Geldex 75 PG Chromatography Column是將介質Geldex 75 PG裝填于層析柱YXK16/70中的即用型凝膠過濾層析柱，省去了自行裝填層析柱的麻煩和柱效不高的風險，介質和層析柱的完美結合使層析變得高效簡單。Geldex 75 PG Chromatography Column凝膠過濾預裝柱廣泛用于實驗室工藝開發(fā)、樣品的少量制備以及檢測，適合于多肽、重組蛋白以及及抗體等領域的生物分子的分離純化。

此凝膠過濾預裝柱具有以下特點：①即開即用；②流速快；③分辨率高；④柱床體積穩(wěn)定；⑤物理化學耐受性好。

 

產品性質

預裝介質	Geldex 75 PG
分離范圍	3-70 kDa (球蛋白)
平均顆粒大小	34 µm
柱床高度	60±1cm
柱床體積	120 mL
最大耐壓	0.3 MPa
建議流速	0.5-1.5 mL/min
保存溶液	20%乙醇，4~30℃

 

運輸和保存方法

1.使用后的Geldex 75 PG Chromatography Column應儲存于 20%乙醇中，為了防止乙醇揮發(fā)以及微生物生長，建議3個月更換一次新鮮的20%乙醇。

2.放置在4~8℃冷庫中保存效果更好；有效期5年。

 

注意事項

1. 層析柱外殼使用的是聚丙烯酸材質，不可使層析柱外殼接觸濃度大于40%的有機溶劑，如乙醇、乙腈、丙酮等，也不可使用高濃度的有機溶劑如70%乙醇擦拭外殼，否則會導致風裂。

2. 層析柱堵塞嚴重的時候可以使用反向清洗的方法，但是反向沖洗需要降低流速至正常流速的一半以下。

3. 層析柱體為玻璃制品，使用時應輕拿輕放，防止摔碎或影響柱效。

4. 為了避免堵塞層析柱，所有樣品和緩沖液需要用 0.45 μm 膜過濾。

5. 為了得到良好的分離效果，避免緩沖液與層析柱有太大溫差變化。

6. 層析柱放置在無陽光直射的地方。

7. 層析柱可以放在層析冷柜中使用，但是需要適當降低流速。

8. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

9. 本產品僅作科研用途！

 

使用方法

1 將層析柱接入層析系統(tǒng)

1）打開包裝，取出層析柱

2）檢查層析柱是否完好，以及層析柱在運輸過程中是否進氣變干。

3）將層析柱垂直固定在層析系統(tǒng)旁，注意柱頭向上。

4）啟動層析系統(tǒng)，確保排凈層析系統(tǒng)內的氣泡，并設置層析系統(tǒng)報警壓為 0.3 MPa，然后調整并保持 0.2 mL/min 的流速運行。

5）打開層析柱的上下封口帽，抬高底部出口管道的出口位置，使其高于頂部進口管道的進口位置，觀測到管道進口處沒有了氣泡后將進口管道與層析系統(tǒng)連接。

2 純化流程

2.1 層析柱預處理

對層析柱進行預處理，即采用0.1~0.5 M的NaOH對層析柱處理4小時以上以達到清洗、消毒和去除熱源的目的，再用蒸餾水沖洗2個柱體積。

2.2 平衡

使用2~3倍柱體積的上樣平衡液平衡柱子，建議在平衡緩沖液中加入至少0.15 M的NaCl。

2.3 樣品準備

樣品需要過0.45 μm以下的濾膜，粘度太高時可以適當稀釋，蛋白濃度一般不超過70 mg/mL。

2.4 上樣

一般加載 0.5~2% 柱體積的樣品量，根據分離效果可以適當調整上樣體積。 

2.5 洗脫

繼續(xù)用平衡緩沖液沖洗層析柱，收集流出的不同組分，至不再有生物分子流出，一般需要1~1.5個柱體積。

3 清洗與再生

（1）先用1倍柱體積的 1 M NaCl 去除。

（2）對于變性的蛋白的去除，采用 1 M NaOH以20 cm/h流速沖洗2個柱體積。

（3）對于脂類或脂蛋白的去除，用 4倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗，需注意有機溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產生氣泡。

（4）對于無機污染物的去除，采用0.5 M的醋酸沖洗2個柱體積。

（5）最后用4倍柱體積的蒸餾水沖洗。

 

                                          HB220526