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      Proteinase K蛋白酶K

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      產(chǎn)品說(shuō)明書

      FAQ

      COA

      已發(fā)表文獻(xiàn)

      產(chǎn)品簡(jiǎn)介

       

      Proteinase K(蛋白酶 K)是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶,其相對(duì)分子量約為29 kDa,可切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。Proteinase K 應(yīng)用廣泛,可用于制備脈沖電泳的染色體 DNA,蛋白質(zhì)印跡以及去除 DNA 和 RNA制備中的核酸酶等實(shí)驗(yàn),而變性劑如 SDS(1%)可提高其活性,常用工作濃度為 50-100 µg/mL,根據(jù)所用緩沖液是否含有SDS、尿素、pH、溫度等因素確定具體的工作濃度。

       

      組分性質(zhì)

       

      1)本品來(lái)源于基因重組酵母菌株;

      2)比活性值(Specific activity):≥30 U/mg 蛋白;

      3)不含 RNase 和 DNase;

      4)在尿素和 SDS 中活性穩(wěn)定存在;

      5)在較廣的 pH 范圍內(nèi)(pH 4.0 – 12.0)均有活性,最佳 pH 范圍為 pH 7.5 - 9.0;

      6)反應(yīng)條件:反應(yīng)緩沖液中在反應(yīng)溫度 37℃ - 70℃溫育 1 h。

      7)活力單位定義:在 37℃,pH 7.5 的條件下,每分鐘釋放 1 µM 酪氨酸所需要的 Proteinase K 量定義為 1 個(gè)活性單位;

      8)失活方法:反應(yīng)體系中加入 PMSF 或 DFP 抑制劑即可失活,65℃溫育 10-15 min 可部分失活。

       

      儲(chǔ)存條件

       

      冰袋運(yùn)輸。2~8℃干燥保存,有效期 3 年。更長(zhǎng)期保存,可置于-25~-15℃冷凍保存。

       

      注意事項(xiàng)

       

      1)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

      2)啟用后如需反復(fù)使用,需置于-20℃~-80℃冰箱冷凍或者配制成溶液后過(guò)濾除菌分裝保存。

      3)本產(chǎn)品僅作科研用途!

       

      使用說(shuō)明

       

      1. 20-40 mg/mL Proteinase K 儲(chǔ)存液的配制

      1)將干粉溶解于稀釋緩沖液中,配制成 40-80 mg/mL 原液;

      【注】:稀釋緩沖液配方:20 mM Tris-HCl (pH7.4), 1 mM CaCl2。

      2)使用低蛋白吸附的 0.22 µm 濾器過(guò)濾除菌;

      3)加入等體積無(wú)菌甘油,配制成含 50 %甘油的 Proteinase K 儲(chǔ)存液。

      【注】:Proteinase K 儲(chǔ)存液 4℃保存 1 年。若需反復(fù)使用,需分裝保存。

      2.按照核酸提取說(shuō)明書添加指定量 Proteinase K 儲(chǔ)存液即可。

       

      Ver.CN20240416

       

      400-6111-883