Hieff Canace? Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase mix Hieff Canace?耐U+高保真DNA聚合酶混合液
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產(chǎn)品說明書
FAQ
COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
產(chǎn)品簡介
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase mix是即用型2×預(yù)混溶液，包含Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase，dNTP以及對高通量測序文庫擴(kuò)增而精心優(yōu)化的緩沖體系，具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、保真性好等優(yōu)點(diǎn)。在進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)時(shí)，體系只需加入引物和模板即可，簡化了實(shí)驗(yàn)操作步驟，減少了人為誤差，提高了實(shí)驗(yàn)通量和結(jié)果的重復(fù)性。本產(chǎn)品提供是所有試劑組分均經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)檢，最高程度保障產(chǎn)品優(yōu)異性能和批次間穩(wěn)定性。
儲存條件
-25~-15℃保存，有效期18個(gè)月。
使用說明
使用說明正文
- 文庫擴(kuò)增反應(yīng)體系（冰上配制）
- 將表1中試劑解凍后顛倒混勻，置于冰上備用。
- 于無菌PCR管中配制表1所示反應(yīng)體系。
表1. PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系
|
組分 |
體積 (µL) |
|
模板DNA |
X |
|
正向引物 (10-25 μM） |
1-2.5 |
|
反向引物 (10-25 μM） |
1-2.5 |
|
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase mix |
25 |
|
ddH2O |
Total to 50 |
- 使用移液器輕輕吹打貨震蕩混勻，并短暫離心將反應(yīng)液收集至管底。
- 將PCR管置于PCR儀中，設(shè)置表2所示反應(yīng)程序，進(jìn)行PCR擴(kuò)增。
表2. PCR擴(kuò)增反應(yīng)程序
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溫度 |
時(shí)間 |
循環(huán)數(shù) |
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98°C |
1 min |
1 |
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98°C |
10 sec |
1-15（根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求） |
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60°C |
30 sec |
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72°C |
30 sec |
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72°C |
5 min |
1 |
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4°C |
Hold |
- |
【注】：
1)預(yù)變性溫度推薦使用98°C。預(yù)變性推薦時(shí)間：質(zhì)粒DNA等簡單模板為30 sec；文庫為1 min；cDNA、基因組DNA等復(fù)雜模板為3 min；高GC含量模板為5-10 min。
2) 退火溫度推薦使用60°C，也可根據(jù)需要，設(shè)立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度。推薦退火時(shí)間為20 sec，可以在10-30 sec內(nèi)調(diào)節(jié)。退火時(shí)間太長可能導(dǎo)致擴(kuò)增產(chǎn)物在膠上呈彌散狀。
3) 延伸溫度和時(shí)間：推薦使用72°C，延伸時(shí)間根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行調(diào)整。
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。
2. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20240808
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