——Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR
常見(jiàn)的gDNA消化去除通常在正式反轉(zhuǎn)錄步驟之前,加入gDNA消化去除組分后,需在特定溫度下反應(yīng)一段時(shí)間,反應(yīng)冷卻后再加入相關(guān)的反轉(zhuǎn)錄組分進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,步驟多且耗時(shí)通常在半小時(shí)左右。
在檢測(cè)基因表達(dá)水平時(shí),RNA樣品中的基因組DNA(gDNA)殘留是一個(gè)潛在的風(fēng)險(xiǎn)。gDNA可能會(huì)與目的RNA共同擴(kuò)增,從而產(chǎn)生假陽(yáng)性的現(xiàn)象,例如Ct值偏小、Ct值波動(dòng)以及熔解曲線雙峰。
▲ Ct值偏小/Ct值波動(dòng)
Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR(Cat #11151ES)
一步完成:一步完成gDNA去除和反轉(zhuǎn)錄;
快速反應(yīng):消化&反轉(zhuǎn)僅需5分鐘;
高效合成:可保證100 pg RNA反轉(zhuǎn)錄;
產(chǎn)物穩(wěn)定:cDNA產(chǎn)物可長(zhǎng)久穩(wěn)定保存。
圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板,分別檢測(cè)三種基因。品牌A、品牌B、品牌C均為一步gDNA去除&反轉(zhuǎn)錄試劑。測(cè)試結(jié)果顯示,在1 μg和10 ng Total RNA 投入下,11151ES反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量均優(yōu)于其他品牌,Ct值更小。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)
圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板,擴(kuò)增30%GC、50%GC、60%GC和70%GC的基因。分別投入100 pg、1 ng、10 ng、100 ng、1 μg的Total RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄并進(jìn)行熒光定量檢測(cè)。結(jié)果顯示,11151ES可滿(mǎn)足100 pg-1 μg RNA的反轉(zhuǎn)錄。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)
試劑盒穩(wěn)定性好
方法 |
分類(lèi) |
產(chǎn)品名稱(chēng) |
貨號(hào) |
RNA提取 |
同Trizol提取 |
TRIeasy™ Total RNA Extraction Reagent |
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免氯仿升級(jí)版 |
TRIeasy™ Total RNA Extraction Reagent(Tcm Free) |
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動(dòng)物組織/細(xì)胞總RNA提取,避開(kāi)有毒試劑,最快15 min完成 |
MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit細(xì)胞/組織總RNA提取試劑盒 |
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qPCR染料法 |
高靈敏通用型定量預(yù)混液(染料法) |
Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Master Mix |
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超高性?xún)r(jià)比定量預(yù)混液 (染料法),已發(fā)文章累計(jì)IF達(dá)到5000+ |
Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) |
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Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox) |
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Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox) |
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反轉(zhuǎn)錄試劑 |
5 min快速反轉(zhuǎn),最長(zhǎng)可滿(mǎn)足14 kb cDNA合成,含gDNA去除(下游應(yīng)用PCR/qPCR)-示蹤版New |
Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit |
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5 min快速反轉(zhuǎn),最長(zhǎng)可滿(mǎn)足14 kb cDNA合成,含gDNA去除(下游應(yīng)用PCR/qPCR)-常規(guī)版New |
Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit(No Dye) |
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高質(zhì)量第一鏈cDNA合成預(yù)混液,含gDNA去除(下游應(yīng)用qPCR) |
Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) |