本試劑盒配備了強(qiáng)力的裂解緩沖液，可以快速裂解樣品（如鼠尾、鼠耳、鼠趾、肌肉等），釋放基因組DNA。裂解液可以直接加入到PCR反應(yīng)體系中，無需精提純化，操作方便。此外，本試劑盒對(duì)樣品投入量要求低，5 mg小鼠組織或1-5 mm鼠尾即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。本試劑盒是小鼠組織直接PCR試劑盒(Cat#10185)的裂解組分，裂解后的產(chǎn)物與小鼠組織直接PCR試劑盒中2×Mouse Direct PCR Mix(10185-C)或2×Hieff® HotStart PCR Genotyping Master Mix（With Dye) (Cat#10108)搭配使用，擴(kuò)增效果更佳。

 

產(chǎn)品組分

編號(hào)	組分	產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格
		19697ES50（50 T）	19697ES70（200 T）
19697-A	Buffer ML	5 × 1 mL	1 × 20 mL
19697-B	Buffer MT	0.6 mL	2 × 1.25 mL

 

運(yùn)輸與保存

冰袋運(yùn)輸。

保存方法

1. 組分 A：2-8℃保存，有效期1年。若多次使用，請(qǐng)分裝凍存，避免交叉污染。

2. 組分 B：-20℃保存，避免反復(fù)凍融。有效期1年。

 

注意事項(xiàng)

1.為了避免樣本間交叉污染，每次取樣后都需要將取樣器材的刃口或與樣本直接接觸的部位浸入2%次氯酸鈉溶液中，反復(fù) 洗刷數(shù)次，然后用干凈的紙巾擦干殘余液體后再進(jìn)行使用。為了試驗(yàn)方便，也可準(zhǔn)備多個(gè)取樣器材，在使用完后進(jìn)行統(tǒng)一清洗，確保每一單獨(dú)樣本均使用的是無污染的取樣器材。

2. 建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織，若為長期冷凍組織，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解，影響 PCR 效率。

3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服、佩戴口罩、眼罩、一次性手套等采取防護(hù)性措施進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。

4. 本產(chǎn)品僅作科研用途！

 

操作方法

樣品基因組DNA釋放

1. 剪取5-10 mg 動(dòng)物組織或1-5 mm 鼠尾，置于 1.5 mL離心管中；

2. 在上述離心管中加入90 μL Buffer ML，輕輕渦旋使得樣品完全被裂解液浸潤，短暫離心；

3. 在恒溫孵育儀中設(shè)置 95℃孵育 15 min；

4. 加入10 μL Buffer MT，輕彈混勻，終止裂解;

5. 選做步驟：12000 rpm 離心2 min；

6. 將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管，4℃或-20℃保存或直接取上清用于后續(xù)PCR擴(kuò)增。

【注】：組織應(yīng)盡量剪碎，以便裂解反應(yīng)更順利進(jìn)行。

【注】 ：95℃孵育，一般15 min 即可滿足多數(shù)PCR 需求。若需要的DNA量較大或樣品較難裂解，可將時(shí)間延長至 30 min。 組織塊不需完全裂解，殘余的部分在后續(xù)離心步驟中可被除去。

 

 

HB210805