產(chǎn)品簡介

 

MolPure® Mag Plant DNA Kit磁珠法通用植物DNA提取試劑盒適用于大部分植物組織DNA提取，主要包括葉片、果實(shí)、種子、根莖、真菌等。采用獨(dú)特的磁珠和精心優(yōu)化的緩沖體系，可最大限度的分離純化樣本中的基因組DNA。提取過程不需要用到有毒的酚氯仿等有機(jī)物抽提。提取的核酸純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠，適用于各種下游應(yīng)用實(shí)驗(yàn)，如酶切、PCR、建庫等。配合磁珠法自動化提取儀器使用，可實(shí)現(xiàn)核酸的高通量提取。

 

組分信息

 

組分編號	組分名稱	18529ES20	18529ES50	18529ES70
18529-A	裂解液	14 mL/瓶×1	35 mL/瓶×1	140 mL/瓶×1
18529-B	絮凝劑	3 mL/瓶×1	7 mL/瓶×1	30 mL/瓶×1
18529-C	洗滌液A	13 mL/瓶×1	32 mL/瓶×1	130 mL/瓶×1
18529-D	洗滌液B	6 mL/瓶×1	15 mL/瓶×1	60 mL/瓶×1
18529-E	洗脫液	3 mL/瓶×1	7 mL/瓶×1	30 mL/瓶×1
18529-F	磁珠懸浮液	0.5 mL/管×1	1.2 mL/管×1	5 mL/瓶×1

注：20T：使用前洗滌液B(18529-D)每瓶需加入24 mL無水乙醇

50T：使用前洗滌液B(18529-D)每瓶需加入60 mL無水乙醇

200T：使用前洗滌液B(18529-D)每瓶需加入240 mL無水乙醇

 

儲存條件

 

F組分（磁珠懸浮液）2~8℃保存，其余組分室溫保存，有效期18個月。

備注：室溫運(yùn)輸。

 

注意事項(xiàng)

 

1. 首次使用前請按瓶身標(biāo)簽注明的體積向洗滌液 B瓶中加入無水乙醇，并做好標(biāo)記。
2. 需自備異丙醇和RNase A（貨號：10406ES03）。
3. 使用前注意觀察裂解液、絮凝劑和洗滌液A中是否有析出，如有上述情況可50℃加熱至溶液澄清，避免影響使用效果。
4. 洗脫時可能存在磁珠殘留，推薦適當(dāng)調(diào)整樣本投入量，且吸取洗脫液時應(yīng)盡量避免吸入磁珠。
5. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
6. 本產(chǎn)品僅作科研用途！

 

使用說明

 

第一部分：樣本處理

1.1 加入 600 µL 裂解液和 5 µL RNase A 至 1.5 mL 離心管中，混勻后室溫備用。

1.2 用液氮將樣品研磨成粉末狀，轉(zhuǎn)移 50~100 mg 粉末至 1.5 mL 離心管中。

1.3 渦旋震蕩1 min，靜置5 min。

1.4加入100 µL絮凝劑，震蕩15 s，冰浴5 min。常溫，13000 rpm(~16000 g)離心5 min。

 

第二部分：單管操作

2.1轉(zhuǎn)移500 µL上清液（1.4步驟）至新的1.5 mL離心管。

2.2加入450 µL異丙醇和20 µL磁珠（加入前充分混勻），25℃ 1600 rpm渦旋5 min。置于磁力架上吸附1 min，待磁珠完全吸附，吸棄溶液。

2.3加入600 µL洗滌液A，25℃ 1600 rpm渦旋1 min。置于磁力架上吸附1 min，待磁珠完全吸附，吸棄溶液。

2.4加入600 µL洗滌液B，25℃ 1600 rpm渦旋1 min。置于磁力架上吸附1 min，待磁珠完全吸附，吸棄溶液。

2.5重復(fù)步驟2.4

2.6短暫離心收集管壁上液滴，轉(zhuǎn)移至磁力架上，吸盡殘液?？諝飧稍?-10 min。

2.7加入100 µL洗脫液，渦旋打散磁珠。65℃ 1600 rpm 震蕩孵育10 min。

2.8置于磁力架上吸附1 min，待磁珠完全吸附，小心將液體轉(zhuǎn)移至新的離心管，即得到核酸溶液。

2.9核酸溶液可置于-20℃短期保存，-80℃長期保存。

 

第三部分：翌圣AP-96N核酸提取儀操作

3.1 準(zhǔn)備5塊 96 孔板，將瓶裝試劑分裝至 96 孔板對應(yīng)的孔中，按如下表格分裝：

板位	板名稱	試劑名稱	投入量	備注
1	結(jié)合板	異丙醇	0.9倍上清體積	例：上清500µL，加入450µL異丙醇
2	漂洗板1	洗滌液A	600 µL
3	/	/	/
4	漂洗板2	洗滌液B+磁珠	600 µL+20 µL磁珠	磁珠加入前充分混勻
5	漂洗板3	洗滌液B	600 µL
6	洗脫板	洗脫液	100 µL

注意：每個板子加入的孔位需要一致。

3.2 轉(zhuǎn)移500 µL上清液（1.4步驟）至結(jié)合板對應(yīng)孔位中。

3.3 把磁棒套插到儀器中。把5塊板子放到儀器相應(yīng)位置。啟動程序。

3.4 程序結(jié)束后，將洗脫板中的洗脫液轉(zhuǎn)移至新的離心管中，溶液可置于-20℃短期保存，-80℃長期保存。

 

AP-96N核酸提取儀的提取程序

步驟	第 1 步	第 2 步	第 3 步	第 4 步	第 5 步	第 6 步	第 7 步	第 8 步
工 位	4	1	2	4	5	6	6	4
等待時間	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:02:00	00:00:00	00:00:00
混合模式	M 2	M 1	M 2	M 2	M 2	M 3	M 3	M 1
混合時間	00:00:15	00:05:00	00:02:00	00:01:30	00:01:30	00:05:00	00:00:00	00:00:20
是否暫停	否	否	否	否	否	否	否	否
吸磁時間	00:00:30	00:01:30	00:00:30	00:00:30	00:00:30	00:01:30	00:01:30	00:00:00
體 積	600	1000	600	600	600	100	100	600
溫 度	--	--	--	--	--	65℃	65℃	--

混合模式M1:混合時間10 s，混合速度200000

混合模式M2:混合時間10 s，混合速度300000

混合模式M3:混合時間10 s，混合速度400000

 

第四部分：翌圣AP-48核酸提取儀操作

4.1 將瓶裝試劑分裝至 96 孔板對應(yīng)的孔中，按如下表格分裝：

列	名稱	試劑名稱	投入量	備注
1/7	結(jié)合	異丙醇	0.9倍上清體積	例：上清500µL，加入450µL異丙醇
2/8	漂洗1	洗滌液A	600 µL
3/9	漂洗2	洗滌液B+磁珠	600 µL+20 µL磁珠	磁珠加入前充分混勻
4/10	漂洗3	洗滌液B	600 µL
5/11	洗脫	洗脫液	100 µL

4.2 轉(zhuǎn)移500 µL上清液（1.4步驟）至1/7列對應(yīng)孔位中。

4.3把磁棒套插到儀器中，把板子放到儀器相應(yīng)位置。啟動程序。

4.4 程序結(jié)束后，將洗脫孔（5/11列）中的洗脫液轉(zhuǎn)移至新的離心管中，溶液可置于-20℃短期保存，-80℃長期保存。

AP-48核酸提取儀的提取程序

步驟	第 1 步	第 2 步	第 3 步	第 4 步	第 5 步	第 6 步	第 7 步	第 8 步
工 位	3	1	2	3	4	5	5	3
等待時間	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:02:00	00:00:00	00:00:00
混合模式	M 2	M 1	M 2	M 2	M 2	M 3	M 3	M 1
混合時間	00:00:15	00:05:00	00:02:00	00:01:30	00:01:30	00:05:00	00:00:00	00:00:20
是否暫停	否	否	否	否	否	否	否	否
吸磁時間	00:00:30	00:01:30	00:00:30	00:00:30	00:00:30	00:01:30	00:01:30	00:00:00
體 積	600	1000	600	600	600	100	100	600
溫 度	--	--	--	--	--	65℃	65℃	--

混合模式M1:混合時間10 s，混合速度200000

混合模式M2:混合時間10 s，混合速度300000

混合模式M3:混合時間10 s，混合速度400000

 

第五部分：翌圣AP-16S核酸提取儀操作

5.1 將瓶裝試劑分裝至 96 孔板對應(yīng)的孔中，按如下表格分裝：

列	名稱	試劑名稱	投入量	備注
1/7	結(jié)合	異丙醇	0.9倍上清體積	例：上清500µL，加入450µL異丙醇
2/8	漂洗1	洗滌液A	600 µL
3/9	漂洗2	洗滌液B+磁珠	600 µL+20 µL磁珠	磁珠加入前充分混勻
4/10	漂洗3	洗滌液B	600 µL
5/11	洗脫	洗脫液	100 µL

5.2 轉(zhuǎn)移500 µL上清液（1.4步驟）至1/7列對應(yīng)孔位中。

5.3把磁棒套插到儀器中，把板子放到儀器相應(yīng)位置。啟動程序。

5.4 程序結(jié)束后，將洗脫孔（5/11列）中的洗脫液轉(zhuǎn)移至新的離心管中，溶液可置于-20℃短期保存，-80℃長期保存。

翌圣16通道自動化核酸提取儀AP-16S提取程序

步驟	第 1 步	第 2 步	第 3 步	第 4 步	第 5 步	第 6 步	第 7 步	第 8 步
工 位	3	1	2	3	4	5	5	3
等待時間	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:02:00	00:00:00	00:00:00
混合模式	M 3	M 2	M 3	M 3	M 3	M 4	M 4	M 2
混合時間	00:00:15	00:05:00	00:02:00	00:01:30	00:01:30	00:05:00	00:00:00	00:00:20
是否暫停	否	否	否	否	否	否	否	否
吸磁時間	00:00:30	00:01:30	00:00:30	00:00:30	00:00:30	00:01:30	00:01:30	00:00:00
體 積	600	1000	600	600	600	100	100	600
溫 度	--	--	--	--	--	65℃	65℃	--

 

Ver.CN20240729