產(chǎn)品說明書
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產(chǎn)品描述
Hoechst 33258(赫斯特熒光染色液)是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，它在嵌入雙鏈 DNA 后釋放強烈的藍色熒光，對細胞的毒性較低。Hoechst 33258 常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測，也可以用于普通的細胞核染色，或常規(guī)的DNA染色。
用于細胞核染色時，推薦的Hoechst 33258工作濃度為0.5-10 μg/mL。
產(chǎn)品性質(zhì)
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中文名稱（Chinese Synonym） |
二苯甲亞胺, 三氯化氫 2'-(4-羥基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5'-二-1H-苯并咪唑 |
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英文名稱（English Synonym） |
2’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole,Trihydrochloride；bisBenzimide H 33258; HOE 33258 |
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分子式（Molecular Formula） |
C25H24N6O·3HCl |
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分子量（Molecular Weight） |
533.88 |
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CAS號（CAS NO.） |
23491-45-4 |
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熒光光譜（Fluorescence Spectral） |
Hoechest 33258的Ex/Em=346/460; Hoechest 33258-核酸的 Ex/Em=350/460; 熒光可用氙氣燈，泵弧燈或者UV激光激發(fā)；可用DAPI濾光器、藍色GFP濾光器、Alexa Fluor 350濾光器等檢測。 |
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純度（Purity） |
≥95%（HPLC） |
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結(jié)構(gòu)（Structure） |
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運輸與保存方法
冰袋（wet ice）運輸。-20℃干燥避光保存，有效期2年。
配制母液
Hoechst 33258溶于水，溶解度可達10 mg/mL。因此可用無菌超純水配制成1-5 mg/mL的儲存液于4℃避光保存。使用時用PBS或者其他合適緩沖液將其稀釋成0.5-10 μg/mL工作液。
注：Hoechst 33258溶于PBS或者其他緩沖液時會有沉淀產(chǎn)生，因此不能用上述緩沖液進行儲存液的配制。
注意事項
1）Hoechst 33258 對人體有一定刺激性，請注意適當防護。
2）熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。
3）為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5）本產(chǎn)品僅作科研用途！
使用方法
1. 用PBS或合適的緩沖液制備0.5-10 μg/mL Hoechst 33258染色液。
2. 固定的細胞或組織染色：
a）對于固定的細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色，則先進行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進行Hoechst33258染色。如果不需要進行其它染色，則直接進行后續(xù)的Hoechst 33258染色。
b）對于貼壁細胞或組織切片：加入適量Hoechst 33258染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞：至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。
c）吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
d）直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長350 nm，發(fā)射波長460 nm。
3. 活細胞或組織染色：
a）細胞培養(yǎng)物中加入適量Hoechst 33258染色液，約1/10細胞培養(yǎng)基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1 mL染色液，對于96孔板一個孔需加入100 μL染色液。
b）在 37℃培養(yǎng)細胞 10～20 分鐘。
c）用 PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。
d）直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長350 nm，發(fā)射波長460 nm。
相關(guān)產(chǎn)品
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40724ES10 |
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40731ES10 |
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36308ES11 |
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40728ES03 |
1 mg (200 μL) |
HB171206
