YeaGreen適用于藍(lán)光條件下觀察條帶，安全無毒！

產(chǎn)品簡介

 

YeaGreen是一種獨(dú)特的油性大分子，不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，不易揮發(fā)升華，人體不會(huì)吸入。艾姆斯氏測(cè)試結(jié)果也表明YeaGreen在凝膠染色濃度下完全沒有誘變性，因此相對(duì)于EB的強(qiáng)致癌性是一種安全無毒的核酸染料。適用于各種大小片段核酸的電泳染色，對(duì)核酸遷移率的影響遠(yuǎn)小于SYBR Green I。適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠，室溫下在酸或者堿性緩沖液中極其穩(wěn)定，耐光性強(qiáng)。

YeaGreen適用于瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳中的dsDNA、ssDNA以及RNA染色，可選擇膠染法或泡染法進(jìn)行染色，使用非常方便靈活。同SYBR Green I的光譜性質(zhì)，能在可見光凝膠透射儀（藍(lán)光透射儀）和藍(lán)光切膠儀下直接觀察，也適用于使用488 nm激發(fā)的紫外凝膠成像透射儀。

 

儲(chǔ)存條件

 

常溫避光保存，有效期3年。

 

使用方法

 

1. 膠染法（同EB，電泳前染色）

1）配制合適濃度的瓊脂糖凝膠，微波爐加熱至完全熔化。

2）制膠時(shí)加入YeaGreen核酸染料，使用終濃度為1×（每50 mL瓊脂糖溶液中加入5 μL YeaGreen 10,000×水溶液，以此類推）。

3）將含有YeaRed核酸染料的瓊脂糖溶液倒入制膠器并插好梳子，室溫下凝固約30-60 min。

4）按照常規(guī)方法上樣并電泳。

5）藍(lán)光掃描儀、藍(lán)光切膠儀下直接觀察，或者紫外下拍照觀察。

【注】：

a. 此方法比較節(jié)省染料，500 μL染料大約可以做100塊50 mL的膠。

b. 由于YeaGreen 具有良好的熱穩(wěn)定性，可以直接添加到熱的瓊脂糖溶液中而不需要等待溶液冷卻。搖晃，振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。

c. YeaGreen兼容所有常用的電泳緩沖溶液。

d. 如果總是看到條帶彌散或分離不理想，建議使用泡染法染色以確認(rèn)問題是否與染料有關(guān)。如果染色后問題依舊存在，則說明問題與染料無關(guān)，請(qǐng)嘗試：降低瓊脂糖濃度；選用更長的凝膠；延長凝膠時(shí)間以保證邊緣清晰；改進(jìn)上樣技巧或選擇泡染法染色。

e. 膠染法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠，對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠請(qǐng)使用泡染法。

2. 泡染法（電泳后染色）

1）配制合適濃度的瓊脂糖凝膠，微波爐加熱至完全熔化。

2）將瓊脂糖溶液倒入制膠器并插好梳子，室溫下凝固約30-60 min。

3）按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

4）用H₂O將YeaGreen 10,000×水溶液稀釋約3,300倍到0.1 M NaCl中，制成3× 染色液。（如將15 μL YeaGreen 10,000×水溶液和5 mL 1 M NaCl加到45 mL H₂O中）。

5）將凝膠小心地放入合適的容器中，緩慢加入足量的3×染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30 min左右，最佳染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對(duì)于含3.5～10%聚丙烯酰胺的凝膠，染色時(shí)間通常介于30 min到1 h，并隨聚丙烯酰胺含量增加而延長。

6）藍(lán)光掃描儀、藍(lán)光切膠儀下直接觀察，或者紫外下拍照觀察。

【注】：

a. 用泡染法染色時(shí)，染料用量較多。單次使用的染色液可重復(fù)使用3次左右。

b. 3×YeaGreen染色液可以大量制備，在室溫下避光保存直至用完。

c. Marker上樣量為5 μL，若為寬膠孔，需適當(dāng)增加上樣量；

d. 建議使用0.7-1.2% Agarose，電壓4-10 V/cm，1×TAE緩沖液電泳。

 

注意事項(xiàng)

 

1. 關(guān)于核酸染料相關(guān)產(chǎn)品的選擇：

1）如果您使用紫外成像儀，建議選擇YeaRed（Cat#10202ES）核酸染料，是EB的無毒替代品，具有同EB相同的光譜特性；如果您使用可見光透射儀或希望在可見光（藍(lán)光）下觀測(cè)，請(qǐng)選擇YeaGreen，在凝膠染色中是SYBR Green I的完美替代品，安全無毒。

2）YeaGreen雖然具SYBR Green I相似的光譜特性，且在凝膠染色方面效果優(yōu)于SYBR Green I，但不建議用于qPCR。建議使用專為此用途設(shè)計(jì)的RTGreen（Cat#10207ES）。

2. 少數(shù)情況下，質(zhì)粒經(jīng)某些酶切后的DNA樣品會(huì)出現(xiàn)拖尾和分辨率降低的問題，此時(shí)建議同時(shí)嘗試兩種染色方法以決定哪種方法更適合。

3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

4. 本產(chǎn)品僅作科研用途！

 

Ver.CN20241203