Hoechst 33342 染液(1 mg/mL)Hoechst 33342 Stain Solution(1mg/ml)
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產(chǎn)品說(shuō)明書
FAQ
COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
產(chǎn)品描述
Hoechst 33342 是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，它在嵌入雙鏈 DNA 后釋放強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光，對(duì)細(xì)胞的毒性較低。Hoechst 33342 常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。也可以用于普通的細(xì)胞核染色，或常規(guī)的DNA染色。
本系列產(chǎn)品均以溶液形式提供，其中Hoechst 33342染液(1 mg/mL)（Cat No.40732ES03）為特定濃度的產(chǎn)品，其濃度為1 mg/mL。用于細(xì)胞核染色時(shí)，推薦工作濃度為0.5-10 μg/mL。如需使用粉末狀該產(chǎn)品，可選購(gòu)Hoechst 33342（Cat No. 40731ES25）。
產(chǎn)品性質(zhì)
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中文名稱（Chinese Synonym） |
二苯甲亞胺, 三氯化氫 2'-(4-乙基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5'-二-1H-苯并咪唑 |
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英文名稱（English Synonym） |
2’-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride |
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分子式（Molecular Formula） |
C27H28N6O·3HCl |
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分子量（Molecular Weight） |
561.93 |
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CAS號(hào)（CAS NO.） |
23491-52-3 |
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熒光光譜（Fluorescence Spectral） |
Hoechst 33342的Ex/Em=346/460; Hoechst33342-核酸的Ex/Em=350/461. 熒光可用氙氣燈，泵弧燈或者UV激光激發(fā)；可用DAPI濾光器、藍(lán)色GFP濾光器、Alexa Fluor 350濾光器等檢測(cè)。 |
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純度（Purity） |
≥95%（HPLC） |
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結(jié)構(gòu)（Structure） |
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運(yùn)輸與保存方法
冰袋（wet ice）運(yùn)輸。
4℃避光保存，1 mg/mL的Hoechst 33342儲(chǔ)存液，有效期1年。
注意事項(xiàng)
1）Hoechst 33342 對(duì)人體有一定刺激性，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
2）熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。
3）為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
5）本產(chǎn)品僅作科研用途！
使用方法
1. 將1 mg/mL的Hoechst 33342用PBS或合適的緩沖液制備成10～50 µM Hoechst33342染色液。
2. 固定的細(xì)胞或組織染色：
對(duì)于固定的細(xì)胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則先進(jìn)行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst33342染色。如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33342染色。
a）對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片：加入適量Hoechst 33342染色液，覆蓋住樣品即可。
對(duì)于懸浮細(xì)胞：至少加入待測(cè)染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。
b）吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
c）直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長(zhǎng)350 nm，發(fā)射波長(zhǎng)460 nm。
3. 活細(xì)胞或組織染色：
a）細(xì)胞培養(yǎng)物中加入適量Hoechst 33342染色液，約1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對(duì)于六孔板一個(gè)孔需加入1 mL染色液，對(duì)于96孔板一個(gè)孔需加入100 μL染色液。
b）在 37℃培養(yǎng)細(xì)胞 10～20 分鐘。
c）用 PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次。
d）直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長(zhǎng)350 nm，發(fā)射波長(zhǎng)460 nm。
HB230129
