產(chǎn)品說明書
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COA
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Endo H（糖苷內(nèi)切酶 H）是一種重組糖苷酶，克隆自褶皺鏈霉菌（Streptomyces plicatus），能夠?qū)?/font>N-糖蛋白中的高甘露糖和某些雜合型寡聚糖的殼二糖核心結(jié)構(gòu)進(jìn)行切割，去除糖蛋白中的N-連接高甘露糖。翌圣Endo H糖苷內(nèi)切酶H在酵母中重組表達(dá)，儲(chǔ)存緩沖液中無甘油有助于在HPLC和質(zhì)譜分析中獲得最佳結(jié)果。本產(chǎn)品帶his標(biāo)簽，常應(yīng)用于抗體及其相關(guān)蛋白完全去糖基化。
另外，我司還提供其他類型的糖苷酶，如Endo S糖苷內(nèi)切酶S（Cat#20413ES），Fast PNGase F, N-糖苷酶 F（快速版）（Cat#20406ES, 可以在數(shù)分鐘內(nèi)對(duì)抗體、免疫球蛋白、融合蛋白以及其他糖蛋白進(jìn)行徹底和快速的去糖基化），儲(chǔ)存緩沖液中含甘油的PNGase F, N-糖苷酶 F (100000 U/mL)（Cat#20407ES）、儲(chǔ)存緩沖液中無甘油的PNGase F（Glycerol-free）, N-糖苷酶 F (無甘油，100000 U/mL)（Cat#20405ES）。
組分信息
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組分編號(hào) |
組分名稱 |
20414ES92 |
20414ES97 |
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A |
Endo H |
10000 U |
50000 U |
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B1 |
Buffer 1（10×） |
100 μL |
500 μL |
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B2 |
Buffer 2（10×） |
200 μL |
1000 μL |
產(chǎn)品性質(zhì)
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中文別名（Chinese synonym） |
糖苷內(nèi)切酶 H |
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英文別名（English synonym） |
Endo H |
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來源（Source） |
酵母 |
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分子量*（Molecular weight） |
理論值29 kDa |
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比活性（Specific activity） |
1000000 U/mL |
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儲(chǔ)存緩沖液（Storage Buffer） |
20 mM Tris，50 mM NaCl，5 mM EDTA PH7.5 |
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酶活定義（Unit Definition） |
1個(gè)酶活力單位指在10 μL的反應(yīng)體系中，37℃條件下1小時(shí)從10 μg變性RNase B中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。 |
*由于畢赤酵母真核表達(dá)的影響，SDS-PAGE（不煮沸）顯示目的蛋白的分子量約60 kDa，SDS-PAGE（煮沸）顯示目的蛋白的分子量約29 kDa。
儲(chǔ)存條件
-25~-15℃保存，有效期1年。
使用說明
- 變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化
1）在水中加入1 μL Buffer 1和目標(biāo)糖蛋白（1-20 μg），至終體積10 μL；
2）100℃溫度下煮沸10 min使其變性，冰上冷卻，離心10秒；
3）加入2 μL的Buffer 2，8μL去離子水，總反應(yīng)體積20 μL；
4）加入1-2 μL的Endo H，輕輕混勻。在37℃孵育1-3 h。
5）75℃下熱失活10分鐘。
- 非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化
1）在水中加入2 μL的Buffer 2和目標(biāo)糖蛋白（1-20 μg）至最終體積為 20 μL。
2）加入 2~5 μL 的 EndoH, 輕輕混勻。
3）37°C孵育 4-24 h。
注意：在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化，在非變性條件下可能需要增加Endo H的量和延長(zhǎng)孵育時(shí)間。
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20240813
推薦產(chǎn)品應(yīng)用
