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      High Sieving Agarose 高分辨率瓊脂糖(PCR級(jí))

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      產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

      FAQ

      COA

      已發(fā)表文獻(xiàn)

      產(chǎn)品簡(jiǎn)介

       

      瓊脂糖(Agarose)是純化的線性半乳聚糖親水膠體,提取自瓊脂或者含瓊脂的海藻,結(jié)構(gòu)上是一種線性聚合物,由β-D-吡喃半乳糖(1-4)連接3,6-脫水α-L-吡喃半乳糖基構(gòu)成。作為一種凝膠試劑,常用于通過(guò)凝膠電泳或者印跡法(如Northern或Southern)來(lái)進(jìn)行日常核酸分析,也適用于蛋白應(yīng)用,如輻射狀免疫擴(kuò)散(RID)實(shí)驗(yàn)。

      本品為PCR級(jí)高分辨率瓊脂糖,對(duì)PCR產(chǎn)物、小片段DNA具有較高的分辨率,適宜分離20 bp-800 bp的DNA片段,其分離效果可與聚丙烯酰胺相媲美。此外,還具有如下特點(diǎn):

      1. 易溶解,膠液更清澈,可以配制高達(dá)5%的凝膠;
      2. 很低的背景;
      3. 品質(zhì)穩(wěn)定等。

       

      瓊脂糖的基本參數(shù),包括:

      1)硫酸鹽含量(sulfate content)——純度指標(biāo),因?yàn)榱蛩岣谴嬖诃傊莾?nèi)的主要離子基團(tuán);

      2)凝膠強(qiáng)度(gel strength)——施加于凝膠使之?dāng)嗔训耐饬Γ?/font>

      3)膠凝點(diǎn)(Gel point)——水溶性瓊脂糖溶液冷卻后形成凝膠時(shí)的溫度。液體向凝膠轉(zhuǎn)化的過(guò)程中,瓊脂糖溶液具有滯后性,因此,膠凝點(diǎn)不等同于膠熔點(diǎn);

      4)電滲(EEO)——液體穿透凝膠的一種電動(dòng)運(yùn)動(dòng)。瓊脂糖凝膠內(nèi)的陰離子基團(tuán)吸附在基質(zhì)上不會(huì)發(fā)生遷移,但是解離的陽(yáng)離子就會(huì)朝負(fù)極遷移,從而產(chǎn)生電滲。由于生物聚合物的電泳遷移通常是朝負(fù)極運(yùn)動(dòng),則EEO產(chǎn)生的內(nèi)部對(duì)流會(huì)干擾分離效率。

       

      儲(chǔ)存條件

       

      室溫干燥保存,有效期5。

       

      注意事項(xiàng)

       

      1. 可用煮沸或微波加熱的方法來(lái)熔膠,瓊脂糖熔化必須徹底!此時(shí)瓊脂糖膠液清澈,否則,會(huì)造成電泳圖像模糊不清。熔膠可能會(huì)引起暴沸,需注意防止?fàn)C傷。微波爐中加熱時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。
      2. 用于電泳的緩沖液和用于制膠的緩沖液必須是相同的。
      3. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
      4. 本產(chǎn)品僅作科研用途!

       

      產(chǎn)品性質(zhì)

      CAS號(hào)(CAS NO.)

      39346-81-1

      外觀(Appearance)

      白色至類白色粉末

      凝膠強(qiáng)度(Gel Strength, 1.5%)

      750 (g/cm2)

      凝膠溫度(Gel Point, 1.5%)

      ≤33

      熔膠溫度(Melting Point, 1.5%)

      70

      電滲值(EEO, -mr)

      ≤0.10

      硫酸鹽(Sulfate, %)

      ≤0.10%

      水分(Moisture)

      ≤10%

      灰分(Ash Content)

      ≤0.5%

      DNA酶(DNase)

      None Detected

      RNA酶(RNase)

      None Detected

      蛋白酶(Protease)

      None Detected

      核酸內(nèi)切酶(Endonuclease)

      None Detected

       

      使用說(shuō)明

       

      凝膠制備方法

      1. 配制適量電泳及制膠用的緩沖液(根據(jù)電泳需要,配制合適濃度的電泳及制膠緩沖液),倒入合適三角瓶中。

      *用于電泳的緩沖液和用于制膠的緩沖液必須是相同的。

      1. 根據(jù)制膠量及凝膠濃度,加入準(zhǔn)確稱量的瓊脂糖粉(總液體量不宜超過(guò)三角錐瓶的50%容量)。
      2. 在微波爐中加熱溶解瓊脂糖,設(shè)置中火加熱至沸騰,保持膠液沸騰約30 sec,戴上防熱手套,移開(kāi)三角錐瓶,小心搖動(dòng)三角錐瓶,重懸未溶解顆粒,再次用高火加熱1 min(或加熱直至瓊脂糖完全溶解)。請(qǐng)戴上防熱手套,小心搖動(dòng)三角錐瓶,使瓊脂糖膠液充分均勻。

      *必須保證瓊脂糖充分完全溶解,此時(shí)瓊脂糖膠液清澈,否則,會(huì)造成電泳圖像模糊不清。加熱時(shí)如膠液劇烈沸騰發(fā)泡,停止加熱。微波爐中加熱時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。

      1. 使溶液冷卻至60℃左右,加入翌圣YeaRed核酸染料(Cat#10202ES,適用于紫外)或YeaGreen(Cat#10204ES,適用于藍(lán)光),使用終濃度為1×(即每50 mL瓊脂糖溶液中加入5 μL YeaRed/YeaGreen 10,000×水溶液)。
      2. 含有YeaRed/YeaGreen核酸染料瓊脂糖溶液倒入制膠模具中,在適當(dāng)位置處插上梳子。凝膠厚度一般在3-5 mm之間。
      3. 在室溫下使膠凝固(大約30 min-1 h),然后放置于電泳槽中進(jìn)行電泳。

      *凝膠不立即使用時(shí),請(qǐng)用保鮮膜將凝膠包好后在4℃下保存,一般可保存2~5天。

      1. 按照常規(guī)方法上樣并電泳。
      2. 紫外拍照觀察。

      瓊脂糖濃度與DNA分離范圍

      線性DNA片段大?。╞p)

      20-250 bp

      50-500 bp

      100-1200 bp

      500-2000 bp

      瓊脂糖濃度(%)

      5.0

      4.0

      3.0

      2.0

       

       

      Ver.CN20250212

       

      400-6111-883