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      首頁(yè) / qPCR系列 / 產(chǎn)品應(yīng)用詳情

      一步完成gDNA去除與反轉(zhuǎn)錄,遠(yuǎn)離污染和降解風(fēng)險(xiǎn)!

      ——Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR

      常見(jiàn)的gDNA消化去除通常在正式反轉(zhuǎn)錄步驟之前,加入gDNA消化去除組分后,需在特定溫度下反應(yīng)一段時(shí)間,反應(yīng)冷卻后再加入相關(guān)的反轉(zhuǎn)錄組分進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,步驟多且耗時(shí)通常在半小時(shí)左右。

      小翌今天給大家?guī)?lái)一款快速反轉(zhuǎn)錄預(yù)混液,gDNA去除和反轉(zhuǎn)錄一步完成,且只要5分鐘,“咻”的一下,就可拿到想要的cDNA啦!

       

       
       

       

      在檢測(cè)基達(dá)水平時(shí),RNA樣品中的基因組DNA(gDNA)殘留是一個(gè)潛在的風(fēng)險(xiǎn)。gDNA可能會(huì)與目的RNA共同擴(kuò)增,從而產(chǎn)生假陽(yáng)性的現(xiàn)象,例如Ct值偏小、Ct值波動(dòng)以及熔解曲線雙峰。

      ▲ Ct值偏小/Ct值波動(dòng)

       

      如何避免RNA中殘留的gDNA帶來(lái)的干擾呢?通常情況下,我們可以選用帶gDNA去除的RNA提取試劑獲取高質(zhì)量的RNA或是針對(duì)提取的RNA在反轉(zhuǎn)錄時(shí)進(jìn)行g(shù)DNA消化去除處理。

       

       

       
      產(chǎn)品名稱(chēng)
       

      Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR(Cat #11151ES)

       

       

       
      產(chǎn)品特點(diǎn)
       
       

      一步完成:一步完成gDNA去除和反轉(zhuǎn)錄;
      快速反應(yīng):消化&反轉(zhuǎn)僅需5分鐘;
      高效合成:可保證100 pg RNA反轉(zhuǎn)錄;
      產(chǎn)物穩(wěn)定:cDNA產(chǎn)物可長(zhǎng)久穩(wěn)定保存。

       

       

       
      產(chǎn)品性能
       
       
      反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)量高
       
       

      圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板,分別檢測(cè)三種基因。品牌A、品牌B、品牌C均為一步gDNA去除&反轉(zhuǎn)錄試劑。測(cè)試結(jié)果顯示,在1 μg和10 ng Total RNA 投入下,11151ES反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量均優(yōu)于其他品牌,Ct值更小。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

       

      圖. 以擬南芥RNA為模板,品牌A、品牌B、品牌C均為一步gDNA去除&反轉(zhuǎn)錄試劑。測(cè)試結(jié)果顯示,在1 μg和10 ng Total RNA 投入下,11151ES反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量均優(yōu)于其他品牌,Ct值更小。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

       

       
      優(yōu)異的靈敏度
       
       

      圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板,擴(kuò)增30%GC、50%GC、60%GC和70%GC的基因。分別投入100 pg、1 ng、10 ng、100 ng、1 μg的Total RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄并進(jìn)行熒光定量檢測(cè)。結(jié)果顯示,11151ES可滿(mǎn)足100 pg-1 μg RNA的反轉(zhuǎn)錄。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

       

       
      cDNA產(chǎn)物穩(wěn)定性好
       
       

      圖.以人293T細(xì)胞RNA為模板進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,將獲得的cDNA產(chǎn)物進(jìn)行反復(fù)凍融,分別凍融10次、20次、30次。測(cè)試結(jié)果顯示11151ES反轉(zhuǎn)錄得到的cDNA產(chǎn)物在30次反復(fù)凍融處理后,仍保持高度的穩(wěn)定性,Ct值差異不大。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

       

      圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,將獲得的cDNA產(chǎn)物在-20℃、4℃、25℃和37℃的溫度條件下放置7天。測(cè)試結(jié)果顯示11151ES反轉(zhuǎn)錄得到的cDNA產(chǎn)物在不同溫度下存儲(chǔ)7天,仍保持高度的穩(wěn)定性,Ct值差異不大。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

       

       

      試劑盒穩(wěn)定性好

       
       

      圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板,將分別在-20℃、4℃和37℃的溫度條件下放置3天和7天的試劑盒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。測(cè)試結(jié)果顯示不同溫度不同時(shí)間放置下的11151ES反轉(zhuǎn)錄結(jié)果差異不大,試劑盒具有良好的穩(wěn)定性。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

       

       
      相關(guān)產(chǎn)品推薦
       

       

      方法

      分類(lèi)

      產(chǎn)品名稱(chēng)

      貨號(hào)

      RNA提取

      同Trizol提取

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      反轉(zhuǎn)錄試劑

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