念及實(shí)踐中緩沖溶液的選擇有積極的意義。
      
 
      


      1組成
      
 
      


      緩沖體系由
      


      1、弱酸和它的鹽（如HAc---NaAc）
      


      2、弱堿和它的鹽（NH3·H2O---NH4Cl）
      


      3、多元弱酸的酸式鹽及其對(duì)應(yīng)的次級(jí)鹽（如NaH2PO4---Na2HPO4）
      


      的水溶液組成。
      
 
      


      2配制
      
 
      


      只要知道緩沖對(duì)的PK值，和要配制的緩沖液的pH值（及要求的緩沖液總濃度），就能按公式計(jì)算[鹽]和[酸]的量。這個(gè)算法涉及對(duì)數(shù)換算，較麻煩，前人為減少后人的計(jì)算麻煩，已為我們總結(jié)出pH值與緩沖液對(duì)離子用量的關(guān)系并列出了表格。只要我們知道要配制的緩沖液的pH，經(jīng)查表便可計(jì)算出所用緩沖劑的比例和用量。例如配制500nmpH5.8濃度為0.1M磷酸緩沖液。
      


      經(jīng)查表知pH5.8濃度為0.2M Na2HPO48.0毫升，而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推論出配制100ml0.1M的磷酸緩沖液需要0.1M Na2HPO48.0毫升，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。
      


      計(jì)算好后，按計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確稱好固態(tài)化學(xué)成分，放于燒杯中，加少量蒸餾水溶解，轉(zhuǎn)移入50ml容量瓶，加蒸餾水至刻度，搖勻，就能得到所需的緩沖液。
      


      各種緩沖溶液的配制，均按表格按比例混合，某些試劑，必須標(biāo)定配成準(zhǔn)確濃度才能進(jìn)行，如醋酸、氫氧化鈉等。另外，所有緩沖溶劑的配制計(jì)量都能從以上的算式準(zhǔn)確獲得。
      
 
      


      3PH影響
      
 
      


      設(shè)緩沖系統(tǒng)的弱酸的電離常數(shù)為Ka（平衡常數(shù)），平衡時(shí)弱酸的濃度為[酸]，弱酸鹽的濃度為[鹽]，則由弱酸的電離平衡式可得下式：
      


      [H+] = Ka {[弱酸]/[共軛堿]}
      


      pH = pKa + lg {[共軛堿]/[弱酸]}
      


      這就是Henderson-Hasselbach 等式。
      


      如果[弱酸] = [共軛堿]，則
      


      pH =pKa
      


      根據(jù)此式可得出下列幾點(diǎn)結(jié)論：
      


      1 緩沖液的pH值與該酸的電離平衡常數(shù)Ka及鹽和酸的濃度有關(guān)。弱酸的pKa值衡定，但酸和鹽的比例不同時(shí)，就會(huì)得到不同的pH值。酸和鹽濃度相等時(shí)，溶液的pH值與PKa值相同。
      


      2 酸和鹽濃度等比例增減時(shí)，溶液的pH值不變。
      


      3 酸和鹽濃度相等時(shí)，緩沖液的緩沖效率為最高，比例相差越大，緩沖效率越低，緩沖液的一般有效緩沖范圍為pH=pKa+-1,pOH=pKb+-1。
      
 
      


      4產(chǎn)品訂購：所有產(chǎn)品現(xiàn)貨，純度高于99.5%
      
 
      



       
       
       
       
       
       
       
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