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FAQ
COA
已發(fā)表文獻
白細胞介素 12(IL-12), 也稱為自然殺傷細胞刺激因子(NKSF)或細胞毒性淋巴細胞成熟因子(CLMF), 是一種異二聚體多效性細胞因子，由 40 kDa(p40)亞基和35 kDa(p35) 亞基組成。IL-12 p40亞基由IL-23共享，IL-23是另一種異二聚體細胞因子，具有與IL-12相似和不同的生物活性。IL-12由巨噬細胞和B細胞產生，已被證明對T細胞和自然殺傷（NK）細胞有多種作用。雖然小鼠IL-12在人和小鼠細胞上都有活性，但人IL-12在小鼠細胞上沒有活性。
翌圣Mouse IL-12 p70 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿中的小鼠白介素12 p70(Mouse IL-12 p70)。特異性抗小鼠白介素12 p70抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本，經過孵育，樣本中存在的小鼠白介素12 p70與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質后，加入檢測抗體孵育結合，經洗滌，再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中小鼠白介素12 p70的濃度成正比。加入終止液終止反應，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產品信息
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貨號 |
98007ES48 / 98007ES96 |
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規(guī)格 |
48 T / 96 T |
|
檢測范圍 |
31.25-2000 pg/mL |
|
檢測方法 |
雙抗夾心法 |
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檢測物種 |
小鼠 |
|
檢測時長 |
4.5小時 |
|
靈敏度 |
7.19 pg/mL |
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稀釋線性 |
96 - 124% |
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回收率 |
82 - 122% |
|
板內差 |
3.2% |
|
板間差 |
4.8% |
實驗數(shù)據(jù)
- 標曲數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標準曲線，生成的標曲用于實驗數(shù)據(jù)分析。
- 靈敏度檢測
IL-12 p70的最低檢測限為7.19 pg/mL，通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
- 精密度檢測
酶標板內精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內重復測定10次，評估酶標板內的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測30次，評估酶標板間的精密度。
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項目 |
板內精密度 |
板間精密度 |
||||
|
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
10 |
10 |
10 |
30 |
30 |
30 |
|
|
平均值 |
960.8 |
226.7 |
51.0 |
976.8 |
228.4 |
51.4 |
|
標準差 |
43.6 |
5.2 |
1.5 |
56.9 |
8.2 |
2.6 |
|
變異系數(shù)（%） |
4.5 |
2.3 |
2.9 |
5.8 |
3.6 |
5.0 |
- 回收率檢測
通過不同水平的IL-12 p70添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
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樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
|
血清 |
104.3 |
95.2-117 |
|
血漿 |
91.8 |
82.3-101.6 |
|
細胞培養(yǎng)上清 |
109.6 |
98.5-122.4 |
- 稀釋線性檢測
|
血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
114.5 |
109.9-122.2 |
|
1:04 |
104.5 |
96-112.9 |
|
1:08 |
112.4 |
106.9-118.8 |
|
1:16 |
113.8 |
103.1-121.2 |
|
細胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
115.2 |
114.4-116.9 |
|
1:04 |
113.7 |
108.9-116.8 |
|
1:08 |
117.9 |
111.7-124.5 |
|
1:16 |
118.1 |
115-121.2 |
- 樣本值
應用本試劑盒，檢測若干正常小鼠的血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清樣本，數(shù)據(jù)僅供參考，結果見下表：
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樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值（pg/mL） |
樣本值（pg/mL） |
|
血清 |
6 |
n.d. |
n.d. |
|
血漿 |
6 |
n.d. |
n.d. |
|
細胞培養(yǎng)上清 |
6 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內得31.25 pg/mL
- 測定特異性
本試劑盒識別天然和重組小鼠白介素12 p70。下述因子進行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。
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Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
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GM-CSF |
IL-6 |
IFN-γ |
|
IFN-γ |
IL-10 |
IL-1α |
|
IL-1α |
IL-12 |
IL-1β |
|
IL-1β |
IL-17A |
IL-4 |
|
IL-2 |
IL-23 |
IL-6 |
|
IL-3 |
TNF-α |
IL-10 |
|
IL-4 |
|
IL-17A |
|
IL-5 |
|
TNF-α |
檢測簡圖
疑問解答
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問題 |
造成原因 |
解決方法 |
|
標曲不好 |
移液量不準確 |
檢查移液器，按時校準，仔細操作，充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
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稀釋方法不恰當 |
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顯色值偏低 |
孵育時間太短 |
給予足夠的孵育時間，樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
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移液量不足或稀釋不當 |
校準移液器和規(guī)范操作 |
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CV偏高 |
酶標板清洗不當 |
使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機，檢查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
準備新鮮洗液 |
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靈敏度較低 |
試劑盒儲存不當 |
按照產品組分表進行保存。 |
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