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      Hieff NGS? DNA Selection Beads 分選磁珠(完美替代AMPure XPBeads)
       
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      產(chǎn)品說明書
                  
      FAQ
                  
      COA
                  
      已發(fā)表文獻
                  
       
      產(chǎn)品信息
      


      
	
		
      
			
			
      產(chǎn)品名稱
      
			      		
			
			
      產(chǎn)品編號
      
			      		
			
			
      規(guī)格
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      Hieff NGS® DNA Selection Beads DNA分選磁珠
      
			      		
			
			
      12601ES03
      
			      		
			
			
      1 mL
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      12601ES08
      
			      		
			
			
      5 mL
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      12601ES56
      
			      		
			
			
      60 mL
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      12601ES75
      
			      		
			
			
      450 mL
      
			      		
		
      
	      

      


      產(chǎn)品描述
      


      Hieff NGS® DNA Selection Beads基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization)原理，配合精心優(yōu)化過的緩沖體系，可用于二代測序文庫構(gòu)建過程中的DNA片段分選、純化。本產(chǎn)品可適用于各品牌的DNA、RNA建庫試劑盒，和目前廣泛使用的AMPure XP Beads使用方式相同，片段回收效率和文庫大小分布均與AMPure XP Beads高度吻合。
      


       
      


      運輸與保存方法
      


      冰袋運輸。2 ~ 8℃保存，效期18個月。避免冷凍！
      


       
      


      注意事項
      


      1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
      


      2）磁珠使用前須在室溫平衡至少30 min。
      


      3）80%乙醇需現(xiàn)用現(xiàn)配，否則將影響回收效率。
      


      4）進行長度分選時，初始樣品體積需≥100μL，不足時請用超純水補齊。樣品體積太小，將導(dǎo)致移液誤差增大，進而影響分選的準確性。
      


      5) 本產(chǎn)品僅用作科研用途！
      


       
      


      使用方法 
      


      1. 準備工作
      


      將磁珠由冰箱中取出，室溫平衡至少30 min。配制80%乙醇。
      


      2. 長度分選（雙輪法）
      


      長度分選操作流程如圖1所示，具體操作如下。
      


      


       
      


      圖1雙輪分選操作流程
      


      1）請渦旋振蕩或充分顛倒磁珠以保證混勻。
      


      2）根據(jù)要求，參考表1向DNA溶液中加入第一輪分選磁珠，渦旋混勻或移液器吹打10次混勻。
      


      3）室溫孵育5 min。
      


      4）將離心管短暫離心并置于磁力架中，待溶液澄清后（約5 min），小心轉(zhuǎn)移上清到干凈的離心管中。
      


      注意：轉(zhuǎn)移上清時，請殘留2 μL液體于管底，切勿全部吸出上清，避免吸到磁珠并影響分選效果。
      


      舉例：當(dāng)初始體積為100 μL，第一輪使用0.8×比例，即加入80 μL磁珠，推薦吸出178 μL的上清。
      


      5）參考表1向上清中加入第二輪分選磁珠。
      


      6）渦旋混勻或移液器吹打10次混勻，室溫靜置5 min。
      


      7）將離心管短暫離心并置于磁力架中，待溶液澄清后（約5 min），小心移除上清。
      


      8）保持離心管始終處于磁力架中，加入200 μL新鮮配制的80%乙醇漂洗磁珠，室溫孵育30 s，小心移除上清。
      


      9）重復(fù)步驟8。
      


      10）保持離心管始終處于磁力架中，開蓋干燥磁珠至剛剛出現(xiàn)龜裂（約5 min）。
      


      注意：切記磁珠不要干燥時間太久，磁珠干燥過度將影響純化效果。
      


      11）將離心管從磁力架中取出，加入適量ddH2O（≥20 μL），渦旋振蕩或使用移液器輕輕吹打充分混勻，室溫孵育5 min。
      


      12）將離心管短暫離心并置于磁力架中分離磁珠和液體。待溶液澄清后（約5 min），小心吸取上清至干凈的管中，即完成分選。
      


      3. DNA片段分選參考條件
      


      通過超聲法將小牛胸腺DNA進行片段化，制備100-1000 bp的Smear片段，根據(jù)表1進行雙輪分選。結(jié)果使用Agilent 2100 Bioanalyzer進行分析（圖2）。
      


      表1磁珠文庫分選推薦比例
      


      
	
		
      
			
			
      DNA片段大小
      
			      		
			
			
      250-350 bp
      
			      		
			
			
      320-420 bp
      
			      		
			
			
      450-550 bp
      
			      		
			
			
      550-700 bp
      
			      		
			
			
      700-900 bp
      
			      		
			
			
      800-1000 bp
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      第一輪體積比（Beads:DNA）
      
			      		
			
			
      0.80×
      
			      		
			
			
      0.70×
      
			      		
			
			
      0.60×
      
			      		
			
			
      0.55×
      
			      		
			
			
      0.50×
      
			      		
			
			
      0.45×
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      第二輪體積比（Beads:DNA）
      
			      		
			
			
      0.20×
      
			      		
			
			
      0.20×
      
			      		
			
			
      0.20×
      
			      		
			
			
      0.15×
      
			      		
			
			
      0.15×
      
			      		
			
			
      0.15×
      
			      		
		
      
	      

      


      注：表中“×”表示樣品DNA體積。如文庫插入片段長度為250 bp，樣品DNA體積為100mL，則第一輪分選磁珠使用體積為0.80×100 mL=80 mL；第二輪分選磁珠使用體積為0.20×100 mL=20 mL。
      


      


      圖2 Agilent 2100 high sensitivity DNA chip electopherogram
      


      Smear fragments溶于ddH2O，使用0.80×/0.20×至0.45×/0.15×磁珠進行片段分選
      


       
      


      HB240401
      


       
      

         
       
       
       
       
       
       
       
      400-6111-883