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      耐dUTP高保真酶,助力DNA甲基化測(cè)序

      DNA聚合酶是PCR反應(yīng)的核心組分,廣泛應(yīng)用于生物及醫(yī)學(xué)研究等領(lǐng)域。對(duì)于普通PCR,常規(guī)熱穩(wěn)定DNA聚合酶(如Taq DNA聚合酶)即可滿足需求。但對(duì)于高通量測(cè)序,擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性非常關(guān)鍵,優(yōu)選高保真酶進(jìn)行擴(kuò)增。

       

      DNA甲基化測(cè)序是研究生物體內(nèi)基因調(diào)控的重要技術(shù)手段,越來(lái)越多地應(yīng)用于腫瘤早篩、診斷等技術(shù)中。全基因組重亞硫酸氫鹽測(cè)序(WGBS)是甲基化檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn),在WGBS文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程中,樣本DNA經(jīng)重亞硫酸氫鹽處理后,非甲基化的胞嘧啶(C)會(huì)轉(zhuǎn)化為尿嘧啶(U),甲基化的C則保持不變。在后續(xù)PCR擴(kuò)增中U會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)樾叵汆奏ぃ═),但常規(guī)高保真酶不能以含有dUTP的DNA作為擴(kuò)增模板,因此需要經(jīng)過(guò)特殊改造耐受dUTP,從而應(yīng)用到甲基化文庫(kù)構(gòu)建或者定點(diǎn)突變等技術(shù)中。
       
      圖1. WGBS建庫(kù)的兩種技術(shù)路線[1]
       

       

      Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase是翌圣經(jīng)過(guò)定向改造,針對(duì)含尿嘧啶(U)模板推出的一款高保真DNA聚合酶,具備優(yōu)良的擴(kuò)增性能。產(chǎn)品本身不僅具備高擴(kuò)增效率、高靈敏度和高特異性,而且酶本身各項(xiàng)殘留均很低,滿足各種模板類型的擴(kuò)增需求。

       

      性能展示

      01 高擴(kuò)增產(chǎn)量:與進(jìn)口品牌K*產(chǎn)量相當(dāng)

       圖3. A:分別使用翌圣Yeasen(橙)、和品牌K*(藍(lán))、N*(綠)、V*(灰)在100ng Bisulfite 處理后DNA起始量實(shí)驗(yàn)條件下建庫(kù),建庫(kù)純化后文庫(kù)產(chǎn)量高于其它品牌。    
            
      B: 分別使用翌圣Yeasen(橙)、和品牌K*(藍(lán))、N*(綠)、V*(灰)在100ng λDNA起始量實(shí)驗(yàn)條件下建庫(kù),建庫(kù)純化后文庫(kù)產(chǎn)量與品牌K*相當(dāng),高于品牌N*以及V*。

       

      02 無(wú)切口酶殘留

       
      圖4. 切口酶殘留結(jié)果:跑膠結(jié)果顯示Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase與陰性對(duì)照(C)一致,無(wú)切口酶殘留。

       

       

      產(chǎn)品訂購(gòu)

      產(chǎn)品定位

      產(chǎn)品名稱

      產(chǎn)品貨號(hào)

      dUTP擴(kuò)增酶

      Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase (1 U/μL)

      10145ES

      高濃度耐dUTP擴(kuò)增酶

      Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase (3 U/μL)

      Hieff Canace® U+高保真DNA聚合酶 (3 U/μL)

      14384ES

      高效率TdT末端轉(zhuǎn)移酶(帶buffer

      Terminal Deoxynucleotidyl Transferase

      TdT末端轉(zhuǎn)移酶

      10302ES

      高效率TdT末端轉(zhuǎn)移酶(不含buffer

      Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (20U/μL, without buffer)

      TdT 末端轉(zhuǎn)移酶

      14456ES

      高效率連接酶

      E. coliDNA ligase (60 U/μL)

      14955ES

      DNA純化/分選磁珠

      Hieff NGS® DNA Selection Beads

      12601ES

      文庫(kù)定量試劑盒

      dsDNA HS Assay Kit

      12640ES

      甲基化建庫(kù)試劑盒

      Hieff NGS® Methyl-seq DNA library Prep kit for Illumina

      甲基化DNA建庫(kù)試劑盒

      12211ES

      400-6111-883