產品簡介

 

Cebrary® Pancreatic Growth Medium（Human）胰腺類器官生長培養(yǎng)基是一種無血清可應用于細胞或組織來源的胰腺類器官的建立和長期培養(yǎng)過程，在細胞外基質存在的條件下，培養(yǎng)基所含特有組分及豐富的細胞因子能促使胰腺細胞迅速生長成并形成胰腺類器官，類器官形成過程平穩(wěn)且迅速，同時保持較高的胰腺細胞特性和活力，為后續(xù)基于胰腺類器官的生理功能、疾病研究和精準醫(yī)學提供支持。

 

組分信息

 

組分名稱	41446ES60	41446ES76
Cebrary® Pancreatic Growth Medium（Human） 胰腺類器官生長培養(yǎng)基	100 mL	500 mL

 

儲存條件

 

2 ~ 8℃儲存，有效期3月。

 

使用說明

 

人源胰腺原代培養(yǎng)

1. 標本離體后，盡快取材。采用無菌器械，保證無菌環(huán)境，將腫瘤組織放入含有5 mL的原代組織保存液的15 mL離心管中，4℃轉運。
2. 在生物安全柜中取出樣品管，去除組織保存液，加入20 mL DPBS，搖晃清洗。更換DPBS，重復清洗至液體澄清。
3. 去除DPBS緩沖液后，將組織塊移至10 cm含10 mL冷原代組織保存液的無菌培養(yǎng)皿中，用無菌眼科顯微剪將組織剪碎（直徑約0.5 mm -1 mm）。
4. 將組織轉移至50 mL離心管內，加入20 mL DPBS，重復清洗至液體澄清。
5. 收集組織碎片，加入組織消化液消化20 - 30 min，加入3倍體積的DPBS終止消化，并使用移液器或者無菌一次性吸管吹打懸液至無明顯組織塊。
6. 反復吹打后過70 μm篩網，收集胰腺細胞。
7. 向組織消化的離心管內再次加入20 mL DPBS，吹打后將細胞懸液再次經100 μm細胞篩網過濾至離心管內。
8. 4℃，300 g，離心5 min，棄去上清，保留細胞沉淀。
9. 向沉淀中加入1 mL DPBS混勻，取合適體積混合液至細胞計數(shù)儀計數(shù)計算總細胞數(shù)量及活率。
10. DPBS定容至5 mL。4℃，300 g，離心5 min，離心后棄上清。 
11. 使用預冷的完全培養(yǎng)基將基質膠稀釋到70%。
12. 沉淀中加入稀釋的基質膠，并調節(jié)至每微升基質膠含100 - 1000細胞/細胞團。
13. 吹打使類器官與基質膠混合，類器官基質膠混合液以50 μL/孔滴加至24孔培養(yǎng)板孔中心。
14. 37℃、5% CO₂培養(yǎng)箱中孵育10 - 15 min。
15. 孵育結束每孔加入500 μL胰腺類器官培養(yǎng)基。
16. 37℃、5% CO₂培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)，每2 - 3天更換一次新鮮培養(yǎng)基。
17. 類器官觀察：每天觀察類器官并拍照，了解初始類器官數(shù)量、增殖速度、形態(tài)、微生物污染情況等。

 

注意事項

 

1. 本產品僅作科研用途。

2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

3. 產品的分裝、使用等操作需在無菌環(huán)境下進行。

 

 

Ver.CN20250415