免疫組織化學（Immunohistochemistry, IHC）是一種實驗技術，用于檢測組織切片中特定抗原（通常是蛋白質）的存在和定位。該技術廣泛應用于醫(yī)學研究、病理診斷和生物學研究中。
IHC的基本原理是利用抗原-抗體反應的特異性?？贵w是能夠特異性識別和結合抗原的蛋白質。當抗體與組織切片中的相應抗原結合后，通過檢測抗體上的標記物（如酶、熒光染料或金屬顆粒）的信號，可以在顯微鏡下觀察到抗原的位置和表達水平。
翌圣生物IHC全系列產(chǎn)品為您的IHC實驗保駕護航，助您獲取文獻級IHC圖像的旅途一帆風順。今天，小翌帶您詳細了解下我們?yōu)槟腎HC實驗中關鍵步驟所準備的試劑及注意點，助您完美躲坑。
組織固定和切片
實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類，前者包括石蠟切片（病理切片和組織芯片）和冰凍切片，后者包括組織印片、細胞爬片和細胞涂片。其中石蠟切片是制作組織標本最常用、最基本的方法，對于組織形態(tài)保存好，且能作連續(xù)切片，有利于各種染色對照觀察；還能長期存檔，供回顧性研究；石蠟切片制作過程對組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響，但可進行抗原修復。冰凍切片是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度，然后進行切片的方法,因其制作過程較石蠟切片快捷、簡便，而多應用于手術中的快速病理診斷。
產(chǎn)品詳情
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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10%中性福爾馬林溶液 |
100 mL/500 mL |
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4%多聚甲醛固定液 |
100 mL/500 mL |
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OCT冰凍切片包埋劑 |
118 mL |
烤片、脫蠟及水化
將切片放置與56~60℃的恒溫箱中2~6小時，將帶有蠟的組織切片牢固的黏在載玻片上，一面染色過程中切片脫落。使用二甲苯浸泡樣品，脫掉組織中的蠟，但是由于進入組織中的二甲苯不能與水溶性染色液相容，需要使用梯度的乙醇將組織中的二甲苯逐步替代出來。
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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Dewaxing Agent 環(huán)保浸蠟脫蠟劑 |
500 mL |
抗原修復
細胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后，會導致蛋白之間的交聯(lián)(cross-link)，從而遮蔽樣品的抗原位點，導致免疫染色時染色信號減弱，甚至出現(xiàn)一些假陽性染色結果。很多抗原的可視性可以通過抗原修復來提高，抗原修復可以打破福爾馬林固定時形成的蛋白質交聯(lián)，從而使被掩藏的抗原顯現(xiàn)出。
推薦使用檸檬酸緩沖液高溫高壓抗原修復法，其效果優(yōu)于微博修復發(fā)和直接煮沸修復法，使得免疫組化結果更加可靠。
產(chǎn)品詳情
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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Improved Antigen Retrieval Buffer(50X Citrate Sodium Buffer,pH 6.0) 改進型檸檬酸鈉抗原修復液(50X) |
100 mL |
細胞膜打孔
當目標抗原位于細胞內(nèi)部時，為了使抗體能夠進入細胞內(nèi)部，必須通過通透液暫時破壞細胞膜的完整性，使其變得通透。使用通透液有助于暴露抗原、核酸等作用靶點，使抗體、探針或標記物等更容易進入細胞內(nèi)，從而確保染色等的檢測效果。
產(chǎn)品詳情
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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免疫染色通透液(Triton X-100) |
100 mL/500 mL |
阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性
內(nèi)源性過氧化物酶廣泛存在于一些細胞和組織中，包括血紅細胞、腎臟和肝臟組織等。從而導致利用過氧化物酶的方法進行樣品檢測時會出現(xiàn)較高的背景，甚至出現(xiàn)假陽性結果。因此，細胞或組織樣品等在染色前宜使用適當?shù)倪^氧化物酶封閉液進行封閉，以消除內(nèi)源性過氧化物酶的干擾。
產(chǎn)品詳情
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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內(nèi)源性過氧化物酶封閉液 |
100 mL/500 mL |
背景封閉
抗體能被組織切片中富有電荷的膠原和結締組織成分吸附，從而導致背景著色，為了防止這種現(xiàn)象發(fā)生,最好在特異性抗體處理切片之前進行封閉，來降低背景染色和假陽性染色。我司給您準備好了各種動物的正常血清以及即用型封閉液。
產(chǎn)品詳情
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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Normal donkey serum 正常驢血清 |
10 mL |
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Normal rabbit serum 正常兔血清 |
5 mL |
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Normal mouse serum正常小鼠血清 |
5 mL |
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Normal goat serum 正常山羊血清 |
10 mL |
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Immunostaining Blocking Buffer 免疫染色封閉液 |
100 mL/500 mL |
抗原抗體結合
抗體的選擇，選擇已通過驗證可用于免疫組化（IHC）應用的一抗，來識別靶點；即可選擇直接帶有偶聯(lián)物的一抗又可以利用普通的一抗識別靶點，然后再利用帶有偶聯(lián)物的二抗進行識別一抗。
選擇抗體需要確認一下重要信息。
一抗：
1. Antigen（抗原名稱）：英文全稱、簡稱都提供, 中文最好也提供
2. Reactivity（反應性）：實驗用于什么物種, 是人, 大鼠還是小鼠等
3. Applications（應用）：已通過驗證可用于免疫組化（IHC）。
二抗：
1. Host（一抗名稱，種屬來源）
2. Conjugate（標記物）：抗體是酶標記還是熒光標記，還是其他。
另外小翌還為您準備了免疫組化筆（Cat#36310），可幫您在不影響實驗結果的前提下有效減少抗原抗體的使用量，并避免表面試劑流失造成的干片、脫片。
若您使用的是生物素標記的二抗，還需要添加辣根過氧化物酶標記鏈霉親和素（HRP-Streptavidin）后再顯色。
產(chǎn)品詳情
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Rabbit lgG(H+L) 過氧化物酶標記山羊抗兔IgG(H+L) |
100 μL |
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Alkaline Phosphatase AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG 堿性磷酸酶標記山羊抗兔IgG(H+L) |
100 μL |
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Biotin-SP AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) 生物素標記山羊抗兔IgG(H+L) |
100 μL |
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Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG(H+L) 過氧化物酶標記山羊抗小鼠IgG(H+L) |
100 μL |
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Alkaline Phosphatase AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG(H+L) 堿性磷酸酶標記山羊抗小鼠IgG(H+L) |
100 μL |
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Biotin-SP AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG(H+L) 生物素標記山羊抗小鼠IgG(H+L) |
100 μL |
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ImmHis™ Hydrophobic Barrier Pen ImmHis™ 免疫組化筆(疏水屏障) |
1支 |
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HRP Streptavidin 辣根過氧化物酶標記鏈霉親和素 |
100 μL |
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YSFluorTM 488-conjugated Streptavidin YSFluorTM 488標記鏈霉親和素 |
100 μL |
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YSFluorTM 647-conjugated Streptavidin YSFluorTM 647標記鏈霉親和素 |
100 μL |
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YSFluorTM594-conjugated Streptavidin YSFluorTM 594標記鏈霉親和素 |
100 μL |
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Primary & Secondary Antibody Diluent for Immunohistochemistry 免疫組化用一抗二抗稀釋液 |
100 mL/500 mL |
更多抗體產(chǎn)品歡迎進入官網(wǎng)選購：http://www.vaaedu.com/products/max/241
顯色
顯色是免疫組化染色的最后關鍵步驟，小翌給您準備了4款不同顏色的顯示試劑盒，適用于不同顯色系統(tǒng)，給您的圖像標上您想要的顏色。
產(chǎn)品詳情
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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BCIP/NBT Alkaline Phosphatase(AP) Substrate Kit for IHC BCIP/NBT顯色試劑盒(藍紫色,IHC) |
1 Kit |
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DAB Peroxidase Substrate Kit for IHC(Yellow Color) DAB顯色試劑盒黃色(IHC) |
1 Kit |
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DAB Peroxidase Substrate Kit for IHC(Blue Color) DAB 顯色試劑盒藍色(IHC) |
1 Kit |
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AEC Peroxidase Substrate Kit for IHC(Red Color) AEC顯色試劑盒紅色(IHC) |
1 Kit |
復染及封片
為使組織切片清晰的顯示組織結構，便于準確定位，常對切片進行復染，最常使用的細胞核染料為蘇木精。最后使用封片劑保存您的辛苦勞作，DAB染色最后使用中性樹脂封固，如果選用AEC染色，最后通常使用水性封片劑封片。
產(chǎn)品詳情
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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Hematoxylin Stain Solution 蘇木素染色液 |
50 mL/100 mL/500 mL |
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Neutral Balsam,Mounting Medium for Microscopy 中性樹膠(鏡檢用永久封片劑) |
100 mL |
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Fluoromount-G™抗熒光淬滅封片劑(水溶性) |
5 mL/25 mL |
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DAPI Fluoromount-G™ 抗熒光淬滅封片劑(含DAPI,水溶性) |
4 mL/20 mL |
以上就是IHC實驗的全流程攻略啦，小翌還想偷偷告訴您，為了讓您有更好的操作體驗，我們?yōu)槟鷾蕚淞嗣庖呓M化試劑盒，包含以上操作所需的所有試劑（您只需準備好您要檢測的一抗即可），讓您的實驗不僅結果好，而且省心。
產(chǎn)品詳情
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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Immunohischemistry Kit for Mouse Primary Antibody 小鼠免疫組化(IHC)檢測試劑盒? |
100T |
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Immunohischemistry Kit for Rabbit Primary Antibody 兔免疫組化(IHC)檢測試劑盒 |
100T |
