精品推薦|僅需5min！高效完成反轉(zhuǎn)錄實驗
Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit是基于Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit開發(fā)的快速逆轉(zhuǎn)錄試劑盒，適用于PCR擴增以及RT-qPCR實驗。與Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit相比，具有穩(wěn)定的檢出率、特異性、產(chǎn)量保證，且反轉(zhuǎn)錄總時長最快可低于6分鐘，大大縮短了實驗時間。
Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit
※快速反轉(zhuǎn)：最快5分鐘左右即可完成第一鏈cDNA合成；
※檢出率高：10 pg-1 ug的RNA檢出率；
※高效合成：合成效率媲美進口，最長可合成14kb大小的片段；
※應用廣泛：可用于下游PCR或qPCR，亦可調(diào)整引物保證small RNA等樣本的反轉(zhuǎn)錄；
※示蹤便利：示蹤版包含無干擾、可視化藍色示蹤染料，提醒加樣進度；
※穩(wěn)定性好：試劑盒可4℃存放14天，反轉(zhuǎn)產(chǎn)物可37℃保存7天，反復凍融50次。
圖. 以293T細胞總RNA為模板，使用11149ES進行逆轉(zhuǎn)錄，得到的cDNA 進行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示，不同反轉(zhuǎn)錄時間處理的Ct值差值在0.2之內(nèi)。說明產(chǎn)品可在5分鐘內(nèi)完成反轉(zhuǎn)錄，反轉(zhuǎn)效果和長時間反轉(zhuǎn)效果持平。
圖. 以293T細胞總RNA為模板，使用11149ES進行逆轉(zhuǎn)錄，得到的cDNA 進行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示，RNA 投入量為10 pg-1 μg時，11149ES均可反轉(zhuǎn)成功，保證定量結(jié)果。
圖. 以293T細胞總RNA為模板，使用11149ES進行反轉(zhuǎn)錄，將得到的cDNA進行PCR檢測。結(jié)果顯示，11149ES能夠滿足合成1 kb-14 kb長度的cDNA, 后續(xù)PCR有一定的試用場景。若需要直接反轉(zhuǎn)出10kb以上的片段，建議延長反轉(zhuǎn)錄時間至20-30分鐘，以保證最終片段的獲取。
圖. 測試顯示，加入一定量的示蹤劑成分，未影響產(chǎn)品的反轉(zhuǎn)錄效率，Ct值、熔解曲線峰值和TM值未受到負面影響。
圖. 以293T細胞總RNA為模板，使用-20℃、4℃、25℃、37℃下分別儲存1、3、5、7天的11149ES進行逆轉(zhuǎn)錄，對得到的cDNA 進行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示，不同溫度不同時間存放的試劑盒定量結(jié)果的△Ct均在0.3范圍內(nèi)（△Ct于±0.5以內(nèi)，認為兩者差異可忽略不計），具有良好的穩(wěn)定性。
圖. 以293T細胞總RNA為模板，使用11149ES、進口A品牌進行逆轉(zhuǎn)錄，其中11149ES不進行g(shù)DNA去除步驟，將得到的cDNA 進行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示，進口A品牌反轉(zhuǎn)時間為13分鐘， 11149ES反轉(zhuǎn)時間為5分鐘，不同產(chǎn)物定量顯示，11149ES的Ct更小或者接近進口競品，說明11149ES 5分鐘反轉(zhuǎn)效率優(yōu)于或近似進口A品牌的反轉(zhuǎn)錄效率。
圖. 以293T細胞總RNA為模板，使用11149ES、進口B品牌進行逆轉(zhuǎn)錄，其中11149ES不進行g(shù)DNA去除步驟，得到的cDNA 進行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示，進口B品牌反轉(zhuǎn)時間為20分鐘，11149ES反轉(zhuǎn)時間為5分鐘，不同量底物定量顯示，11149ES的Ct更小或者接近進口B品牌，說明11149ES 5分鐘反轉(zhuǎn)效率優(yōu)于或近似進口B品牌的反轉(zhuǎn)錄效率。
樣本來源：菊花葉片
客戶評價：與某進口品牌效果相似，擴增常規(guī)大小的片段效果不錯。
樣本來源：果*葉片
客戶評價：藍色很好看
樣本來源：水稻
客戶評價：與其他反轉(zhuǎn)錄試劑盒相比，節(jié)省加樣時間，節(jié)省反轉(zhuǎn)錄反應時間（其他試劑盒需要15+2 min，本試劑盒只需5 min），后續(xù)基因克隆DNA電泳結(jié)果證明，本試劑盒反轉(zhuǎn)效率更高，條帶更亮，所以會更節(jié)省PCR使用試劑，節(jié)省成本。
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方法 |
分類 |
產(chǎn)品名稱 |
貨號 |
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qPCR染料法 |
高靈敏通用型定量預混液(染料法) |
Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Master Mix |
11184ES |
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超高性價比定量預混液 (染料法)，已發(fā)文章累計IF達到5000+ |
Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) |
11201ES |
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Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox) |
11202ES |
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Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox) |
11203ES |
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高靈敏型qPCR預混液（染料法） |
Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) |
11198ES |
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Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox) |
11199ES |
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Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox) |
11200ES |
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miRNA qPCR加A法 |
Hieff® miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix（加A法） |
11171ES |
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miRNA qPCR莖環(huán)法 |
Hieff® miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix（莖環(huán)法） |
11170ES |
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RNA一步法RT-qPCR（染料法） |
Hifair® III One Step RT-qPCR SYBR Green Kit |
11143ES |
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細胞直接RT-qPCR（染料法） |
Hieff® Fast Cell Direct SYBR Green RT-qPCR Kit |
11172ES |
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反轉(zhuǎn)錄試劑 |
5 min快速反轉(zhuǎn)，最長可滿足14 kb cDNA合成，含gDNA去除(下游應用PCR/qPCR)New |
Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit |
11149ES |
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Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit（No Dye） |
11150ES |
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15 min一步完成gDNA去除與反轉(zhuǎn)錄(下游應用qPCR) |
Hifair® V one-step RT-gDNA digestion SuperMix for qPCR |
11142ES |
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高質(zhì)量第一鏈cDNA合成預混液，含gDNA去除(下游應用qPCR)Hot |
Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) |
11141ES |
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最長可滿足19.8 kb cDNA合成試劑盒，含gDNA去除(下游應用PCR/qPCR) |
Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA digester plus) |
11139ES |
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常規(guī)30 min反轉(zhuǎn)預混液,含gDNA去除（下游應用qPCR） |
Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) |
11123ES |
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miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒（加A法） |
Hifair® miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit （加A法） |
11148ES |
