產(chǎn)品簡(jiǎn)介

 

Cebrary® Intestinal Cancer Organoid Growth Medium（Human）腸癌類器官生長(zhǎng)培養(yǎng)基是一種無血清可應(yīng)用于細(xì)胞或組織來源的腸癌類器官的建立和長(zhǎng)期培養(yǎng)過程，在細(xì)胞外基質(zhì)存在的條件下，培養(yǎng)基所含特有組分及豐富的細(xì)胞因子能促使腸癌細(xì)胞迅速生長(zhǎng)成并形成腸癌類器官，類器官形成過程平穩(wěn)且迅速，同時(shí)保持較高的腸癌細(xì)胞特性和活力，為后續(xù)基于腸癌類器官的生理功能、疾病研究和精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)提供支持。

 

組分信息

 

組分編號(hào)	組分名稱	41427ES10	41427ES50	41427ES60	41427ES76
41427-A	Intestinal Cancer Organoid Growth Medium（Human）腸癌類器官生長(zhǎng)培養(yǎng)基	9 mL	45 mL	90 mL	450 mL
41427-B	Nutritional components 1（10×）營(yíng)養(yǎng)組分1（10×）	1 mL	5 mL	10 mL	50 mL

 

儲(chǔ)存條件

 

-25℃ ~ -15℃儲(chǔ)存，有效期1年；2-8℃儲(chǔ)存，有效期1月。

 

使用說明

 

產(chǎn)品應(yīng)用

無菌操作條件下配制腸癌類器官完全培養(yǎng)基。以下是準(zhǔn)備100 mL完全培養(yǎng)基操作流程，如所需量不同，可相應(yīng)調(diào)整用量。

1. 將營(yíng)養(yǎng)組分1室溫解凍或者2 - 8℃過夜緩融。避免反復(fù)凍融，現(xiàn)配現(xiàn)融；

2. 將基礎(chǔ)培養(yǎng)基90 mL冰箱取出恢復(fù)至室溫；

3. 將10 mL營(yíng)養(yǎng)組分1加入到基礎(chǔ)培養(yǎng)基內(nèi)，均勻混合；如暫不使用，短時(shí)2 - 8℃儲(chǔ)存。

4. 使用時(shí)可加入1%雙抗使用。

 

人源腸癌原代培養(yǎng)

1. 取材：標(biāo)本離體后，盡快取材。采用無菌器械，保證無菌環(huán)境，將腫瘤組織放入含有5 mL的原代組織保存液的15 mL離心管中，4℃轉(zhuǎn)運(yùn)。
2.  清洗：在生物安全柜中取出樣品管，去除組織保存液，加入適量冷的添加有雙抗的 PBS，反復(fù)清洗后，去除 PBS。
3. 重復(fù)清洗：重復(fù)第 2 步驟 3 次。
4. 組織處理：去除PBS緩沖液后，將組織塊移至10 cm含10 mL冷原代組織保存液的無菌培養(yǎng)皿中，用無菌眼科顯微剪將組織剪碎（直徑約0.5 mm-1 mm）。
5. 重復(fù)清洗：使用常溫PBS，重復(fù)清洗3次。
6. 收集組織碎片，加入組織消化液消化20 - 30 min，反復(fù)吹打后過70 μm篩網(wǎng)，收集腸癌細(xì)胞，如果細(xì)胞較少，可重復(fù)1次。
7. 紅細(xì)胞裂解：加入10 mL紅細(xì)胞裂解緩沖液，室溫下在翹板搖床上搖10 min。
8. 重復(fù)清洗：裂解完畢，使用常溫DMEM/F12，重復(fù)第2步驟3次。
9. 類器官種板：調(diào)整細(xì)胞密度為2 - 3×10⁶，與基質(zhì)膠1：1均勻混合，將細(xì)胞混懸液以40 - 60 μL每孔種在24孔板中，37℃放置15 - 30 min，加入預(yù)熱的類器官培養(yǎng)液，每個(gè)孔750 μL。
10. 類器官培養(yǎng)：將培養(yǎng)板放在37℃，CO²培養(yǎng)箱培養(yǎng)。每2天更換培養(yǎng)液。加入培養(yǎng)液時(shí)，吸頭朝向側(cè)壁，緩慢加入。
11. 類器官觀察：每天觀察類器官并拍照，了解初始類器官數(shù)量、增殖速度、形態(tài)、微生物污染情況等。

 

注意事項(xiàng)

 

1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

3. 產(chǎn)品的分裝、使用等操作需在無菌環(huán)境下進(jìn)行。

 

 

 

Ver.CN20250213