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T7 RNA聚合酶,以含有T7啟動(dòng)子序列(5’-TAATACGACT CACTATAG*-3’)的雙鏈DNA為模板,以NTP為底物,合成與啟動(dòng)子下游的反向單鏈DNA互補(bǔ)的RNA。雙鏈線性平末端或5’突出末端DNA均可作為T(mén)7 RNA聚合酶的底物模板,因此線性質(zhì)粒、PCR產(chǎn)物均可用作體外合成RNA的模板。
本試劑盒應(yīng)用雙抗夾心酶聯(lián)免疫檢測(cè)(ELISA)的實(shí)驗(yàn)原理進(jìn)行T7 RNA聚合酶殘留量檢測(cè),將T7 RNA聚合酶標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本加入預(yù)包被抗T7 RNA聚合酶抗體的酶標(biāo)板(36705-A),然后加入稀釋后的生物素標(biāo)記的T7 RNA聚合酶檢測(cè)抗體(36705-C),最后加入Streptavidin-HRP(SA-HRP)(36705-D),形成抗體+抗原+抗體‐Biotin+ SA‐HRP 復(fù)合物,洗板后加入TMB顯色液(36705-H)顯色。TMB在HRP酶的催化下由無(wú)色轉(zhuǎn)化成藍(lán)色并在終止液(36705-I)的作用下最終轉(zhuǎn)化成黃色。黃色的深淺與樣本中被檢測(cè)到的T7 RNA聚合酶的量呈正相關(guān)。
產(chǎn)品信息
貨號(hào) |
36705ES48 / 36705ES96 |
規(guī)格 |
48 T / 96 T |
檢測(cè)范圍 |
0-64 ng/mL |
檢測(cè)方法 |
雙抗夾心法 |
檢測(cè)時(shí)長(zhǎng) |
3.5小時(shí) |
靈敏度 |
0.5 ng/mL |
回收率 |
75 - 125% |
板內(nèi)差 |
<10% |
板間差 |
<15% |
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
典型的參考標(biāo)準(zhǔn)曲線如下(以下標(biāo)準(zhǔn)曲線圖僅供參考,應(yīng)以同次實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品所繪標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本含量):
圖2:實(shí)驗(yàn)步驟流程簡(jiǎn)圖
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