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      MitoTracker? Green FM 線粒體綠色熒光探針

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      產(chǎn)品說明書

      FAQ

      COA

      已發(fā)表文獻(xiàn)

      產(chǎn)品描述

      MitoTracker® Green FM是一種細(xì)胞滲透carbocyanine結(jié)構(gòu)衍生物,包含標(biāo)記線粒體的弱巰基反應(yīng)性的氯甲基官能團(tuán)。本品是一種亮綠色熒光探針(Ex=490 nm,Em=523 nm),其在水溶液中幾乎不發(fā)熒光,只有當(dāng)聚集在線粒體的脂質(zhì)環(huán)境才能發(fā)熒光,背景熒光幾乎可忽略。使得操作步驟極其簡單,只需用探針孵育細(xì)胞,即可被動(dòng)運(yùn)輸穿過細(xì)胞膜并直接聚集在活線粒體上,可不經(jīng)過清洗直接觀察。

      MitoTracker® Red CMXRos不同的是本品定位于線粒體的能力不受線粒體膜電位影響,使其可能作為定量線粒體質(zhì)量的一種工具。本品經(jīng)乙醛固定后染料不穩(wěn)定,因此更適合活細(xì)胞染色。

      雖然傳統(tǒng)的線粒體熒光探針如TMR和羅丹明123,也能很容易的聚集在功能線粒體上,但是一旦線粒體膜電位喪失即會(huì)被洗掉,從而在一些需要細(xì)胞進(jìn)行醛類固定或者包含線粒體能量狀態(tài)影響因子的實(shí)驗(yàn)中,使其應(yīng)用大受限制。

       

      產(chǎn)品性質(zhì)

      CAS號(hào)(CAS NO.)

      201860-17-5

      分子式(Formula)

      C34H28Cl5N3O

      分子量(Molecular weight)

      671.88

      外觀(Appearance)

      紅色固體

      激發(fā)波長(Ex)

      490 nm

      發(fā)射波長(Em)

      523 nm

      結(jié)構(gòu)式(Structure)

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      運(yùn)輸和保存方法

      室溫運(yùn)輸; -20℃避光干燥保存,有效期兩年。

       

      注意事項(xiàng)

      1DMSO有毒,使用時(shí)請小心操作。

      2、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

      3、本產(chǎn)品僅作科研用途!

       

      使用方法

      1. 儲(chǔ)存液的配制

      本品是以粉末形式提供,使用前需將本品回溫至室溫。

      之后使用細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)別的無水DMSO(如Yeasen,貨號(hào):60313ES60)將其充分溶解至終濃度1 mM

      本品M. Wt.= 671.88 g/moL,換算下來,50 µg粉末只需加入74.4 µL DMSO即可得到1 mM儲(chǔ)存液??筛鶕?jù)單次的使用量將儲(chǔ)存液分裝后放到-20℃避光,避免反復(fù)凍融。

      2. 工作液的配制

      根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖褂貌煌奶结槤舛?,以下的起始操作條件僅作參考,可根據(jù)細(xì)胞類型和其他的相關(guān)因素如細(xì)胞或組織的透化等進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。

      用適當(dāng)?shù)木彌_液或者細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋1 mM儲(chǔ)存液至工作液濃度。本探針MitoTracker® Green FM的推薦濃度為20-200 nM,濃度過高可能對(duì)其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)進(jìn)行染色。

      3. 染色及檢測

      3.1、貼壁細(xì)胞的染色

      培養(yǎng)皿/板內(nèi)加入適量的培養(yǎng)基覆蓋蓋玻片進(jìn)行爬片培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞長至所需豐度,吸除培養(yǎng)液,加入37℃預(yù)熱的MitoTracker® Green FM染色工作液。在所使用細(xì)胞正常培養(yǎng)條件下孵育15-45 min(最佳孵育時(shí)間需優(yōu)化)。染色結(jié)束后,使用新鮮培養(yǎng)液或緩沖液替換上述染色液,即可將其置于熒光顯微鏡下觀察或熒光酶標(biāo)儀下讀數(shù)。

      3.2、懸浮細(xì)胞的染色

      離心收集細(xì)胞,吸除上清,利用37℃預(yù)熱的MitoTracker® Green FM染色工作液輕輕重懸細(xì)胞。在所使用細(xì)胞正常培養(yǎng)條件下孵育15-45 min(最佳孵育時(shí)間需優(yōu)化)。染色結(jié)束后,離心收集細(xì)胞,利用37℃預(yù)熱的新鮮培養(yǎng)液或緩沖液重懸細(xì)胞,被染色的細(xì)胞可用流式細(xì)胞儀、熒光酶標(biāo)儀、熒光顯微鏡進(jìn)行分析。

       

      HB220418

      400-6111-883