產(chǎn)品簡介

 

Thermolabile dsDNase（熱敏雙鏈DNA特異性核酸酶）是一種能選擇性降解雙鏈DNA，但對單鏈核酸分子幾乎沒有作用的核酸內(nèi)切酶，該酶能夠裂解雙鏈DNA中的磷酸二酯鍵，生成帶有5'-磷酸和3'-羥基末端的寡核苷酸。此外，Thermolabile dsDNase具有熱敏感性，可在65℃條件下快速失活。該產(chǎn)品主要用于反轉(zhuǎn)錄實驗前快速去除RNA樣本中的基因組DNA污染，與傳統(tǒng)的使用DNase I去除基因組DNA污染的方法相比，無需額外加入EDTA失活，同時節(jié)省實驗時間，保證RNA定量的準(zhǔn)確性。

 

產(chǎn)品應(yīng)用

 

RNA提取中DNA的去除；反轉(zhuǎn)錄實驗前gDNA的去除；mNGS檢測中去除宿主DNA；去除分子診斷原料中的背景gDNA污染

 

產(chǎn)品優(yōu)勢

 

●高效：只需37℃ 5 min即可消化1 μg基因組DNA；

●蛋白純度高：蛋白純度≥99%；

●無RNase酶殘留：對樣品中RNA無影響；

●熱敏感：65℃加熱10 min即可快速失活，無需純化，gDNA去除與逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)可在同管內(nèi)完成。

 

產(chǎn)品性能

 

●純度高：蛋白純度≥99%

圖1：SDS-PAGE法檢測14544ES蛋白純度結(jié)果

 

●無RNase酶殘留：對樣品中RNA無影響

圖2：20 μL反應(yīng)體系中加入20 U來自進(jìn)口廠家A、進(jìn)口廠家B和翌圣3批次Thermolabile dsDNase，同時分別加入0.5 μg 293T RNA，37℃孵育4小時。瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果顯示，翌圣3批次Thermolabile dsDNase組RNA譜帶與陰性對照一致，進(jìn)口廠家A和進(jìn)口廠家B組RNA條帶有輕微降解，說明翌圣3批次Thermolabile dsDNase中無RNase殘留，對樣本中RNA無影響。

 

●熱敏感：65℃加熱10 min即可快速失活

圖3：Thermolabile dsDNase熱敏感性驗證結(jié)果圖。陰性對照組：未加dsDNase酶；陽性對照組：反應(yīng)體系中加入0.2 U來自進(jìn)口廠家A、進(jìn)口廠家B和翌圣3批次Thermolabile dsDNase；熱處理組：反應(yīng)體系中加入20 U來自進(jìn)口廠家A、進(jìn)口廠家B和翌圣3批次經(jīng)過65℃加熱10 min處理的Thermolabile dsDNase酶。然后，分別在體系中加入1 μg小牛胸腺DNA，37℃孵育5 min。瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果顯示，0.2 U Thermolabile dsDNase可消化1 μg小牛胸腺DNA，Thermolabile dsDNase經(jīng)過65℃孵育10 min可完全失活。

 

組分信息

 

組分編號	產(chǎn)品名稱	14544ES80	14544ES94
14544-A	Thermolabile dsDNase (20 U/μL)	50 μL	1 mL
14544-B	10×dsDNase Bu?er	200 μL	2×1 mL

 

儲存條件

 

-25~-15℃保存，有效期1年。

 

注意事項

 

1. 抑制條件：金屬離子、EDTA、SDS、DTT、β-巰基乙醇、高鹽離子濃度等會抑制dsDNase的活性。

2. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

3.為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20241205