產品說明書
FAQ
COA
已發(fā)表文獻
Hieff Trans®通用型轉染試劑是基于最新的納米技術研發(fā)的一款多用途、便捷高效的脂質體轉染試劑，適用于DNA、RNA和寡核苷酸的轉染，對難轉染細胞也具有較高的轉染效率。其獨特的配方使其可直接加入培養(yǎng)基中，血清的存在不會影響轉染效率，這樣可以減少去除血清對細胞的損傷。轉染后不需要除去核酸-轉染試劑復合物或更換新鮮培養(yǎng)基，也可根據(jù)細胞營養(yǎng)狀態(tài)在4-6小時后更換新鮮培養(yǎng)基。
產品組分
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組分編號 |
組分名稱 |
規(guī)格/貨號 |
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40808ES02 |
40808ES03 |
40808ES03 |
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40808-A |
Universal-A溶液 |
0.5 mL |
1 mL |
5×1 mL |
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40808-B |
Universal-B溶液 |
0.5 mL |
1 mL |
5×1 mL |
運輸與保存方法
冰袋（wet ice）運輸。產品2-8ºC保存，一年有效。不可冷凍！
注意事項
1) 轉染操作時，以細胞融合度達70%-90%為佳，具體鋪板密度根據(jù)細胞情況酌情而定。
2) 制備轉染復合物時要求用無血清培養(yǎng)基稀釋DNA和轉染試劑。
3) 轉染的時候培養(yǎng)基中不能添加抗生素。
4) 使用高純度的DNA或RNA有助于獲得較高的轉染效率，質粒中的內毒素是轉染的大敵。
5) 2-8ºC保存，要注意避免多次反復長時間開蓋。
6) 初次使用應優(yōu)化核酸濃度和試劑量以得到最高的轉染效率。
7) 本產品僅作科研用途！
操作流程
1. DNA轉染
注：轉染試劑使用量受細胞類型及其他實驗條件影響，建議初次使用時設置梯度進行優(yōu)化最佳使用量。
1) 細胞鋪板，至轉染操作時，以細胞融合度達70%-90%為佳。
2) 按照下表使用Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋Universal-B溶液，輕輕混勻。
3) 使用Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋DNA，得到DNA預混液，然后添加Universal-A溶液，輕輕混勻，得到稀釋的DNA。
4) 將稀釋的DNA加入已稀釋的Universal-B溶液中(1:1比例)。
5) 室溫孵育5分鐘。
6) 將DNA-脂質體復合物逐滴加到細胞中，輕輕混勻。
7) 37℃，5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)48-96 h，直至進行基因表達分析。
2. siRNA轉染
轉染siRNA操作與DNA的轉染操作流程一樣，但在稀釋siRNA時則不需要加入Universal-A溶液(第3步)。
不同細胞培養(yǎng)容器轉染用量（僅供參考）：
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培養(yǎng)皿 |
96-well |
24-well |
6-well |
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貼壁細胞 |
1-4×104 |
0.5-2×105 |
0.25-1×106 |
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使用Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋Universal-B溶液，輕輕混勻。 |
Opti-MEM培養(yǎng)基 |
5 μL |
25 μL |
125 μL |
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Universal-B溶液 |
0.2 μL |
1 μL |
5 μL |
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使用Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋DNA，得到DNA預混液，然后添加Universal-A溶液，輕輕混勻，得到稀釋的DNA。 |
Opti-MEM培養(yǎng)基 |
5 μL |
25 μL |
125 μL |
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DNA (0.5–5 μg/μL) |
0.1 μg |
0.5 μg |
2.5 μg |
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Universal-A溶液(2 μL/μg DNA) |
0.2 μL |
1 μL |
5 μL |
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將稀釋的DNA加入已稀釋的Universal-B溶液中(1:1比例)。 |
稀釋的DNA |
5 μL |
25 μL |
125 μL |
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稀釋的Universal-B溶液 |
5 μL |
25 μL |
125 μL |
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室溫孵育5分鐘 |
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DNA-脂質體復合物形成 |
復合物成分（每孔） |
96-well |
24-well |
6-well |
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Opti-MEM培養(yǎng)基 |
10 μL |
50 μL |
250 μL |
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|
DNA(0.5–5 μg/μL) |
0.1 μg |
0.5 μg |
2.5 μg |
|
|
Universal-B溶液 |
0.2 μL |
1 μL |
5 μL |
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|
Universal-A溶液 |
0.2 μL |
1 μL |
5 μL |
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將DNA-脂質體復合物逐滴加到細胞中，輕輕混勻。 |
DNA-脂質體復合物 |
10 μL |
50 μL |
250 μL |
【注】該表使用量僅供參考，DNA與Universal-B溶液具體使用量還需根據(jù)細胞類型及其他實驗條件進行優(yōu)化。建議使用時比值保持在1:0.5-1:5之間。
相關產品
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名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
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Hieff Trans® Liposomal Transfection Reagent 脂質體核酸轉染試劑 |
40802ES02 |
0.5 mL |
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40802ES03 |
1.0 mL |
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40802ES08 |
5×1mL |
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Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸鈣法細胞轉染試劑 |
40803ES70 |
200 T |
|
Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺（10 mg/ml） |
40804ES76 |
500 μL |
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40804ES86 |
5×500 μL |
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Hieff Trans® Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent 懸浮細胞專用脂質體核酸轉染試劑 |
40805ES02 |
0.5 mL |
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40805ES03 |
1.0 mL |
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40805ES08 |
5×1 mL |
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|
Hieff Trans® in vitro siRNA/miRNA Transfection Reagent siRNA/miRNA體外轉染試劑 |
40806ES02 |
0.5 mL |
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40806ES03 |
1.0 mL |
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Polyethylenimine Linear(PEI) MW25000 線性PEI轉染試劑MW25000 |
40815ES03 |
1 g |
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40815ES08 |
5×1 g |
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Polyethylenimine Linear(PEI) MW40000（rapid lysis）線性PEI轉染試劑（速溶型）MW40000 |
40816ES02 |
100 mg |
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40816ES03 |
1 g |
HB220930
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