天然蛋白A(Protein A)是一種發(fā)現(xiàn)于金黃色葡萄球菌的細(xì)胞壁表面蛋白,天然蛋白G(Protein G)是一種分離自G型或C型鏈球菌屬的細(xì)胞表面蛋白,二者功能相似,主要通過與免疫球蛋白(Ig)的Fc區(qū)相互作用,可結(jié)合大多數(shù)哺乳動(dòng)物的IgG。然而兩者結(jié)合特異性上有所不同(詳細(xì)見附錄1,蛋白A,G和L對(duì)不同物種Ig的結(jié)合能力總表),如蛋白G對(duì)人IgG3,大鼠IgG2a,綿羊IgG1具有很高的親和力,但蛋白A對(duì)這些Ig結(jié)合力很弱。蛋白A,蛋白G常共價(jià)偶聯(lián)在固體載體如瓊脂糖珠或丙烯酸樹脂小珠上,直接用以做免疫沉淀(IP)或者免疫共沉淀(Co-IP)來進(jìn)行蛋白功能相關(guān)研究,或者直接裝在層析柱上來純化單克隆或者多克隆抗體。
本品在大腸桿菌中產(chǎn)生,重組蛋白A/G由7個(gè)IgG 結(jié)合結(jié)構(gòu)域 EDABC-C1C3組成,對(duì)應(yīng)于5個(gè)蛋白A的IgG結(jié)合區(qū)和2個(gè)蛋白G的IgG結(jié)構(gòu)域。重組蛋白A/G的結(jié)合能力比單獨(dú)的蛋白A或蛋白G更廣。重組蛋白A/G中細(xì)胞壁結(jié)合區(qū)、細(xì)胞膜結(jié)合區(qū)和白蛋白結(jié)合區(qū)已去除,減少了交叉反應(yīng)和非特異性結(jié)合,確保IgG的最大特異性結(jié)合。
產(chǎn)品性質(zhì)
來源 |
E.coli |
分子量 |
Approximately 47.8 kDa with a Cys on N-terminus, a single non-glycosylated polypeptide chain containing 430 amino acids. |
氨基酸序列 |
CNAAQHDEAQ QNAFYQVLNM PNLNADQRNG FIQSLKDDPS QSANVLGEAQ KLNDSQAPKA DAQQNNFNKD QQSAFYEILN MPNLNEAQRN GFIQSLKDDP SQSTNVLGEA KKLNESQAPK ADNNFNKEQQ NAFYEILNMP NLNEEQRNGF IQSLKDDPSQ SANLLSEAKK LNESQAPKAD NKFNKEQQNA FYEILHLPNL NEEQRNGFIQ SLKDDPSQSA NLLAEAKKLN DAQAPKADNK FNKEQQNAFY EILHLPNLTE EQRNGFIQSL KDDPSVSKEI LAEAKKLNDA QAPKEEDSLE GSGSGTYKLI LNGKTLKGET TTEAVDAATA EKVFKQYAND NGVDGEWTYD DATKTFTVTE KPEVIDASEL TPAVTTYKLV INGKTLKGET TTKAVDAETA EKAFKQYAND NGVDGVWTYD DATKTFTVTE |
280 nm 處1個(gè)單位DO的濃度 |
1.737 mg/ml |
外觀 |
無菌過濾的白色凍干粉末 |
標(biāo)簽 |
無 |
純度 |
> 96% by SDS-PAGE and HPLC analyses |
內(nèi)毒素水平 |
< 0.1 EU/μg of protein by the LAL method |
配方 |
無添加劑,凍干 |
復(fù)溶 |
蒸餾水或鹽水溶解 |
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存,一年有效期。建議第一次使用時(shí)分裝凍存,避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)
附錄1. 蛋白A、G和L對(duì)不同物種Ig的結(jié)合能力總表
Species |
Protein A |
Protein G |
Protein L |
Species |
Protein A |
Protein G |
Protein L |
||
Human |
IgG |
+++ |
+++ |
+++ |
Sheep |
IgG |
+ |
++ |
- |
IgG1 |
++++ |
++++ |
++++ |
IgG1 |
+ |
++ |
- |
||
IgG2 |
++++ |
++++ |
++++ |
IgG2 |
+++ |
+++ |
- |
||
IgG3 |
- |
+++ |
+++ |
Dog |
|
++ |
+ |
NT |
|
IgG4 |
++++ |
++++ |
++++ |
Pig |
|
+++ |
++ |
+++ |
|
IgA |
+ |
- |
+++ |
Rat |
IgG |
+ |
++ |
+++ |
|
IgA1 |
+ |
- |
+++ |
IgG1 |
- |
+ |
+++ |
||
IgA2 |
+ |
- |
+++ |
IgG2a |
- |
++++ |
+++ |
||
IgD |
- |
- |
+++ |
IgG2b |
- |
++ |
+++ |
||
IgE |
++ |
- |
+++ |
IgG2c |
++ |
++ |
+++ |
||
IgM |
+ |
- |
+++ |
IgG3 |
+ |
++ |
NT |
||
Rabbit |
IgG |
+++ |
+++ |
+ |
Mouse |
IgG |
++ |
++ |
+++ |
Cow |
IgG |
+ |
+++ |
- |
IgG1 |
+ |
++++ |
+++ |
|
IgG1 |
+ |
+++ |
- |
IgG2a |
++++ |
++++ |
+++ |
||
IgG2 |
+++ |
+++ |
- |
IgG2b |
+++ |
+++ |
+++ |
||
Cat |
IgG |
+++ |
+ |
NT |
IgG3 |
++ |
+++ |
+++ |
|
Horse |
IgG |
++ |
++++ |
NT |
IgM |
- |
- |
+++ |
|
Goat |
IgG |
+ |
++ |
- |
Chicken |
IgY |
- |
- |
- |
IgG1 |
+ |
+++ |
- |
Monkey |
IgG |
++++ |
++++ |
NT |
|
IgG2 |
+++ |
+++ |
- |
Hamster |
|
+ |
++ |
+++ |
|
Guinea-pig |
IgG1 |
++ |
+ |
NT |
Koala |
|
- |
+ |
NT |
IgG2 |
++ |
+ |
NT |
Llama |
|
- |
+ |
NT |
|
Strong binding (++), medium interaction (+), weak or no interaction (-), not tested (NT) . |
HB230208