成人欧美一区二区三区,天天干天天操天天爱,免费特黄一级欧美大片在线看 ,亚洲中文字幕无码一区日日添

    <span id="alen4"></span>

    <li id="alen4"></li>
    

      
    
        
       
       
       
       
      長片段逆轉(zhuǎn)錄酶Hifair? Ultra Reverse Transcriptase(200 U/μL)
       
      更多活動(dòng)更多優(yōu)惠，盡在翌圣商城》
       
       
       
      批量采購， 請(qǐng)點(diǎn)擊詢價(jià)
       
       
      產(chǎn)品說明書
                  
      FAQ
                  
      COA
                  
      已發(fā)表文獻(xiàn)
                  
       
      

       
      


      Hifair® Ultra Reverse Transcriptase是對(duì)Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase進(jìn)行基因工程改造的全新逆轉(zhuǎn)錄酶，該酶缺乏RNase H活性，合成全長cDNA的能力大幅提升，可擴(kuò)增長達(dá)20 kb的cDNA。Hifair® Ultra Reverse Transcriptase的熱穩(wěn)定性顯著提高，耐受溫度達(dá)65℃，可對(duì)具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)的RNA模板高效逆轉(zhuǎn)錄。與Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase相比，Hifair® Ultra Reverse Transcriptase具有更高的持續(xù)合成能力及合成速率，同時(shí)增強(qiáng)了耐抑制劑的能力，可有效解決樣品中的抑制劑導(dǎo)致逆轉(zhuǎn)錄效率低下的問題。
      


       
      


      產(chǎn)品組分
      


      
	
		
      
			
			
      編號(hào)
      
			      		
			
			
      組分
      
			      		
			
			
      產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      14604ES84 
      

			
      (2000 U)
      
			      		
			
			
      14604ES92
      

			
      (10000 U)
      
			      		
			
			
      14604ES98
      

			
      (200000 U)
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      14604-A
      
			      		
			
			
      Hifair® Ultra Reverse Transcriptase (200 U/μL)
      
			      		
			
			
      10 μL
      
			      		
			
			
      50 μL
      
			      		
			
			
      1 mL
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      14604-B
      
			      		
			
			
      5×Hifair® Ultra Reverse Transcriptase Reaction Buffer
      
			      		
			
			
      50 μL
      
			      		
			
			
      250 μL
      
			      		
			
			
      5×1 mL
      
			      		
		
      
	      

      


       
      


      產(chǎn)品應(yīng)用
      


      全長cDNA文庫構(gòu)建；
      


      終點(diǎn)法PCR；
      


      RT-PCR及實(shí)時(shí)定量RT-PCR等。
      


       
      


      運(yùn)輸與保存方法
      


      干冰運(yùn)輸，-20ºC保存，有效期一年。
      


       
      


      注意事項(xiàng)
      


      1）請(qǐng)保持實(shí)驗(yàn)區(qū)域潔凈；操作時(shí)需穿戴干凈的手套、口罩；實(shí)驗(yàn)所用耗材均需保證RNase free，以防止RNase污染；
      


      2）所有操作均應(yīng)在冰上進(jìn)行，防止發(fā)生RNA降解；
      


      3）為保證逆轉(zhuǎn)錄成功，建議使用高質(zhì)量的RNA樣本；
      


      4）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
      


      5）本產(chǎn)品僅用作科研用途！
      

      


       
      


      第一鏈cDNA合成操作步驟
      


      1. RNA變性（此步為可選步驟，RNA變性有助于打開二級(jí)結(jié)構(gòu)，可在很大程度上提高第一鏈cDNA的產(chǎn)量。）
      


      
	
		
      
			
			
      組分
      
			      		
			
			
      使用量
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      RNase free ddH2O
      
			      		
			
			
      to 13 μL
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      Oligo (dT)18 (50 μM) 
      

			
      or Random Primers (50 μM)  
      

			
      or Gene Specific Primers (2 μM)
      
			      		
			
			
      1 μL
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      or 1 μL
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      or 1 μL
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      模板RNA
      
			      		
			
			
      Total RNA: 10 pg -5 μg或mRNA:1 pg-500 ng 
      
			      		
		
      
	      

      


      65℃加熱5 min，迅速置于冰上冷卻2 min。簡短離心收集反應(yīng)液后加入下表中的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液，并用移液器輕輕吹打混勻。
      


      2. 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液配制
      


      
	
		
      
			
			
      組分
      
			      		
			
			
      使用量
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      上一步的反應(yīng)液
      
			      		
			
			
      13 μL
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      5×Hifair® Ultra Reverse Transcriptase Reaction Buffer
      
			      		
			
			
      4 μL
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      dNTP Mix (10 mM)
      
			      		
			
			
      1 μL
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      Hifair® Ultra Reverse Transcriptase (200 U/μL)
      
			      		
			
			
      1 μL
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      RNase Inhibitor (40 U/µL)
      
			      		
			
			
      1 μL
      
			      		
		
      
	      

      


      3. 逆轉(zhuǎn)錄程序設(shè)置
      


      
	
		
      
			
			
      溫度
      
			      		
			
			
      時(shí)間
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      25℃
      
			      		
			
			
      5 min
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      50℃
      
			      		
			
			
      15 min
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      85℃
      
			      		
			
			
      5 min
      
			      		
		
      
	      

      


      【注】：1）當(dāng)使用Random Primers時(shí)，需25℃，孵育5 min；若使用Oligo (dT)18或Gene Specific Primers，此步可省略；
      


      2）逆轉(zhuǎn)錄溫度：推薦使用50℃。對(duì)于高GC含量模板或者復(fù)雜模板，可將逆轉(zhuǎn)錄溫度提高到55℃-60℃；
      


      3）85℃加熱5 min，目的是使逆轉(zhuǎn)錄酶失活。
      


      ※ 逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可立即用于后續(xù)PCR或qPCR反應(yīng)，也可-20℃短期保存，若需長期保存，建議分裝后，于-80℃保存，避免反復(fù)凍融。
      


      HB221114
      

         
       
       
       
       
       
       
       
      400-6111-883