產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
FAQ
COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
IL-1又稱為淋巴細(xì)胞刺激因子，細(xì)胞來(lái)源主要由活化的單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，主要存在形式為IL-1α和IL-1β，在體內(nèi)發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。IL-1β作為IL-1家族主要成員，也主要由活化的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，并通過(guò)誘導(dǎo)IL-2釋放、促進(jìn)B細(xì)胞成熟與增殖以及成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活來(lái)刺激胸腺細(xì)胞增殖，也可刺激滑膜細(xì)胞釋放前列腺素及各種膠原酶。IL-1β在免疫和炎癥反應(yīng)、骨重塑、發(fā)熱、碳水化合物代謝等生理現(xiàn)象起著核心作用。異常的IL-1β信號(hào)通過(guò)促進(jìn)上皮向間充質(zhì)轉(zhuǎn)化、增加炎性細(xì)胞因子和趨化因子的產(chǎn)生、誘導(dǎo)免疫抑制和細(xì)胞凋亡抵抗以及增加白細(xì)胞粘附來(lái)驅(qū)動(dòng)腫瘤發(fā)生。IL-1β導(dǎo)致炎癥的發(fā)生疾病包括糖尿病、關(guān)節(jié)炎和動(dòng)脈粥樣硬化，此外IL-1β的異常激活也與大多數(shù)癌癥類型的不良預(yù)后有關(guān)，包括結(jié)腸癌、肺癌和乳腺癌等。
翌圣Human IL-1β/IL-1F2 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒，用于定量測(cè)定血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中的人白介素1β(Human IL-1β/IL-1F2)。特異性抗人白介素1β抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本，經(jīng)過(guò)孵育，樣本中存在的人白介素1β與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測(cè)抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中人白介素1β的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng)570 - 630 nm)測(cè)定吸光度值。
產(chǎn)品信息
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貨號(hào) |
97028ES48 / 97028ES96 |
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規(guī)格 |
48 T / 96 T |
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檢測(cè)范圍 |
3.9-250 pg/mL |
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檢測(cè)方法 |
雙抗夾心法 |
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檢測(cè)時(shí)長(zhǎng) |
4.5小時(shí) |
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靈敏度 |
1.0 pg/mL |
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稀釋線性 |
81 - 120% |
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回收率 |
79 - 107% |
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板內(nèi)差 |
5.4% |
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板間差 |
9.6% |
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
- 標(biāo)曲數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，生成的標(biāo)曲用于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。
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濃度（pg/mL） |
顯色值 |
平均值 |
校準(zhǔn)值 |
|
|
250 |
2.716 |
2.640 |
2.678 |
2.681 |
|
125 |
1.680 |
1.662 |
1.671 |
1.658 |
|
62.5 |
0.885 |
0.902 |
0.893 |
0.918 |
|
31.25 |
0.505 |
0.504 |
0.504 |
0.492 |
|
15.63 |
0.290 |
0.293 |
0.291 |
0.277 |
|
7.81 |
0.171 |
0.179 |
0.175 |
0.176 |
|
3.90 |
0.119 |
0.120 |
0.120 |
0.130 |
|
0 |
0.067 |
0.065 |
0.066 |
/ |
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
- 靈敏度檢測(cè)
IL-1β的最低檢測(cè)限為1.0 pg/mL，通過(guò)使用重復(fù)檢測(cè)20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。
- 精密度檢測(cè)
酶標(biāo)板內(nèi)精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測(cè)定8次，評(píng)估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。
酶標(biāo)板間精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測(cè)24次，評(píng)估酶標(biāo)板間的精密度。
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項(xiàng)目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
|
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
10 |
10 |
10 |
24 |
24 |
24 |
|
|
平均值 |
114.8 |
28.0 |
6.0 |
116.6 |
28.6 |
6.3 |
|
標(biāo)準(zhǔn)差 |
3.6 |
1.3 |
0.5 |
4.1 |
1.2 |
0.6 |
|
變異系數(shù)（%） |
3.1 |
4.5 |
8.7 |
3.6 |
4.2 |
9.0 |
- 回收率檢測(cè)
通過(guò)不同水平的IL-1β添加于樣本中來(lái)測(cè)定回收率，其回收率如下:
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樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
|
血清 |
98.2 |
81.8-107.4 |
|
血漿 |
90.8 |
79.1-104.5 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
86.4 |
78.6-94.6 |
- 稀釋線性檢測(cè)
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血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
100.0 |
97.7-102.8 |
|
1:04 |
106.4 |
100.5-112.8 |
|
1:08 |
108.1 |
103.0-112.8 |
|
1:16 |
112.8 |
105.7-120.0 |
|
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
99.8 |
99.2-100.4 |
|
1:04 |
102.3 |
100.5-104.1 |
|
1:08 |
105.3 |
103.0-107.6 |
|
1:16 |
108.5 |
105.7-111.4 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
84.9 |
81.3-87.5 |
|
1:04 |
86.3 |
82.0-89.6 |
|
1:08 |
89.0 |
87.4-91.4 |
|
1:16 |
88.4 |
84.8-91.8 |
- 樣本值
應(yīng)用本試劑盒，檢測(cè)若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
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樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值（pg/mL） |
樣本值（pg/mL） |
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血清 |
10 |
3.8 |
n.d. -22.4 |
|
血漿 |
6 |
58.1 |
n.d. -159.8 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測(cè)范圍內(nèi)得1 ng/mL
- 測(cè)定特異性
本試劑盒識(shí)別天然和重組人IL-1β，沒(méi)有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
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Recombinant Human: |
Recombinant Mouse: |
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IFN-γ |
IL-18 |
IFN-γ |
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IL-1α |
IL-21 |
IL-1α |
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IL-1ra |
IL-23 |
IL-1β |
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IL-2 |
IL-33 |
IL-2 |
|
IL-4 |
IL-38 |
IL-4 |
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IL-5 |
ST2 |
IL-6 |
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IL-6 |
TNF-α |
IL-10 |
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IL-8 |
VEGF |
IL-33 |
|
IL-10 |
|
ST2 |
|
IL-12 |
|
TNF-α
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檢測(cè)簡(jiǎn)圖
疑問(wèn)解答
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問(wèn)題 |
造成原因 |
解決方法 |
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標(biāo)曲不好 |
移液量不準(zhǔn)確 |
檢查移液器，按時(shí)校準(zhǔn)，仔細(xì)操作，充分混勻時(shí)蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
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稀釋方法不恰當(dāng) |
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顯色值偏低 |
孵育時(shí)間太短 |
給予足夠的孵育時(shí)間，樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。 |
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移液量不足或稀釋不當(dāng) |
校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作 |
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CV偏高 |
酶標(biāo)板清洗不當(dāng) |
使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機(jī)，檢查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
準(zhǔn)備新鮮洗液 |
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靈敏度較低 |
試劑盒儲(chǔ)存不當(dāng) |
按照產(chǎn)品組分表進(jìn)行保存。 |
Ver. CN20231023
