產(chǎn)品說明書
FAQ
COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
人細(xì)胞程序性死亡-配體1 (PD-L1)也稱為表面抗原分化簇274（cluster of differentiation 274，CD274）或 B7同源體（B7 homolog 1，B7-H1），是人類體內(nèi)的一種蛋白質(zhì)，由CD274基因編碼。PD-L1 是大小為 40kDa 的第一型跨膜蛋白，據(jù)信其在某些特殊情形（例如懷孕、組織移植、自體免疫疾病，以及諸如肝炎等某些疾?。┫?，與免疫系統(tǒng)的抑制有關(guān)。正常情形下免疫系統(tǒng)會(huì)對聚集在淋巴結(jié)或脾臟的外來抗原產(chǎn)生反應(yīng)，促發(fā)具抗原特異性的細(xì)胞毒殺性T細(xì)胞（CD8+ Tcell增生）。而細(xì)胞程序性死亡受體-1（PD-1）與細(xì)胞程序性死亡-配體1（PD-L1）結(jié)合，可以傳導(dǎo)抑制性的信號，減低淋巴結(jié)CD8+ T細(xì)胞的增生， 而且PD-1還可以借由調(diào)節(jié)Bcl-2基因，控制淋巴結(jié)中抗原特異性T細(xì)胞的聚積。
翌圣Human PD-L1 / B7-H1 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中的人細(xì)胞程序性死亡-配體1(Human PD-L1 / B7-H1)。特異性抗人細(xì)胞程序性死亡-配體1抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本，經(jīng)過孵育，樣本中存在的人細(xì)胞程序性死亡-配體1與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測抗體（生物素標(biāo)記）孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(HRP標(biāo)記鏈霉親和素)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中人細(xì)胞程序性死亡-配體1的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產(chǎn)品信息
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貨號 |
97043ES48 / 97043ES96 |
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規(guī)格 |
48 T / 96 T |
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檢測范圍 |
156.3-10000 pg/mL |
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檢測方法 |
雙抗夾心法 |
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檢測時(shí)長 |
4.5小時(shí) |
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靈敏度 |
2.0 pg/mL |
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稀釋線性 |
94.6 - 128.3% |
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回收率 |
74.3 - 106.8% |
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板內(nèi)差 |
3.2% |
|
板間差 |
6.3% |
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
- 標(biāo)曲數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，生成的標(biāo)曲用于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
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濃度（pg/mL） |
顯色值 |
平均值 |
校準(zhǔn)值 |
|
|
10000.0 |
2.695 |
2.657 |
2.676 |
2.625 |
|
5000.0 |
2.075 |
2.047 |
2.061 |
2.010 |
|
2500.0 |
1.460 |
1.444 |
1.452 |
1.401 |
|
1250.0 |
0.933 |
0.925 |
0.929 |
0.878 |
|
625.0 |
0.595 |
0.569 |
0.582 |
0.531 |
|
312.5 |
0.354 |
0.339 |
0.347 |
0.296 |
|
156.3 |
0.212 |
0.197 |
0.204 |
0.154 |
|
0.0 |
0.052 |
0.050 |
0.051 |
/ |
- 靈敏度檢測
人PD-L1的最低檢測限為2.0 pg/mL，通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。
- 精密度檢測
酶標(biāo)板內(nèi)精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定20次，評估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。
酶標(biāo)板間精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測36次，評估酶標(biāo)板間的精密度。
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項(xiàng)目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
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樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
20 |
20 |
20 |
36 |
36 |
36 |
|
|
平均值 |
4556.3 |
1196.1 |
302.9 |
4801.1 |
1240.1 |
314.6 |
|
標(biāo)準(zhǔn)差 |
203.58 |
27.89 |
8.77 |
415.38 |
61.13 |
17.08 |
|
變異系數(shù)（%） |
4.5 |
2.3 |
2.9 |
8.7 |
4.9 |
5.4 |
- 回收率檢測
通過不同水平的PD-L1添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
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樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
|
血清 |
91.7 |
84.8-104.2 |
|
血漿 |
80.6 |
74.3-91.0 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
93.8 |
86.0-106.8 |
- 稀釋線性檢測
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血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
102.5 |
100.8-104.8 |
|
1:04 |
110.1 |
103.1-119.0 |
|
1:08 |
111.6 |
106.0-119.6 |
|
1:16 |
112.9 |
106.0-118.6 |
|
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
104.3 |
100.8-107.7 |
|
1:04 |
114.8 |
112.0-117.7 |
|
1:08 |
117.4 |
114.7-120.0 |
|
1:16 |
123.2 |
117.6-128.3 |
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細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
97.3 |
95.4-98.9 |
|
1:04 |
99.0 |
94.9-101.7 |
|
1:08 |
96.9 |
94.6-98.4 |
|
1:16 |
101.3 |
99.7-102.3 |
- 樣本值
應(yīng)用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
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樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值（ng/mL） |
樣本值（pg/mL） |
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血清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
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EDTA血漿 |
6 |
n.d. |
n.d. |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得156.3 pg/mL
- 測定特異性
本試劑盒識(shí)別天然和重組人PD-L1，沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
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Recombinant Human: |
Recombinant Mouse: |
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B7-1/Fc Chimera |
Mouse B7-H1/Fc Chimera |
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B7-2/Fc Chimera |
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B7-H2/Fc Chimera |
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B7-H3 |
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B7-H4 |
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B7-H6/Fc Chimera |
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PD-L2/Fc Chimera |
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Ver. CN20231205
