2013年,諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予了三位在細(xì)胞間囊泡運(yùn)輸?shù)恼{(diào)控機(jī)制領(lǐng)域做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家,自此開啟了外泌體研究的新時(shí)代。
▲ 圖1. PubMed外泌體相關(guān)文章統(tǒng)計(jì)(數(shù)據(jù)來源PubMed官網(wǎng))
▲ 圖2. 國(guó)自然外泌體課題中標(biāo)數(shù)量
01
來源
外泌體是細(xì)胞在生理或是病理狀態(tài)下分泌的直徑約為30 – 150nm的被雙層脂質(zhì)膜包裹的細(xì)胞外囊泡,是由細(xì)胞中的多泡體(Multivesicular body, MVB)和細(xì)胞膜融合釋放其內(nèi)部的管腔內(nèi)泡(Intraluminal vesicles, ILVs)到細(xì)胞外形成的。每種細(xì)胞都會(huì)產(chǎn)生獨(dú)特的外泌體,具有獨(dú)特的特性和內(nèi)容物。
▲ 圖3. 外泌體橫截面模式圖,內(nèi)部為hsp70蛋白(來源Wikipedia)
02
能力
外泌體中包含其起源細(xì)胞的各種分子成分,比如蛋白質(zhì),RNA和DNA,在細(xì)胞間物運(yùn)輸和信號(hào)交流中發(fā)揮著重要的作用,并且可以幫助細(xì)胞清理折疊錯(cuò)誤的蛋白等細(xì)胞廢物,幫助維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)。
![1631757593814821.jpg 圖4. 外泌體功能和特征[1].jpg](https://upload.yeasen.com/website/image/20210916/1631757593814821.jpg)
▲ 圖4. 外泌體功能和特征[1]
03
才華
外泌體因其是細(xì)胞天然產(chǎn)生的囊泡并具有一定的物質(zhì)運(yùn)輸能力,作為天然的細(xì)胞通訊系統(tǒng),在體液中廣泛存在,因此在新的藥物載體開發(fā)應(yīng)用上,外泌體具有毒性低,無免疫原性和滲透性好等優(yōu)勢(shì)。另一方面,不同細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體具有特異性,因此在疾病和腫瘤早篩中外泌體也有著巨大的潛力。
目前外泌體的分離方法主要有以下幾種:
提取方法 |
優(yōu)點(diǎn) |
缺點(diǎn) |
超速離心法 |
分離外泌體純度較高 |
操作繁瑣,耗時(shí)長(zhǎng) |
過濾離心 |
簡(jiǎn)單、省時(shí),不影響外泌體的生物活性 |
純度不足 |
密度梯度離心法 |
純度較高 |
前期準(zhǔn)備工作繁雜 |
聚合物沉淀法 |
簡(jiǎn)單、無需特殊設(shè)備 |
周期長(zhǎng)、易沉淀非外泌體污染物 |
凝膠排阻法 |
操作簡(jiǎn)單,分離外泌體純度高 |
技術(shù)難度略高,易染菌 |
免疫純化法 |
保證外泌體形態(tài)的完整、特異性高、操作簡(jiǎn)單 |
生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性 |
色譜法 |
得到的外泌體大小均一 |
設(shè)備特殊,價(jià)格高,應(yīng)用不廣泛 |
微流控技術(shù) |
產(chǎn)物純度高,分離速度快 |
技術(shù)未成熟 |
方法那么多,有沒有什么方法既簡(jiǎn)單又能得到質(zhì)量好的外泌體呢?當(dāng)然有啦!翌圣生物外泌體提取試劑盒,可在短時(shí)間內(nèi)獲得大量形態(tài)完好的外泌體,適用于下游外標(biāo)實(shí)驗(yàn)、電鏡分析、NTA檢測(cè)和WB檢測(cè)等試驗(yàn)。操作簡(jiǎn)單,4步即可完成實(shí)驗(yàn)。
提取產(chǎn)物經(jīng)過電鏡分析,NTA粒徑分析和WB實(shí)驗(yàn)三大外泌體金標(biāo)準(zhǔn)(國(guó)際細(xì)胞外囊泡學(xué)會(huì)(ISEV)提議,以電鏡鑒定外泌體形態(tài),以粒徑分析(NTA)鑒定外泌體大小,以WB檢測(cè)鑒定外泌體表面標(biāo)志物)驗(yàn)證,滿足您的實(shí)驗(yàn)需求。
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
41201ES25/50 |
25/50 mL |
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41202ES30 |
30 mL |
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41204ES10/30new |
10/30 T |
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41203ES05 |
5 T |
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52321ES05 |
2 mg |