mRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)——解決DNA難轉(zhuǎn)問題
20世紀(jì)60年代諾貝爾獎得主Francois Jacob首次發(fā)現(xiàn)mRNA,并闡明了其作為不穩(wěn)定中間體的作用,將信息從基因傳遞到核糖體以進(jìn)行蛋白質(zhì)合成。六十年來,mRNA技術(shù)的發(fā)展十分迅速,近年mRNA疫苗的橫空出世更具有劃時(shí)代的意義。“醫(yī)學(xué)的未來是mRNA,基本上你可以使用mRNA治愈一切”。隨著研發(fā)與技術(shù)的發(fā)展,mRNA技術(shù)會發(fā)揮越來越巨大的作用。
mRNA的轉(zhuǎn)染歷史,可以追溯到20世紀(jì)的80年代,運(yùn)用不同的化學(xué)試劑進(jìn)行mRNA的細(xì)胞轉(zhuǎn)染。外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)染,mRNA比DNA具有更快速、安全的優(yōu)勢,體現(xiàn)在:
1.可以跳過復(fù)制、轉(zhuǎn)錄過程,直接進(jìn)行翻譯,蛋白表達(dá)更快;
2.在細(xì)胞質(zhì)中完成蛋白的翻譯后會自發(fā)降解,基因組整合風(fēng)險(xiǎn)低;
近期我們推出的Hieff Trans® mRNA轉(zhuǎn)染試劑,為DNA轉(zhuǎn)染有難度的情況,提供了新的解決方案,擁有如下的特點(diǎn):
在DNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞過程中,會遇到面對部分難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞比較棘手,轉(zhuǎn)染效率不高,甚至達(dá)到10-20%的轉(zhuǎn)染效率已經(jīng)算可以接受的程度,如一些原代細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、懸浮免疫細(xì)胞等。采用mRNA轉(zhuǎn)染的方式,對提高難轉(zhuǎn)染細(xì)胞的外源基因轉(zhuǎn)染有很大幫助。
Hieff Trans® mRNA轉(zhuǎn)染試劑對細(xì)胞也具有低毒性的特點(diǎn),對普通細(xì)胞與難培養(yǎng)的細(xì)胞均具有較好的效果:
RAW264.7細(xì)胞轉(zhuǎn)染24h圖
細(xì)胞鋪板后,在轉(zhuǎn)染操作時(shí)候,建議細(xì)胞融合度達(dá)70%-80%時(shí)候進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作,由于mRNA轉(zhuǎn)染后,基因表達(dá)比DNA轉(zhuǎn)染更快速,觀察的時(shí)間可以根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行縮短。