EdU可用于動(dòng)物活體注射，對(duì)生物體無(wú)明顯副作用且穩(wěn)定性較好，可將目標(biāo)組織制備為石蠟或冰凍組織切片后檢測(cè)；EDU也適用于體外培養(yǎng)的細(xì)胞增殖檢測(cè)，適用于小鼠，大鼠及其他動(dòng)物模型的各種組織器官(血管除外)的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)。

與BrdU檢測(cè)方法相比，其化學(xué)反應(yīng)檢測(cè)方法反應(yīng)快，效率高，反應(yīng)時(shí)間僅需幾分鐘，無(wú)需DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過(guò)夜孵育，能夠更好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)，更簡(jiǎn)單、靈敏、快速、準(zhǔn)確。EdU檢測(cè)方法用量更少，只需十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測(cè)試劑盒相同甚至更好的檢測(cè)結(jié)果。

 

產(chǎn)品性質(zhì)

中文別名（Chinese Synonym）	5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷
英文別名（English Synonym）	EdU;5-E-dU;Uridine,2;Aids072372;Aids-072372;5-Ethynyl-durd;5-Ethynyl-2'-dU;2'deoxyuridine, 5-ethynyl
CAS號(hào)（CAS NO.）	61135-33-9
分子式（Formula）	C11H12N2O5
分子量（Molecular Weight）	252.23
外觀（Appearance）	粉末
熔點(diǎn)（Melting Point）	199 ℃
溶解性（Solubility）	溶于水
結(jié)構(gòu)式（Structure）

 

運(yùn)輸和保存方法

冰袋運(yùn)輸。粉末在-20 ℃避光保存，1年有效。配置成溶液，-80 ℃避光保存，6個(gè)月有效；-20 ℃避光保存，1個(gè)月有效。

 

注意事項(xiàng)

1）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

2）該品對(duì)皮膚有不可逆損傷的可能性。使用時(shí)應(yīng)穿防護(hù)服和戴手套。應(yīng)避免吸入本品的粉塵。

3）本產(chǎn)品僅作科研用途！

 

操作步驟

1、EDU儲(chǔ)存液配置（濃度:10 mM）

取5 mg的EdU粉末，加入到1.98 mL的蒸餾水中，渦旋震蕩，充分混勻，此時(shí)濃度為10 mM（或者2.5 mg/mL）。然后分裝保存在-20 ℃冰箱中，可穩(wěn)定保存1個(gè)月。
 

2、EdU標(biāo)記細(xì)胞

注意：EdU的標(biāo)記濃度應(yīng)根據(jù)所用的細(xì)胞類型做相應(yīng)的優(yōu)化選擇，推薦客戶以10 μM的EdU初始濃度進(jìn)行摸索。細(xì)胞培養(yǎng)基、細(xì)胞生長(zhǎng)密度及細(xì)胞類型和其他實(shí)驗(yàn)條件都有可能影響細(xì)胞的標(biāo)記效果。預(yù)實(shí)驗(yàn)中我們建議客戶設(shè)置一系列的EdU濃度梯度，以確定最佳的合適您的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)濃度。

2.1 以每孔4×10³~1×10⁵細(xì)胞接種于96孔板中，進(jìn)行您所需要的藥物處理或者其他刺激處理。

2.2 準(zhǔn)備一份2×的EdU工作液：以完全培養(yǎng)基稀釋10 mM的儲(chǔ)液至合適的工作濃度。建議您以10 μM的初始工作濃度開(kāi)始預(yù)實(shí)驗(yàn)。

2.3 預(yù)熱2×的EdU工作液，加入等體積的培養(yǎng)基，使?jié)舛茸優(yōu)?/span>1×(如：需要得到10 μM的終濃度，應(yīng)以新鮮培養(yǎng)基等體積加入到20 μM的EdU工作液中)。

2.4 合適時(shí)間合適條件孵育細(xì)胞，EdU孵育細(xì)胞的時(shí)間可以直接用作測(cè)定細(xì)胞DNA合成的指標(biāo)，時(shí)間點(diǎn)選擇以及孵育時(shí)間的長(zhǎng)度取決于細(xì)胞生長(zhǎng)速率。通過(guò)短暫的EdU孵育進(jìn)行的脈沖式標(biāo)記細(xì)胞可以用于研究細(xì)胞周期動(dòng)力學(xué)。
 

3、EdU檢測(cè)

EdU檢測(cè)需用到Yefluor 647 EdU Flow Cytometry Assay kit（貨號(hào)：40277ES）、Yefluor 488 EdU Flow Cytometry Assay kit （貨號(hào)：40278ES）等染色試劑盒，進(jìn)行EDU檢測(cè)。操作步驟請(qǐng)參考相關(guān)說(shuō)明書。

活體標(biāo)記

若要將EdU注射到小鼠等動(dòng)物體內(nèi)，進(jìn)行熒光標(biāo)記。建議EdU初始給藥量為5mg/kg，稀釋濃度為0.5~1 mg/mL。

表1:  EdU注射液配置參考

EdU	0.1 mg	1 mg	2 mg	10 mg	50 mg	500 mg
PBS	100 μL	1 mL	2 mL	10 mL	50 mL	500 mL

注：1)可采用PBS或生理鹽水稀釋；
      2)注射時(shí)可將EdU注射液進(jìn)一步稀釋，不會(huì)影響EdU的穩(wěn)定性。

 

相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品編號(hào)	規(guī)格
YF®488 Click-iT EdU Flow Cytometry Assay Kits（綠色熒光）	40278ES25	20 T
	40278ES50	50 T
YF®594 Click-iT EdU Flow Cytometry Assay Kits（紅色熒光）	40279ES25	20 T
	40279ES50	50 T
YF®647A Click-iT EdU Flow Cytometry Assay Kits（遠(yuǎn)紅外色熒光）	40280ES25	20 T
	40280ES50	50 T
5‐ethynyl‐2′‐deoxyuridine (EdU) 5‐乙炔基‐2′脫氧尿嘧啶核苷	40284ES50	50 mg
	40284ES60	100 mg
	40284ES76	500 mg

 

 

HB210207