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      Exonuclease I:特異性去除單鏈DNA,PCR引物去除的最佳選擇

      注:如果您是想查詢核酸外切酶ⅢExonuclease III),可點(diǎn)擊鏈接獲取產(chǎn)品應(yīng)用詳情或通過(guò)下方鏈接直接訂購(gòu)(http://www.vaaedu.com/products/detail/4846)。

       

       

      Exonuclease I 是什么?

      核酸外切酶I(Exonuclease I)是一種對(duì)變性或單鏈脫氧核糖核酸具有高度選擇性的核酸外切酶,作用時(shí),Exonuclease I從單鏈聚脫氧核糖核苷酸的3 羥基端開(kāi)始攻擊,隨后逐步釋放出脫氧核糖核苷5 ' -單磷酸鹽,但末端二核苷酸會(huì)保持完整,對(duì)雙鏈DNA或RNA無(wú)活性。

       

      圖1. Exonuclease I降解單鏈DNA示意圖

       

      Exonuclease I 的作用

      1.常用于在Sanger測(cè)序或SNP分析之前去除PCR反應(yīng)中的單鏈引物(了解詳情);

      2.去除巢式PCR中的單鏈引物;

      3.PCR產(chǎn)物酶法純化(了解詳情);

      4.從核酸混合物中去除含有3'羥基末端的單鏈DNA等

       

       

      翌圣Exonuclease I產(chǎn)品介紹

      翌圣的Exonuclease I(Cat#14535ES)由分子酶改造平臺(tái)——ZymeEditor™重組表達(dá)而來(lái),可高效消化單鏈DNA,嚴(yán)格質(zhì)控,無(wú)核酸外切酶(雙鏈)、核酸內(nèi)切酶、RNase殘留,酶性能穩(wěn)定,效期長(zhǎng)達(dá)2年,只需80℃處理15 min即可使酶失活,簡(jiǎn)化了您的實(shí)驗(yàn)流程,適用于各種PCR反應(yīng)后引物的去除及從核酸混合物中去除含有3'羥基末端的單鏈DNA。

       

      01

      單鏈DNA消化能力與品牌N*一致

      20 μL反應(yīng)體系中加入終濃度為15 pmol/μL的單鏈DNA底物,分別使用不同投入量(0.63、1.25、2.5、5、10、20 U)的翌圣及品牌N*的Exonuclease I在37℃下孵育15 min,80℃熱失活15 min,聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)單鏈DNA降解情況。結(jié)果顯示翌圣的Exonuclease I消化單鏈DNA的能力與品牌N*一致。

       

      圖2. 翌圣及品牌N*對(duì)單鏈DNA的消化能力

       

      02

      無(wú)核酸內(nèi)切酶殘留

      將500 ng底物DNA與100 U的Exonuclease I在37℃下孵育4 h,瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA條帶不發(fā)生變化,表明Exonuclease I無(wú)核酸內(nèi)切酶殘留。

       

      圖3. 核酸內(nèi)切酶殘留檢測(cè)

       

      03

      無(wú)RNase殘留

      將底物RNA與20 U的Exonuclease I在37℃下孵育4 h,瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)RNA條帶不發(fā)生變化,表明Exonuclease I無(wú)RNase殘留。

       

      圖4. RNase殘留檢測(cè)

       

      產(chǎn)品推薦

      定位

      產(chǎn)品名稱

      產(chǎn)品貨號(hào)

      PCR產(chǎn)物純化(核酸外切酶I+堿性磷酸酶)

       

       

      Exonuclease I (20 U/μL)

      14535ES

      Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP)

      10322ES

      高保真PCR預(yù)混液

      2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye)

      10164ES

      瓊脂糖

      Agarose

      10208ES

      核酸染料

      YeaRed Nucleic Acid Gel Stain(10,000× in Water)

      10202ES

      DNA Marker

      GoldBand系列marker

      10501ES-10518ES

      RPA擴(kuò)增中熒光探針的降解、單鏈特異性探針的制備、制備用于雙脫氧測(cè)序的單鏈底物

      核酸外切酶-Exonuclease III

      14525ES

       

      400-6111-883