----Anti-HA純化凝膠、純化磁珠、免疫磁珠
HA標(biāo)簽簡(jiǎn)介
HA標(biāo)簽是一種基于人流感病毒血凝素（Human influenza hemagglutinin）抗原的蛋白標(biāo)簽，其化學(xué)本質(zhì)為一段來自人流感病毒血凝素98~106號(hào)氨基酸的短氨基酸序列（YPYDVPDYA）。HA標(biāo)簽是在表達(dá)載體中的廣泛使用的表位標(biāo)簽。HA標(biāo)簽對(duì)外源靶蛋白的空間結(jié)構(gòu)影響小，容易構(gòu)建成標(biāo)簽蛋白融合到N端或者C端，其有利于蛋白質(zhì)的檢測(cè)、分離和純化。許多重組蛋白可以表達(dá)HA標(biāo)簽，因?yàn)樗粫?huì)干擾蛋白的生物活性或生物分布。但是，不建議將HA標(biāo)簽用于來源于凋亡細(xì)胞的蛋白，因?yàn)镠A標(biāo)簽會(huì)被Caspases-3和7切割，從而導(dǎo)致免疫反應(yīng)性喪失。
HA標(biāo)簽抗體是指能夠與重組蛋白上的標(biāo)簽（HA）特異性結(jié)合的抗體，可通過HA標(biāo)簽融合蛋白免疫宿主的方式得到。通過抗原-抗體相互作用的原理，特異性結(jié)合對(duì)應(yīng)的HA標(biāo)簽融合蛋白，應(yīng)用于檢測(cè)和純化各種商品化的表達(dá)載體的HA標(biāo)簽序列，來分析蛋白的表達(dá)含量及其功能。
翌圣HA標(biāo)簽抗體親和純化類產(chǎn)品，以高質(zhì)量的鼠源HA單克隆抗體為原料，通過共價(jià)偶聯(lián)的方式將其定向、高效的偶聯(lián)到瓊脂糖凝膠、瓊脂糖磁珠、納米磁珠表面，不僅降低了蛋白的非特異性結(jié)合、實(shí)現(xiàn)了介質(zhì)較高的抗體載量，同時(shí)也獲得了適用于不同純化要求的HA標(biāo)簽抗體純化產(chǎn)品，涵蓋HA標(biāo)簽抗體的純化凝膠、純化磁珠、免疫磁珠，方便使用手動(dòng)或自動(dòng)化方式純化HA標(biāo)簽蛋白、免疫沉淀實(shí)驗(yàn)。
表1. 純化凝膠、純化磁珠、免疫磁珠區(qū)別介紹
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純化凝膠 |
純化磁珠 |
免疫磁珠 |
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基質(zhì) |
瓊脂糖凝膠 |
瓊脂糖磁珠 |
硅基磁珠 |
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粒徑 |
45-165 µm |
30-100 µm |
200 nm |
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電鏡視野 |
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結(jié)合能力 |
天然的多孔結(jié)構(gòu)，載量最大，特異性稍差 |
具有瓊脂糖的結(jié)合能力，同時(shí)可以通過磁性分離 |
納米級(jí)磁珠提供超大比表面積，具有更多的結(jié)合位點(diǎn)，非特異性吸附率低 |
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計(jì)量單位 |
瓊脂糖凝膠和瓊脂糖磁珠因?yàn)楹写罅康乃郑娓珊鬅o法較為準(zhǔn)確的計(jì)算成品質(zhì)量濃度，因此成品按體積（mL）計(jì)算 |
磁珠是一種納米級(jí)別的微球，分散在溶液中，按質(zhì)量濃度計(jì)算，通過取一定體積的磁珠烘干，稱重，得到質(zhì)量濃度（mg/mL） |
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應(yīng)用建議 |
1、搭配重力柱小量蛋白純化 2、搭配C型空柱、YXK系列空柱，使用蛋白純化儀可以用于工業(yè)大規(guī)模蛋白純化。 3、也可用于免疫沉淀（IP） |
1、搭配磁性分離快速便捷的進(jìn)行小量蛋白純化。 2、也可用于免疫沉淀（IP）或免疫共沉淀（Co-IP） |
1、特別適合用于免疫沉淀（IP）或免疫共沉淀（Co-IP） |
翌圣生物針對(duì)HA標(biāo)簽蛋白整體解決方案
翌圣HA標(biāo)簽抗體純化產(chǎn)品選購(gòu)指南
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產(chǎn)品系列 |
純化凝膠系列 |
純化磁珠系列 |
免疫磁珠系列 |
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產(chǎn)品貨號(hào) |
20586ES |
20786ES |
20566ES |
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產(chǎn)品名稱 |
Anti-HA Affinity Gel Anti-HA親和純化凝膠 |
Anti-HA MagAgarose Beads Anti-HA純化磁珠 |
Anti-HA MagBeads Anti-HA免疫磁珠 |
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配基 |
高質(zhì)量的鼠源HA單克隆抗體 |
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蛋白結(jié)合量 |
≥1.5 mgHA標(biāo)簽融合蛋白/mL凝膠 |
≥1.0 mg HA標(biāo)簽融合蛋白/mL磁珠 |
≥0.4 mg HA標(biāo)簽融合蛋白/mL磁珠 |
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基質(zhì) |
4%交聯(lián)的瓊脂糖凝膠 |
瓊脂糖磁珠 |
硅基磁珠 |
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平均粒徑 |
45-165 µm |
30-100 µm |
200 nm |
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凝膠/磁珠濃度 |
本產(chǎn)品規(guī)格與實(shí)際凝膠體積一致，凝膠含量為50% |
本產(chǎn)品規(guī)格與純化磁珠混懸液總體積一致，磁珠含量為 20% |
本產(chǎn)品規(guī)格與免疫磁珠混懸液總體積一致，磁珠濃度為10 mg/mL |
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優(yōu)勢(shì) |
載量高，非特異性結(jié)合低 |
載量高，配套磁力架使用方便 |
高純度，高載量，高特異性，配套磁力架使用方便 |
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推薦應(yīng)用 |
1、任意規(guī)模標(biāo)簽融合蛋白純化2、免疫沉淀（IP） |
1、搭配磁性分離快速便捷的進(jìn)行小量蛋白純化。 2、也可用于免疫沉淀（IP）或免疫共沉淀（Co-IP） |
免疫沉淀（IP）、免疫共沉淀（Co-IP） |
附：Anti-HA IP/Co-IP kit（Cat#20766ES）
Anti-HA IP/Co-IP kit (HA標(biāo)簽蛋白免疫（共）沉淀試劑盒)是一種通過高質(zhì)量的Anti-HA免疫磁珠，進(jìn)行HA標(biāo)簽融合蛋白免疫沉淀或免疫共沉淀的試劑盒。本試劑盒包含高質(zhì)量的Anti-HA免疫磁珠（Cat#20566ES）及經(jīng)過優(yōu)化驗(yàn)證的免疫沉淀必要試劑（IP裂解液、蛋白酶抑制劑，上樣緩沖液，平衡、洗脫、中和緩沖液），每個(gè)反應(yīng)使用25 uL磁珠，本試劑盒所含試劑足夠完成40個(gè)反應(yīng)。
產(chǎn)品性能
1、下圖中箭頭所示為目的標(biāo)簽蛋白，磁珠直接煮沸。
圖1. Anti-HA純化磁珠純化HA標(biāo)簽蛋白效果圖
圖2. Anti-HA免疫磁珠純化HA標(biāo)簽蛋白效果圖
產(chǎn)品信息
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產(chǎn)品名稱 |
貨號(hào) |
規(guī)格 |
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Anti-HA Affinity Gel Anti-HA親和純化凝膠 |
1 mL/5 mL/ 25 mL |
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Anti-HA MagAgarose Beads Anti-HA純化磁珠 |
1 mL/5 mL |
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Anti-HA MagBeads Anti-HA免疫磁珠 |
1 mL/5 mL |
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Anti-HA IP/Co-IP Kit HA標(biāo)簽蛋白免疫(共)沉淀試劑盒 |
40T |
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HA-Tag,Mouse mAb 小鼠抗HA-Tag單克隆抗體 |
20 μL/100 μL |
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HRP-conjugated HA-Tag,Mouse mAb 小鼠抗HA-Tag單克隆抗體,HRP標(biāo)記 |
20 μL/100 μL |
