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      Alkaline Phosphatase Stain Kit堿性磷酸酶染色試劑盒

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      產(chǎn)品說(shuō)明書

      FAQ

      COA

      已發(fā)表文獻(xiàn)

      產(chǎn)品描述

      性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)是一類水解酶,其通過(guò)水解磷酸單酯的作用將底物分子上的磷酸基團(tuán)除去掉并生成磷酸根離子和自由的羥基。在堿性條件下以核苷酸、蛋白質(zhì)和生物堿等作為去磷酸化作用的底物。該酶是一組同功酶的統(tǒng)稱,如小牛腸堿性磷酸酶(Calf Intestinal AlkalinePhosphatase, CIAP/CIP)被廣泛用于抗體標(biāo)記并最終用于蛋白和核酸的檢測(cè)等,也常用于DNA或RNA 5’和3’末端的去磷酸化(去單磷酸化)等。

      BCIP/NBT是堿性磷酸酶的常用底物,在堿性磷酸酶的作用下BCIP會(huì)被水解,水解產(chǎn)物會(huì)和NBT發(fā)生反應(yīng)形成不溶性的深藍(lán)色至藍(lán)紫色的NBT-formazan物質(zhì)。

      本試劑盒可用于細(xì)胞或組織的堿性磷酸酶顯色,包括誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞iPS的鑒定,也可以用于結(jié)合有堿性磷酸酶的膜的Western顯色檢測(cè)等。

      產(chǎn)品組分

      組分編號(hào)

      組分名稱

      包裝詳情

      40749-A

      堿性磷酸酶染色緩沖液

      100 mL

      40749-B

      堿性磷酸酶染色液BCIP(300×)

      350 µL

      40749-C

      堿性磷酸酶染色液NBT(150×)

      700 µL


      運(yùn)輸和保存方法
      冰袋運(yùn)輸。4℃保存,有效期1年,染色液BCIP和染色液NBT需避光保藏。


      注意事項(xiàng)

      1)本產(chǎn)品僅限科學(xué)研究。

      2)BCIP對(duì)人體有刺激性,NBT對(duì)人體有害,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。

      3)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

      4)本產(chǎn)品僅作科研用途!

      染色步驟

      1、用合適的洗滌液對(duì)于組織切片或細(xì)胞樣品或膜在與堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體或探針?lè)跤?,洗?-5次,每次3-5 min。對(duì)于檢測(cè)內(nèi)源性堿性磷酸酶的組織或細(xì)胞樣品,在固定后,也用合適的洗滌液洗滌3-5次,每次3-5 min。
      2、按照 緩沖液:染色液BCIP:染色液NBT=3 mL: 10 µL:20 µL的比例配制適量體積的AP染色工作液。

      3、在最后一次洗滌后去除洗滌液,加入適量AP染色工作液。
      4、室溫避光孵育5-30 min或更長(zhǎng)時(shí)間(最長(zhǎng)達(dá)24 h),直至顯色達(dá)到預(yù)期深淺效果。
      5、去除AP染色工作液,用蒸餾水洗滌1-2次即可終止顯色反應(yīng)。
      6、對(duì)于組織切片或細(xì)胞樣品,在顯色反應(yīng)終止后如有必要可用中性紅染色液(neutral red staining solution)染色觀察。對(duì)于膜樣品,顯色反應(yīng)終止后可至室溫晾干避光保存。

       

      400-6111-883