相較于傳統(tǒng)化學(xué)藥物，以基因治療、細(xì)胞治療或組織工程為基礎(chǔ)的新型生物治療業(yè)已成為前沿性治療藥物。這些藥物大多以細(xì)胞為載體制備或構(gòu)建，因此，在此過(guò)程中，對(duì)于細(xì)胞種子庫(kù)、病毒培養(yǎng)和收獲、臨床治療用途的細(xì)胞等生物制品中生產(chǎn)制備過(guò)程易受到支原體污染。

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道：支原體污染在儲(chǔ)存細(xì)胞系中發(fā)生率約為 15-35%，在生物制藥行業(yè)中約為0.44-6.70%。在這些污染事件中，95%的支原體種類是以下幾種：口腔支原體、精氨酸支原體、豬鼻支原體、發(fā)酵支原體、人型支原體或萊氏無(wú)膽原體等^[1]。

圖：生物制品生產(chǎn)過(guò)程中支原體檢測(cè)取樣點(diǎn)

支原體污染對(duì)于生物制備企業(yè)來(lái)講就如同夢(mèng)魘一般，不僅導(dǎo)致產(chǎn)品品質(zhì)下降；還會(huì)降低表達(dá)水平，最終導(dǎo)致產(chǎn)量降低，同時(shí)也會(huì)對(duì)患者產(chǎn)生不良的副作用，快速、精確的檢測(cè)支原體的存在已然迫在眉睫。目前國(guó)內(nèi)外藥典推薦的支原體檢測(cè)方法主要是基于培養(yǎng)法、NAT(核酸擴(kuò)增法)法、細(xì)胞培養(yǎng)指示法^[2]。

表：藥典檢測(cè)法優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比^[2,3]

方法類型	優(yōu)點(diǎn)	缺點(diǎn)
培養(yǎng)法	高靈敏度，可檢測(cè)到0.1CFU/mL	時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，整個(gè)過(guò)程需28天 不同支原體需不同培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，某些支原體難以培養(yǎng)
NAT法（核酸擴(kuò)增）	快速 達(dá)到10CFU/mL以下的檢測(cè)限	需要特定提取試劑盒和檢測(cè)設(shè)備 DNA的提取質(zhì)量和效率影響結(jié)果的可信任度 需要其他方法如培養(yǎng)法進(jìn)行可比驗(yàn)證
指示細(xì)胞培養(yǎng)法	成本低 操作較為簡(jiǎn)單	培養(yǎng)時(shí)間達(dá)一周左右 靈敏度低于培養(yǎng)法 存在假陽(yáng)性和假陰性現(xiàn)象

翌圣生物經(jīng)過(guò)匠心研發(fā)，基于EP藥典推薦NAT法推出超簡(jiǎn)便快捷的qPCR支原體檢測(cè)試劑盒，克服了普通PCR靈敏度低和培養(yǎng)法耗時(shí)久的問(wèn)題，將結(jié)果精準(zhǔn)度和使用便捷度有了質(zhì)的提升！

翌圣生物支原體qPCR檢測(cè)試劑盒可用于確定如細(xì)胞種子庫(kù)、病毒培養(yǎng)和收獲、臨床治療用途的細(xì)胞和生物制品中支原體污染過(guò)程和放行精確檢測(cè)使用，3h內(nèi)可快速、簡(jiǎn)便檢測(cè)支原體存無(wú)，優(yōu)于培養(yǎng)法的28天耗時(shí)檢測(cè)過(guò)程。

產(chǎn)品特點(diǎn)

 

 

 1   高靈敏度：支原體標(biāo)準(zhǔn)品驗(yàn)證靈敏度達(dá)10CFU/mL

 2   操作簡(jiǎn)便：樣本制備和檢測(cè)總時(shí)長(zhǎng)<3h

 3   特異性好：多個(gè)親緣關(guān)系相近物種驗(yàn)證無(wú)交叉反應(yīng)

 4   符合法規(guī)：檢測(cè)方法和過(guò)程按照藥典要求驗(yàn)證，符合法規(guī)要求

 5   適用性廣：檢測(cè)105種支原體，適用多種樣品（細(xì)胞、病毒、培養(yǎng)基、細(xì)胞制品等）

 6   準(zhǔn)確性高：探針?lè)z測(cè)，避免染料法造成的假陽(yáng)性問(wèn)題，批次間穩(wěn)定

 7   安全性高：試劑盒內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品無(wú)感染性，安全性好

產(chǎn)品數(shù)據(jù)

 

 

靈敏度和擴(kuò)增效率測(cè)試

 

10 CFU/mL 口腔支原體標(biāo)準(zhǔn)品檢出結(jié)果

 

 

10 CFU/mL 肺炎支原體標(biāo)準(zhǔn)品檢出結(jié)果

 

10 CFU/mL 豬鼻支原體標(biāo)準(zhǔn)品檢出結(jié)果

 

 

10 CFU/mL 精氨酸支原體標(biāo)準(zhǔn)品檢出結(jié)果

 

 

試劑盒擴(kuò)增效率：lg-8lg copies/ul

 

 

擴(kuò)增效率≥96%，標(biāo)準(zhǔn)曲線R²≥0.996

 

產(chǎn)品對(duì)比

 

 

 

 

(S*品牌)

(YEASEN品牌)

10 CFU/mL 口腔支原體標(biāo)準(zhǔn)品檢出結(jié)果

 

 

FAQ

 

 

Q:如何檢測(cè)培養(yǎng)的細(xì)胞是否受到支原體污染？

A:培養(yǎng)細(xì)胞3天及以上取樣品，提取DNA后，取20 μL 待測(cè)樣本按說(shuō)明書給定的操作程序進(jìn)行，待qpcr反應(yīng)結(jié)束后通過(guò)FAM和VIC通道信號(hào)的Ct值來(lái)判斷樣品是否受到支原體污染，如果FAM通道信號(hào)Ct<40 ,且有明顯的擴(kuò)增曲線，VIC通道信號(hào)Ct<40 ,且有明顯的擴(kuò)增曲線，說(shuō)明樣品有支原體污染。

 

訂購(gòu)信息

 

 

 

產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品編號(hào)	規(guī)格
MycAway™ Mycoplasma Real-time qPCR Detection Kit 支原體qPCR檢測(cè)試劑盒（探針?lè)ǎ?/span>	40618ES25	25 T
	40618ES60	100 T

 

相關(guān)產(chǎn)品

 

 

 

類別	產(chǎn)品	貨號(hào)	規(guī)格
支原體檢測(cè)	GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit GMyc-PCR支原體檢測(cè)試劑盒	40601ES10/20	10/20 assays
	MycAwayTM Plus-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit 一步法快速支原體檢測(cè)試劑盒	40612ES25/60	25/100 T
支原體去除	MycAway™ Treatment (1000×)-Mycoplasma Elimination Reagent  MycAwayTM 支原體去除試劑（1000×）	40607ES03/08	1/5×1 mL
支原體預(yù)防	MycAway™ Prophylactic (2000×)-Mycoplasma Prevention MycAwayTM 支原體預(yù)防試劑（2000×）	40608ES03/08	1/5×1 mL

【文獻(xiàn)引用】

[1] Fratz-Berilla EJ, Angart P, Graham RJ, et al. Impacts on product quality attributes of monoclonal antibodies produced in CHO cell bioreactor cultures during intentional mycoplasma contamination events. Biotechnol Bioeng. 2020;117(9):2802-2815.

[2] Volokhov DV, Graham LJ, Brorson KA, Chizhikov VE. Mycoplasma testing of cell substrates and biologics: Review of alternative non-microbiological techniques. Mol Cell Probes. 2011 Apr-Jun;25(2-3):69-77.

[3] Ingebritson AL, Gibbs CP, Tong C, Srinivas GB. A PCR detection method for testing Mycoplasma contamination of veterinary vaccines and biological products. Lett Appl Microbiol. 2015 Feb;60(2):174-180.