Hieff^® Taq DNA Ligase是一種突變型的Taq DNA連接酶，具有較高的連接效率，應(yīng)用于同源重組性能較野生型得到顯著提高。同時維持了野生型的基本功能，是一種耐高溫連接酶，它能催化與同一互補(bǔ)靶DNA鏈雜交的兩條相鄰寡核苷酸鏈的5´-磷酸和3´-羥基之間形成磷酸二酯鍵。該催化反應(yīng)只有當(dāng)兩條寡核苷酸鏈與互補(bǔ)靶 DNA 完全配對，且兩條寡核苷酸鏈之間沒有間隙的條件下才會發(fā)生，因此，可以用它來檢測單堿基替換。Taq DNA連接酶以NAD⁺為輔酶因子，在45℃-65℃范圍內(nèi)均有活性。

 

產(chǎn)品組分

組分編號	組分名稱	產(chǎn)品編號/規(guī)格
		14957ES80 （1000 U）	14957ES84 （2000 U）	14957ES92 （10000 U）
14957-A	Hieff® Taq DNA ligase (40 U/µL)	25 μL	50 μL	5×50 μL
14957-B	10×Taq DNA Ligase Reaction Buffer（含NAD+）	250 μL	500 μL	5×500 μL

 

來源

重組E. coli 菌株，含有從Thermus aquaticus HB8中克隆的連接酶基因。

 

產(chǎn)品應(yīng)用

1）同源重組；

2）用連接酶檢測反應(yīng)和連接酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)對等位基因進(jìn)行特異性檢測；

3）通過PCR擴(kuò)增摻入磷酸化寡核苷酸進(jìn)行誘變。

 

單位定義

在50 μL反應(yīng)體系中，45℃條件下，孵育15 min能使50%的1 μg經(jīng)BstEII消化的λDNA片段（12 bp粘性末端）發(fā)生連接所需要的酶量定義為1個活性單位(U)。

 

運(yùn)輸與保存方法

干冰運(yùn)輸。-20℃保存，有效期2年。長時間（大于30天）保存時，緩沖液應(yīng)于-80℃保存。

 

注意事項(xiàng)

1. 10×Taq DNA Ligase Reaction Buffer中含有輔酶因子NAD⁺，為了延長NAD⁺的半衰期，Buffer應(yīng)于-80℃儲存；

2. Taq DNA Ligase不能替代T4 DNA ligase；

3. 本產(chǎn)品僅做科研用途；

4. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。