蛋白G是一種細菌蛋白,來源于某些b-溶血性鏈球菌菌株的細胞壁。它以高親和力結合來自各種物種的各種類別和亞類的免疫球蛋白的 Fc部分。蛋白G與來自人類、小鼠和大鼠物種的所有IgG亞類結合。它還與豚鼠、兔、山羊、牛、綿羊和馬的總IgG結合。蛋白G優(yōu)先結合IgG的Fc部分,但也可以結合Fab區(qū)域,使其可用于純化 IgG的 F(ab')片段。由于它對許多哺乳動物免疫球蛋白的Fc區(qū)具有親和力,因此蛋白G被認為是生物化學和免疫學中的通用試劑。
本品在大腸桿菌中產生,含有蛋白G的3個IgG結合區(qū)。為確保IgG的最大特異性結合,重組蛋白G中細胞壁結合區(qū)、細胞膜結合區(qū)和白蛋白結合區(qū)已被去除,減少了交叉反應和非特異性結合。重組蛋白G廣泛用作與樹脂偶聯(lián)的配體,用作純化多克隆或單克隆IgG抗體。蛋白G結合各種人、小鼠和大鼠IgG亞類(例如,人IgG1、IgG2、IgG3、IgG4;小鼠IgG2a、IgG2b、IgG3;大鼠IgG2a、IgG2c)。它還與來自牛、山羊、綿羊和兔子的總IgG結合。(詳見附錄1)
產品性質
來源 |
E.coli |
分子量 |
Approximately 21.9 kDa with a Cys on N-terminus, a single non-glycosylated polypeptide chain containing 201 amino acids. But it migrates with an apparent molecular mass of 40 kDa in SDS-PAGE. |
氨基酸序列 |
CLPKTDTYKL ILNGKTLKGE TTTEAVDAAT AEKVFKQYAN DNGVDGEWTY DDATKTFTVT EKPEVIDASE LTPAVTTYKL VINGKTLKGE TTTEAVDAAT AEKVFKQYAN DNGVDGEWTY DDATKTFTVT EKPEVIDASE LTPAVTTYKL VINGKTLKGE TTTKAVDAET AEKAFKQYAN DNGVDGVWTY DDATKTFTVT E |
280 nm處1個單位DO的濃度 |
0.729 mg/ml |
外觀 |
無菌過濾的白色凍干粉末。 |
純度 |
> 96% by SDS-PAGE and HPLC analyses. |
內毒素水平 |
< 0.1 EU/μg of protein by the LAL method. |
配方 |
無添加劑,凍干 |
復溶 |
蒸餾水或鹽水溶解 |
運輸與保存方法
冰袋運輸。-20℃保存,一年有效期。建議第一次使用時分裝凍存,避免反復凍融。
注意事項
附錄1. 蛋白A、G和L對不同物種Ig的結合能力總表
Species |
Protein A |
Protein G |
Protein L |
Species |
Protein A |
Protein G |
Protein L |
||
Human |
IgG |
+++ |
+++ |
+++ |
Sheep |
IgG |
+ |
++ |
- |
IgG1 |
++++ |
++++ |
++++ |
IgG1 |
+ |
++ |
- |
||
IgG2 |
++++ |
++++ |
++++ |
IgG2 |
+++ |
+++ |
- |
||
IgG3 |
- |
+++ |
+++ |
Dog |
|
++ |
+ |
NT |
|
IgG4 |
++++ |
++++ |
++++ |
Pig |
|
+++ |
++ |
+++ |
|
IgA |
+ |
- |
+++ |
Rat |
IgG |
+ |
++ |
+++ |
|
IgA1 |
+ |
- |
+++ |
IgG1 |
- |
+ |
+++ |
||
IgA2 |
+ |
- |
+++ |
IgG2a |
- |
++++ |
+++ |
||
IgD |
- |
- |
+++ |
IgG2b |
- |
++ |
+++ |
||
IgE |
++ |
- |
+++ |
IgG2c |
++ |
++ |
+++ |
||
IgM |
+ |
- |
+++ |
IgG3 |
+ |
++ |
NT |
||
Rabbit |
IgG |
+++ |
+++ |
+ |
Mouse |
IgG |
++ |
++ |
+++ |
Cow |
IgG |
+ |
+++ |
- |
IgG1 |
+ |
++++ |
+++ |
|
IgG1 |
+ |
+++ |
- |
IgG2a |
++++ |
++++ |
+++ |
||
IgG2 |
+++ |
+++ |
- |
IgG2b |
+++ |
+++ |
+++ |
||
Cat |
IgG |
+++ |
+ |
NT |
IgG3 |
++ |
+++ |
+++ |
|
Horse |
IgG |
++ |
++++ |
NT |
IgM |
- |
- |
+++ |
|
Goat |
IgG |
+ |
++ |
- |
Chicken |
IgY |
- |
- |
- |
IgG1 |
+ |
+++ |
- |
Monkey |
IgG |
++++ |
++++ |
NT |
|
IgG2 |
+++ |
+++ |
- |
Hamster |
|
+ |
++ |
+++ |
|
Guinea-pig |
IgG1 |
++ |
+ |
NT |
Koala |
|
- |
+ |
NT |
IgG2 |
++ |
+ |
NT |
Llama |
|
- |
+ |
NT |
|
Strong binding (++), medium interaction (+), weak or no interaction (-), not tested (NT) . |
HB230110