產(chǎn)品說明書
FAQ
COA
已發(fā)表文獻
白細胞介素 12(IL-12)，也稱為自然殺傷細胞刺激因子(NKSF)或細胞毒性淋巴細胞成熟因子(CLMF)，是一種異二聚體多效性細胞因子，由 40 kDa(p40)亞基和 35 kDa(p35)亞基組成。IL-12 p40亞基由IL-23共享，IL-23是另一種異二聚體細胞因子，具有與IL-12相似和不同的生物活性。IL-12由巨噬細胞和B細胞產(chǎn)生，已被證明對T細胞和自然殺傷(NK)細胞有多種作用。雖然小鼠IL-12在人和小鼠細胞上都有活性，但人IL-12在小鼠細胞上沒有活性。
翌圣Human IL-12 p70 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清中的人白介素12 p70(Human IL-12 p70)。特異性抗人白介素12 p70抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本，經(jīng)過孵育，樣本中存在的人白介素12 p70與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質(zhì)后，加入檢測抗體（生物素標記）孵育結合，經(jīng)洗滌，再加入酶結合物(HRP標記鏈霉親和素)孵育結合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中人白介素12 p70的濃度成正比。加入終止液終止反應，在450 nm 主波長，570nm次波長測定吸光度值。
產(chǎn)品信息
|
貨號 |
97025ES48 / 97025ES96 |
|
規(guī)格 |
48 T / 96 T |
|
檢測范圍 |
31.25-2000 pg/mL |
|
檢測方法 |
雙抗夾心法 |
|
檢測物種 |
人 |
|
檢測時長 |
5 小時 |
|
靈敏度 |
1.954 pg/mL |
|
稀釋線性 |
81 - 127% |
|
回收率 |
70 - 107% |
|
板內(nèi)差 |
5.0% |
|
板間差 |
8.4% |
實驗數(shù)據(jù)
- 標曲數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標準曲線，生成的標曲用于實驗數(shù)據(jù)分析。
標準曲線圖
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濃度（pg/mL） |
顯色值 |
平均值 |
校準值 |
||
|
2000 |
2.147 |
2.016 |
2.082 |
2.039 |
|
|
1000 |
1.311 |
1.208 |
1.260 |
1.217 |
|
|
500 |
0.732 |
0.651 |
0.691 |
0.649 |
|
|
250 |
0.441 |
0.424 |
0.433 |
0.391 |
|
|
125 |
0.220 |
0.218 |
0.219 |
0.177 |
|
|
62.5 |
0.129 |
0.128 |
0.129 |
0.086 |
|
|
31.3 |
0.089 |
0.086 |
0.087 |
0.045 |
|
|
0 |
0.043 |
0.042 |
0.042 |
/ |
|
- 靈敏度檢測
人白介素12 p70的最低檢測限為1.954 pg/mL，通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
- 精密度檢測
酶標板內(nèi)精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內(nèi)重復測定20次，評估酶標板內(nèi)的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測36次，評估酶標板間的精密度。
|
項目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
|
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
20 |
20 |
20 |
36 |
36 |
36 |
|
|
平均值 |
1393.2 |
304.7 |
69.2 |
1247.7 |
304.6 |
68.2 |
|
標準差 |
68.3 |
14.0 |
3.8 |
130.8 |
30.5 |
3.1 |
|
變異系數(shù)（%） |
4.9 |
4.6 |
5.4 |
10.5 |
10.0 |
4.6 |
- 回收率檢測
通過不同水平的人白介素12 p70添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
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樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
|
血清 |
88.3 |
71.8-104.0 |
|
血漿 |
82.3 |
70.5-95.5 |
|
細胞培養(yǎng)上清 |
95.5 |
79.7-107.6 |
- 稀釋線性檢測
|
血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
87.7 |
85.2-92.0 |
|
1:04 |
93.8 |
89.3-99.5 |
|
1:08 |
99.7 |
89.8-109.2 |
|
1:16 |
102.8 |
86.5-117.8 |
|
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
91.2 |
87.8-97.2 |
|
1:04 |
106.2 |
102.2-112.5 |
|
1:08 |
115.2 |
113.7-116.9 |
|
1:16 |
123.0 |
116.1-127.1 |
|
細胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
89.9 |
81.6-103.3 |
|
1:04 |
111.2 |
98.5-118.5 |
|
1:08 |
114.8 |
108.3-121.6 |
|
1:16 |
117.8 |
111.9-123.9 |
- 樣本值
應用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
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樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值（pg/mL） |
樣本值（pg/mL） |
|
血清 |
n.d. |
n.d. |
n.d. |
|
EDTA血漿 |
n.d. |
n.d. |
n.d. |
|
肝素血漿 |
n.d.-152.3 |
32 |
n.d.-152.3 |
|
枸櫞酸鈉血漿 |
n.d. |
n.d. |
n.d. |
|
細胞培養(yǎng)上清 |
n.d. |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得31.25 pg/mL
- 測定特異性
本試劑盒識別天然和重組人白介素12 p70。在50 ng/mL條件下制備的下述因子進行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。
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Recombinant human: |
Recombinant mouse: |
|
G-CSF |
IL-6 |
|
GP130 |
IL-12/IL-23 p40 |
|
IL-6 |
IL-12 p70 |
|
IL-6 Rα |
IL-23 |
|
IL-12 p35 |
IL-27 |
|
IL-12/IL-23 p40 |
|
|
IL-12 Rβ1 |
|
|
IL-12 Rβ2 |
|
|
IL-23 |
|
|
IL-27 |
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檢測簡圖
疑問解答
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問題 |
造成原因 |
解決方法 |
|
標曲不好 |
移液量不準確 |
檢查移液器，按時校準，仔細操作，充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
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稀釋方法不恰當 |
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顯色值偏低 |
孵育時間太短 |
給予足夠的孵育時間，樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
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移液量不足或稀釋不當 |
校準移液器和規(guī)范操作 |
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CV偏高 |
酶標板清洗不當 |
使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機，檢查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
準備新鮮洗液 |
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靈敏度較低 |
試劑盒儲存不當 |
按照產(chǎn)品組分表進行保存。 |
Ver. CN20231208
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