產(chǎn)品說明書
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COA
已發(fā)表文獻
產(chǎn)品簡介
低密度脂蛋白膽固醇（Low Density Lipoprotein Cholesterol，LDL-C）是在血漿中由極低密度脂蛋白轉(zhuǎn)變而來，主要在血管內(nèi)合成，是運輸膽固醇到肝外組織的主要運載工具。低密度脂蛋白膽固醇可促使動脈壁形成動脈粥樣斑塊，是動脈粥樣硬化的危險因素。
膽固醇檢測4款相關(guān)產(chǎn)品如下：
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產(chǎn)品貨號 |
60736ES |
60737ES |
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產(chǎn)品名稱 |
膽固醇(TC)含量檢測試劑盒 |
游離膽固醇(FC)含量檢測試劑盒 |
低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量檢測試劑盒 |
高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量檢測試劑盒 |
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功能 |
檢測總膽固醇含量 |
檢測游離膽固醇含量 |
檢測低密度脂蛋白膽固醇含量 |
檢測高密度脂蛋白膽固醇含量 |
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適用場景 |
血清、血漿、細胞、組織等樣本中的總膽固醇含量測定，與心腦血管疾病以及多種病理狀態(tài)密切相關(guān)。 |
用于檢測血清、血漿、動物組織樣本中的游離膽固醇含量。 |
用于動脈粥樣硬化的輔助診斷和治療，評估心血管健康狀況和預(yù)防心血管疾病。 |
用于體外定量測定血清或血漿中的高密度脂蛋白膽固醇，有助于評估心血管健康狀況。 |
產(chǎn)品信息
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貨號 |
60736ES59 |
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規(guī)格 |
96 T |
組分信息
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組分編號 |
組分名稱 |
組分信息 |
規(guī)格 |
儲存條件 |
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60736-A |
試劑一 |
Tris |
50 mmol/L |
18 mL |
2~8℃避光保存 |
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多聚陰離子 |
0.5% |
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Emulgen B-66 |
0.5% |
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4-氨基安替比林 |
1 mmol/L |
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疊氮鈉 |
1% |
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60736-B |
試劑二 |
膽固醇酯酶 |
5 KU/L |
6 mL |
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膽固醇氧化酶 |
5 KU/L |
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過氧化物酶 |
2 KU/L |
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EAPAS |
0.5 mmol/L |
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疊氮鈉 |
1% |
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曲拉通-100 |
1% |
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60736-C |
標(biāo)準(zhǔn)品 |
膽固醇 |
見標(biāo)簽 |
1 支 |
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標(biāo)準(zhǔn)品配制：按照標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽的指示配制 |
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96孔酶標(biāo)板一塊 |
室溫 |
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儲存條件
2~8℃避光保存，有效期12個月。
使用說明
- 樣品處理
1）血清/血漿樣本：直接測定，如超過線性范圍用生理鹽水稀釋后測定。
2）組織樣本：準(zhǔn)確稱取組織重量，按重量（g）：體積（mL）=1：9的比例，加入9倍體積的勻漿介質(zhì)，冰水浴條件下機械勻漿，2500轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，取上清液待測。【注：如組織樣本為非高脂樣本，勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用PBS緩沖液（0.1 mol/L，pH 7.4，60158ES）或生理鹽水進行提取；如組織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本，勻漿介質(zhì)可統(tǒng)一用無水乙醇進行提取?！?/font>
3）培養(yǎng)液樣本：吸取培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清液測定。
4）細胞樣本：
a細胞收集：將制備好的細胞懸液取出，1000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，棄上清液，留細胞沉淀；推薦用PBS緩沖液（0.1 mol/L，pH 7.4，60158ES）清洗1-2次；1000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，棄上清液，留細胞沉淀。
b細胞破碎：加入0.2-0.3 mL的勻漿介質(zhì)（60158ES PBS緩沖液或生理鹽水）進行勻漿，冰水浴條件下超聲破碎或手動勻漿，制備好的勻漿液不離心直接測定。也可采用裂解液裂解，裂解好的液體不離心直接測定。【注：一般建議細胞密度在100萬個/mL以上，破碎好的液體可顯微鏡觀察細胞是否破碎完全?！?/font>
- 操作步驟
【注：正式測定前建議取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。】
1）酶標(biāo)儀預(yù)熱30分鐘以上，調(diào)節(jié)波長至600 nm，蒸餾水調(diào)零。
2）按操作表依次加入各試劑。
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96孔板操作，酶標(biāo)儀比色 |
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空白孔 |
校準(zhǔn)孔 |
樣本孔 |
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蒸餾水（μL） |
2.5 |
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校準(zhǔn)品（μL） |
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2.5 |
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樣本（μL） |
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2.5 |
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試劑一（μL） |
180 |
180 |
180 |
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輕輕振蕩孔板混勻，37℃孵育5分鐘，波長600 nm，酶標(biāo)儀測定各孔吸光度值A1 |
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試劑二（μL） |
60 |
60 |
60 |
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輕輕振蕩混勻，37℃孵育5分鐘，波長600 nm，酶標(biāo)儀測定各孔吸光度值A2，計算△A=A2-A1 |
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- 計算公式
1）血清等液體樣本計算公式：
LDL-C含量（mmol/L）=（△A樣本-△A空白）÷（△A標(biāo)準(zhǔn)-△A空白）xC標(biāo)準(zhǔn)品
2）組織、細胞樣本計算公式：
（1）勻漿介質(zhì)用PBS緩沖液/生理鹽水（此方法需單獨測定勻漿液蛋白濃度）
LDL-C 含量（mmol/gprot）=（△A樣本-△A 空白）÷（△A 標(biāo)準(zhǔn)-△A 空白）xC標(biāo)準(zhǔn)品÷ Cpr
C標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)液濃度，mmol/L；Cpr：勻漿液蛋白濃度，gprot/L
（2）勻漿介質(zhì)用無水乙醇（此方法不需要測定勻漿液蛋白濃度）
LDL-C含量（mmol/g組織）=（△A樣本-△A空白）÷（△A標(biāo)準(zhǔn)-△A空白）xC標(biāo)準(zhǔn)品 ÷（W÷V樣總）
C標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)液濃度，mmol/L；W：樣本質(zhì)量，g；V樣總：勻漿液總體積，L【注：細胞樣本測定時可將（W÷V樣總）替換為細胞前處理時的細胞密度?！?/font>
注意事項
- 樣品含量如超出檢測范圍上限時，可用生理鹽水稀釋樣本后進行測定，測定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；如樣品含量較低也可以適當(dāng)加大進樣量（如5 μL或10 μL），同時要將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋相應(yīng)的倍數(shù)后和樣本保持相同的加樣量。
- 該試劑需注意防止含有葡萄糖、膽固醇等試劑的污染。
- 開啟后2~8℃可穩(wěn)定保存1個月。
- 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
- 本產(chǎn)品僅作科研用途！
Ver.CN20240430
