產(chǎn)品簡介

 

本產(chǎn)品是一款以磁珠為純化介質(zhì)的外泌體microRNA提取試劑盒，專門用于提取外泌體中的microRNA，用于反轉(zhuǎn)錄、Northern Blot或測序等生物學(xué)實驗。

 

組分信息

 

組分編號	組分名稱	41224ES01
41224-A	microRNA提取裂解液	100 mL
41224-B	Wash Buffer C（去蛋白液）	30 mL
41224-C	Wash Buffer D（漂洗液）	9 mL
41224-D	Elution Buffer R（洗脫液）	10 mL
41224-E	Magnetic Bead（磁珠）	1.5 mL
41224-F	DNA去除柱（中）	30 套

 

儲存條件

 

常溫運輸，Magnetic Bead 4℃保存，其他試劑常溫保存，有限期2年。

 

使用說明

 

1. 自備耗材

異丙醇，無水乙醇，15 mL 離心管，RNase - free EP管和槍尖。

2. 使用說明

1）在Wash Buffer D（漂洗液）中加入21 mL無水乙醇，混勻，制備漂洗液。

2）按照外泌體溶液：microRNA裂解液（Lysis Buffer for microRNA）=1 : 3 的比例，在 1 mL外泌體溶液中加入 3 mL microRNA提取裂解液，混勻，室溫靜置 3 - 5 min。

3）將混合液體轉(zhuǎn)移至DNA去除柱內(nèi)，12, 000 g，4℃離心2 min，保留濾液，棄DNA去除柱。

4）向濾液中加入等體積的異丙醇（4 mL，使異丙醇的終濃度達到50%以上），顛倒混勻。

5）加入50 μL磁珠（吸取磁珠前先震蕩混勻），置于靜音混合器中4℃旋轉(zhuǎn)孵育30 min。

6）取出離心管，置于磁力架上，使磁珠聚集；或置于離心機中，3, 000 g，4℃離心2 min，沉淀磁珠。棄上清。

7）加入 0.5 - 1 mL Wash Buffer C（去蛋白液），輕微震蕩（Vortex，1,000 rpm）30 sec，洗滌磁珠，離心法或磁力法沉淀磁珠，棄上清。

8）加入 0.5 - 1 mL Wash Buffer D（漂洗液，注意是否加入乙醇）, 輕微震蕩（Vortex，1,000 rpm）30 sec，洗滌磁珠，離心法或磁力法沉淀磁珠，棄上清。

9）3, 000 g，4℃離心 2 min，沉淀磁珠，用移液槍移除殘液。

10）加入100 μL Elution Buffer R 或 RNase-free ddH₂O，震蕩（Vortex，2,000 rpm），30 sec，洗脫RNA。

11）置于磁力架上使磁珠聚集，或 7, 000 g，4℃離心 2 min，沉淀磁珠。轉(zhuǎn)移上清液至新的EP管中，即為microRNA溶液。

12）測定microRNA 濃度與純度，用于反轉(zhuǎn)錄或其它實驗，或保存于-80℃冰箱。

 

注意事項

 

1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

3. 請使用RNase - free的器具與耗材，如EP管，槍尖等。

4. 整個實驗過程需要低溫操作。

5. 請使用新鮮的外泌體樣品或-80℃保存的外泌體樣品，避免microRNA降解。

 

 

Ver.CN20241204