產(chǎn)品簡(jiǎn)介

 

腸激酶酶切陽性底物是一種通過DDDDK（腸激酶識(shí)別切割位點(diǎn)）連接兩段特定蛋白序列所構(gòu)成的融合蛋白，其整體分子量約為64.6kDa。該產(chǎn)品通過大腸桿菌的高效重組表達(dá)，能夠被腸激酶特異性切割成兩個(gè)獨(dú)立的蛋白片段，其分子量分別約為27.9kDa和36.6kDa。本品作為腸激酶的底物，可以用于重組或天然腸激酶的半定量或定性酶活性檢測(cè)，從而為相關(guān)研究和應(yīng)用提供便利。

另外，翌圣亦提供不同類型的腸激酶，包括酵母表達(dá)重組牛腸激酶(His標(biāo)簽) （Cat#20395ES）、大腸桿菌表達(dá)重組牛腸激酶(不帶標(biāo)簽)（Cat#20401ES）

 

產(chǎn)品信息

 

貨號(hào)	20391ES03/11
規(guī)格	1 mg/4 mg

 

產(chǎn)品信息

 

來源（Source）	大腸桿菌重組表達(dá)
分子量（Molecular Weight）	理論值64.6 kDa
外觀（Appearance）	無菌液體
蛋白保存液（Storage Buffer）	50 mM Tris-HCl, 250 mM NaCl, 2 mM CaCl2, 50% Glycerol, pH8.0
蛋白濃度（Protein Concentration）	4 mg/mL
純度（Purity）	≥95%

 

儲(chǔ)存條件

 

-15~-25℃保存，有效期1年。

 

使用說明（應(yīng)用舉例）

 

1. 反應(yīng)體系：

腸激酶酶切陽性底物	50 μg
腸激酶*	1 U
緩沖體系 （20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 2 mM CaCl2, pH8.0）	up to 50 μL （最終反應(yīng)體系中蛋白濃度為0.1-1 mg/mL）

^*腸激酶單位酶活，可參考以下定義：

一個(gè)活性單位定義為25℃條件下，酶切12-16 h，在緩沖體系（20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 2 mM CaCl₂, pH 8.0）緩沖體系下，將50 μg帶有腸激酶酶切位點(diǎn)的融合蛋白（翌圣腸激酶酶切陽性底物，分子量約64.6 KDa，Cat#20391ES）切開95%所需要的酶量。

2. 反應(yīng)條件：充分混勻，25℃反應(yīng)16 h。

【注】重組腸激酶可使用25 mM Tris-HCl pH 8.0稀釋成每1 μL含0.1 U的溶液使用。

 

注意事項(xiàng)

 

1.不同來源或不同廠家的腸激酶酶活定義或有差異，所需底物的量也會(huì)不同，建議測(cè)試時(shí)，詳細(xì)閱讀腸激酶的說明書，先做投入量梯度，以最適量投入為宜。一般蛋白越小，切割效率越高，翌圣腸激酶酶切陽性底物（分子量約64.6 KDa，Cat#20391ES）為大分子蛋白，已驗(yàn)證翌圣酵母表達(dá)重組牛腸激酶(His標(biāo)簽) （Cat#20395ES）、大腸桿菌表達(dá)重組牛腸激酶(不帶標(biāo)簽)（Cat#20401ES）可1U切50 ug左右。

2. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20250109