膽固醇是一種必需的脂類,它的合成需要消耗大量的營(yíng)養(yǎng)和能量。哺乳動(dòng)物在進(jìn)食后會(huì)上調(diào)膽固醇的合成,而禁食后會(huì)抑制合成,但其中的調(diào)控機(jī)制一直不清楚。
2020年11月11日,武漢大學(xué)生命科學(xué)院宋保亮團(tuán)隊(duì)在國(guó)際學(xué)術(shù)期刊Nature(IF:43)發(fā)表題為:Feeding induces cholesterol biosynthesis via the mTORC1–Usp20–HMGCR axis的研究論文,揭示了膽固醇合成的調(diào)控機(jī)制。

值得一提的是,該團(tuán)隊(duì)選擇了翌圣qPCR Mix(Cat NO.11201ES)用于相關(guān)基因的qRT-PCR分析。以下截圖來自原文:


圖1. 禁食和進(jìn)食后Hmgcr、Fdft1、Lss、Dhcr24基因的相對(duì)表達(dá)(部分?jǐn)?shù)據(jù))
下面給大家介紹下幾款相關(guān)的翌圣qPCR產(chǎn)品。

強(qiáng)烈給大家推薦Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix(Cat NO. 11184ES), 該產(chǎn)品具有全平臺(tái)通用、靈敏度高、檢出率高和特異性好等特點(diǎn)。
1、全平臺(tái)通用:適用于所有qPCR機(jī)型

圖2. Hieff UNICON® Universal Blue 預(yù)混液可實(shí)現(xiàn)全平臺(tái)通用。針對(duì)不同儀器平臺(tái),與T品牌對(duì)比,Hieff UNICON® Universal Blue 預(yù)混液Ct值起峰更加靠前。以2µl的質(zhì)粒10倍梯度稀釋液為模板,擴(kuò)增IL23R基因。

圖3.Hieff UNICON® Universal Blue 預(yù)混液可有效檢測(cè)7個(gè)數(shù)量級(jí)范圍的模板量,擴(kuò)增效率高,可在寬廣的線性范圍內(nèi)獲得良好的線性關(guān)系。以2µl的106-100拷貝的質(zhì)粒為模板,擴(kuò)增人IL23R基因。
3、檢出率和特異性良好:廣泛適用于30-70%GC含量的擴(kuò)增子

圖4.Hieff UNICON® Universal Blue預(yù)混液廣泛適用于30-70%GC含量的擴(kuò)增子,保證了極高的特異性檢出率。以2µl的293T cDNA為模板,利用Primer5軟件設(shè)計(jì)1000對(duì)長(zhǎng)度為200 bp擴(kuò)增子(GC%含量30%-70%)的引物,隨機(jī)擴(kuò)增其中的27個(gè)擴(kuò)增子。
4、分辨率高:可精準(zhǔn)分辨2倍模板濃度差異

圖5.Hieff UNICON® Universal Blue 預(yù)混液可精準(zhǔn)區(qū)分2倍模板濃度差異。以2µl的293T cDNA原液的2倍梯度稀釋液為模板,擴(kuò)增GAPDH基因。
5、復(fù)孔重復(fù)性好:90個(gè)復(fù)孔
圖6. Hieff UNICON® Universal Blue預(yù)混液具備良好的重復(fù)性,90個(gè)復(fù)孔的擴(kuò)增曲線高度重合,Ct值標(biāo)準(zhǔn)偏差<0.2。以1µl的293T cDNA為模板,擴(kuò)增GAPDH基因。
6、良好的穩(wěn)定性:預(yù)混液反復(fù)凍融50次不影響擴(kuò)增性能

圖7.Hieff UNICON® Universal Blue預(yù)混液反復(fù)凍融50次,擴(kuò)增性能無(wú)變化。以1µl的293T cDNA為模板,使用不同凍融次數(shù)的預(yù)混液,擴(kuò)增C2orf68基因。
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