——高性能的PCR增強劑
為提高含高GC含量或連續(xù)多個A/T的復雜基因的PCR擴增效率及擴增特異性，科研人員通常會嘗試在PCR反應體系中添加增效劑。翌圣生物現(xiàn)為廣大科研人員提供質(zhì)量高、適用性廣的兩種PCR增效劑：甜菜堿與海藻糖。
甜菜堿
甜菜堿是一種從甜菜中發(fā)現(xiàn)的生物堿，是膽堿氧化代謝的終產(chǎn)物，參與甲硫氨酸（蛋氨酸）生物合成路徑，是非常重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)。翌圣生物提供的甜菜堿有兩類，鹽酸甜菜堿和甜菜堿水合物，后者分子式為C5H11NO2 H2O，是分子生物學級別，純度（TLC）≥99%，可用于分子生物學實驗。
產(chǎn)品介紹
翌圣生物是在工具酶及其反應輔助試劑方面極具經(jīng)驗，確保原裝進口高品質(zhì)甜菜堿，并大量現(xiàn)貨，可保證批次間產(chǎn)品的穩(wěn)定性。該產(chǎn)品可作為原料用于PCR、RT-PCR、qPCR等實驗反應優(yōu)化的添加劑成分，大大改善擴增效率和擴增特異性、改善逆轉(zhuǎn)錄效率等。
甜菜堿特點
1. 甜菜堿可幫助DNA聚合酶順利通過DNA某些復雜二級結(jié)構(gòu)，防止DNA聚合酶的從模板DNA中解離。DNA局部區(qū)域因含有多個復雜堿基（Py-G-C），會促使DNA聚合酶的停滯，最終導致DNA聚合酶停止有效延伸。而甜菜堿可提高DNA小溝中富含鳥嘌呤和胞嘧啶區(qū)域的鳥嘌呤和胞嘧啶的水合作用，影響DNA分子結(jié)構(gòu)，改變DNA靈活性，幫助DNA聚合酶沿著DNA模板延伸[1]。
2. 甜菜堿可消除變性溫度對堿基的依賴性。濃度依賴性降低高GC含量序列的Tm，并使PCR兩引物的Tm相接近，最終降低DNA Tm值[2]。
3. 高濃度的甜菜堿溶液可穩(wěn)定DNA-蛋白復合物。
4. 在逆轉(zhuǎn)錄溫度條件下，甜菜堿可減少RNA二級結(jié)構(gòu)的形成。在甜菜堿和海藻糖聯(lián)合用于逆轉(zhuǎn)錄實驗時，甜菜堿減少RNA分子內(nèi)復雜二級結(jié)構(gòu)的形成，降低RNA溶解溫度；海藻糖穩(wěn)定逆轉(zhuǎn)錄酶，保持逆轉(zhuǎn)錄酶活性。通過二者聯(lián)合，確保更長cDNA的合成長度[3]。
主要應用
1. 可應用于DNA的測序反應實驗中，提升含有重復序列(連續(xù)多個A或T)的測序精準性。
2. 提升長片段DNA的PCR成功率。
3. 適用于復雜模板的PCR擴增，如高GC含量DNA的PCR擴增。
4. 適用于某些粗糙模板的直接測序，如經(jīng)NaOH溶液裂解的細胞裂解物。
5. 適用于較長cDNA的逆轉(zhuǎn)錄反應。
6. 作為LAMP環(huán)介導等溫擴增的添加劑。
甜菜堿參數(shù)
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中文別名（Chinese Synonym） |
甜菜堿一水合物，一水甜菜堿，三甲基甘氨酸一水合物 |
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英文別名（English Synonym） |
Betaine monohydrate;(Carboxymethyl) trimethylammonium hydroxide monohydrate |
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CAS號（CAS NO.） |
590-47-6 |
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分子式（Formula） |
C5H11NO2 H2O |
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分子量（Molecular Weight） |
135.16g/mol |
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外觀（Appearance） |
晶體粉末 |
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純度（Purity） |
≥99% |
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溶解性（Solubility） |
溶于水，可配置成10%水溶液 |
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結(jié)構(gòu)式（Structure） |
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溶液配制
溶于水。濃度為10%水溶液，質(zhì)量體積比。溶液無色透明。
參考文獻
[1]. Mytelka DS,Chamberlin MJ. Analysis and suppression of DNA polymerase pauses associated with a trinucleotide consensus. Nucleic Acids Res.1996 Jul 15;24(14):2774-81.
[2]. Rees WA,Yager TD,Korte J,von Hippel PH. Betaine can eliminate the base pair composition dependence of DNA melting. Biochemistry.1993 Jan 12;32(1):137-44.
[3]. Spiess AN,Ivell R. A highly efficient method for long-chain cDNA synthesis using trehalose and betaine. Anal Biochem.2002 Feb 15;301(2):168-74.
相關(guān)鏈接
海藻糖在分子生物學實驗中的應用可參看：分子級別海藻糖（Trehalose）的特點及在分子實驗中的應用——高效的酶穩(wěn)定劑
訂購信息
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產(chǎn)品貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
價格（元） |
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60391ES60 |
100g |
286.00 |
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60391ES76 |
500g |
956.00 |
