抗體偶聯(lián)藥物（Antibody-drug conjugate, ADC），是將單克隆抗體藥物的高特異性和小分子細(xì)胞毒藥物的高活性相結(jié)合，用以提高腫瘤藥物的靶向性、減少毒副作用。ADC藥物通常由三部分組成：抗體（Antibody），有效載荷（Payload）和連接物（Linker）。

圖1.抗體偶聯(lián)藥物（Antibody-drug conjugate）結(jié)構(gòu)^【1】

有效載荷(Payload)發(fā)揮ADC的細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞毒活性，通過接頭部分與抗體共價結(jié)合的細(xì)胞毒性劑的性質(zhì)非常重要，因為其作用機制將決定所得ADC作為抗癌化合物的效力及其可能的適應(yīng)癥。理想的有效載荷具備以下特點：具有足夠高的細(xì)胞毒性；具有足夠低的免疫原性；具有高穩(wěn)定性；具有可修改的功能組，而不會顯著影響其效力；具有旁觀者殺傷效應(yīng)；具有適當(dāng)?shù)乃苄?；靶點應(yīng)為細(xì)胞內(nèi)，因為大多數(shù)ADC需要進入腫瘤細(xì)胞才能釋放其有效載荷。

Payload分類

Payload可分為細(xì)胞毒類與非細(xì)胞毒類，絕大部分ADC都使用細(xì)胞毒類Payload。細(xì)胞毒類Payload有兩大代表，微管蛋白抑制劑和DNA抑制劑，其中DNA抑制劑又分為DNA損傷劑和拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑。微管蛋白抑制劑能夠干擾有絲分裂，腫瘤細(xì)胞分裂速度比大多數(shù)正常細(xì)胞更快，也使得微管蛋白抑制劑藥物對癌細(xì)胞殺傷更為有效。微管蛋白抑制劑可以分為兩種，一種可促進微管蛋白聚合，使微管生長不受調(diào)控，如海兔毒素類衍生物MMAE、MMAF；另一種能有效抑制微管組裝，誘導(dǎo)細(xì)胞的有絲分裂停止，如美登素類衍生物DM1、DM4。微管蛋白抑制劑是目前使用最為成熟的Payload，相比傳統(tǒng)的化療藥物的毒性強了許多，但也存在一些問題，比如微管蛋白抑制劑只能殺死處于細(xì)胞分裂期的腫瘤細(xì)胞，而對非分裂和靜態(tài)細(xì)胞的癌細(xì)胞無效，也較易產(chǎn)生耐藥性。能作用于整個細(xì)胞周期的DNA抑制劑，不僅對非分裂期的癌細(xì)胞有殺傷作用，還能殺傷對經(jīng)典微管蛋白抑制劑耐藥的癌細(xì)胞。作為第三代Payload的DNA抑制劑可通過雙鏈斷鏈、烷基化、嵌合、交聯(lián)、抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶I（TOPO1）等方式破壞DNA結(jié)構(gòu)與功能，促進癌細(xì)胞的死亡。

在獲批的14款A(yù)DC藥物種，Payload為海兔毒素類MMAE或MMAF的ADC藥物有6款，占到將近50%，在研的以MMAE為有效載荷的管線數(shù)也超過80個，海兔毒素類是目前最常用的Payload。

拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑相關(guān)產(chǎn)品，請查看：基于拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑的ADC們

表1.常用細(xì)胞毒類Payload分類

ADC既有大分子也有小分子，需要多種生物分析方法和平臺來分析ADC的多樣性。傳統(tǒng)的LC-MS/MS小分子分析方法通常用于分析未偶聯(lián)的有效載荷和DAR(Drug-to-antibody ratio, 表示每個抗體上所結(jié)合Payload分子的個數(shù)，是ADC的一個重要屬性。)隨時間的分布，而配體結(jié)合分析(LBA)和LC-MS/MS均可用于總抗體（TAb）和總ADC的分析?？筆ayload抗體在ADC的免疫原性分析中起到重要作用。

SDS-PAGE

Anti-DXD mAb on SDS-PAGE under reduced condition. The purity is 98.2%；

Anti-DXD mAb on SDS-PAGE under non-reduced condition. The purity is 98.4%.

SEC-HPLC

The purity of Anti-DXD mAb is 99.0% as determined by SEC-HPLC.

ELISA Data

Dose response curve shows that the EC50 of  Anti-DXD mAb  is 41.42 ng/mL.

參考文獻：