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      Mouse IL-1β ELISA Kit 小鼠白介素1β ELISA檢測試劑盒

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      產(chǎn)品說明書

      FAQ

      COA

      已發(fā)表文獻(xiàn)

       

      小鼠白介素 (Mouse IL-1β/IL-1F2)作為IL-1家族主要成員,也主要由活化的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,并通過誘導(dǎo)IL-2釋放、促進(jìn)B細(xì)胞成熟與增殖以及成纖維細(xì)胞生長因子激活來刺激胸腺細(xì)胞增殖,也可刺激滑膜細(xì)胞釋放前列腺素及各種膠原酶。IL-1β在免疫和炎癥反應(yīng)、骨重塑、發(fā)熱、碳水化合物代謝等生理現(xiàn)象起著核心作用。異常的IL-1β信號通過促進(jìn)上皮向間充質(zhì)轉(zhuǎn)化、增加炎性細(xì)胞因子和趨化因子的產(chǎn)生、誘導(dǎo)免疫抑制和細(xì)胞凋亡抵抗以及增加白細(xì)胞粘附來驅(qū)動腫瘤發(fā)生。IL-1β導(dǎo)致炎癥的發(fā)生疾病包括糖尿病、關(guān)節(jié)炎和動脈粥樣硬化,此外IL-1β的異常激活也與大多數(shù)癌癥類型的不良預(yù)后有關(guān),包括結(jié)腸癌、肺癌和乳腺癌等。

      翌圣Mouse IL-1β/IL-1F2 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿中的小鼠白介素1β(Mouse IL-1β/IL-1F2)。特異性抗小鼠白介素1β抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的小鼠白介素1β與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入檢測抗體孵育結(jié)合,經(jīng)洗滌,再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中小鼠白介素1β的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。

       

      產(chǎn)品信息

      貨號

      98024ES48 / 98024ES96 

      規(guī)格

      48 T / 96 T

      檢測范圍

      15.63-1000 pg/mL

      檢測方法

      雙抗夾心法

      檢測時長

      4.5小時

      靈敏度

      11.46 pg/mL

      稀釋線性

      89 - 123%

      回收率

      78 - 107%

      板內(nèi)差

      4.0%

      板間差

      3.9%

       

      實驗數(shù)據(jù)

      1. 標(biāo)曲數(shù)據(jù)

      數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,生成的標(biāo)曲用于實驗數(shù)據(jù)分析

      1. 靈敏度檢測

      IL-1β/IL-1F2的最低檢測限為11.46 pg/mL,通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計算得出。

      1. 精密度檢測

      酶標(biāo)板內(nèi)精密度

      3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定8次,評估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。

      酶標(biāo)板間精密度

      3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測24次,評估酶標(biāo)板間的精密度。

      項目

      板內(nèi)精密度

      板間精密度

      樣本

      1

      2

      3

      1

      2

      3

      10

      10

      10

      30

      30

      30

      平均值

      489.74

      119.91

      29.16

      476.65

      119.32

      30.79

      標(biāo)準(zhǔn)差

      23.16

      5.94

      0.74

      22.08

      5.57

      0.81

      變異系數(shù)%

      4.7

      5.0

      2.5

      4.6

      4.7

      2.6

      1. 回收率檢測

       通過不同水平的IL-1β/IL-1F2添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:

      樣本類型

      平均回收率(%)

      范圍(%)

      血清

      94.6

      81.2-107.6

      血漿

      82.8

      78.0-91.0

      細(xì)胞培養(yǎng)上清

      87.9

      81.4-94.1

      1. 稀釋線性檢測

      血清稀釋比例

      平均期望值(%)

      范圍(%)

      1:02

      103.0

      98.1-106.9

      1:04

      105.5

      101.3-106.6

      1:08

      111.3

      105.2-123.3

      1:16

      94.5

      89.5-98.3

       

      血漿稀釋比例

      平均期望值(%)

      范圍(%)

      1:02

      103.6

      101.2-106.2

      1:04

      105.3

      101.8-107.7

      1:08

      107.0

      105.9-107.6

      1:16

      101.5

      96.4-106.2

       

      細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例

      平均期望值(%)

      范圍(%)

      1:02

      98.0

      94.8-100.0

      1:04

      98.5

      91.1-103.4

      1:08

      102.9

      95.0-107.6

      1:16

      100.1

      90.8-104.9

      1. 樣本值
         

      應(yīng)用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。

      樣本類型

      樣本數(shù)目

      平均值(mg/mL)

      樣本值(mg/mL)

      血清

      10

      n.d.

      n.d.

      血漿

      8

      n.d.

      n.d.

      細(xì)胞培養(yǎng)上清

      4

      n.d.

      n.d.

      n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得15.63 pg/mL

      1. 測定特異性

      本試劑盒識別天然和重組小鼠白介素。下述因子進(jìn)行了特異性的評估,沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。

      Recombinant human:

      Recombinant Mouse:

      IL-1α

      IL-10

      IL-1α

      IL-12

      IL-1β

      IL-12

      IL-2

      IL-13

      IL-2

      IL-13

      IL-3

      IFN-γ

      IL-3

      IFN-γ

      IL-4

      TNF-α

      IL-4

      TNF-α

      IL-6

      VEGF

      IL-6

      VEGF

      IL-10

       

       

      檢測簡圖

       

      疑問解答

      問題

      造成原因

      解決方法

      標(biāo)曲不好

      移液量不準(zhǔn)確

      檢查移液器,按時校準(zhǔn),仔細(xì)操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。

      稀釋方法不恰當(dāng)

      顯色值偏低

      孵育時間太短

      給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。

      移液量不足或稀釋不當(dāng)

      校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作

      CV偏高

      酶標(biāo)板清洗不當(dāng)

      使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機(jī),檢查所有的端口是否堵塞。

      受污染的洗液

      準(zhǔn)備新鮮洗液

      靈敏度較低

      試劑盒儲存不當(dāng)

      按照產(chǎn)品組分表進(jìn)行保存。

       

      400-6111-883